新型隐球菌生态学和种群结构研究进展

新型隐球菌是广泛存在于环境中的病原真菌,其流行病学与各个变种的生态学密切相关。近年来,隐球菌病的发病率越来越高,所以研究自然环境中新型隐球菌各个变种的生态学、种群结构以及季节性流行变化,对及时有效地预防和控制隐球菌病的发生与传播有着重要意义。对国内外自然环境中新型隐球菌各个变种的生态学、种群结构以及季节性的流行变化的研究概况及研究成果进行了概述。     

动物源粪肠球菌快速鉴定方法的建立

为了快速、准确鉴定动物源粪肠球菌,本研究采集猪、牛、羊、鸡和马等不同动物源的粪样194份,接种到链球菌选择培养中进行分离和纯化,采用PCR方法扩增分离株中的tuf基因,采用常规微生物学方法检测其生理生化和培养特性。结果表明,194份粪样中分离到285株肠球菌,其中200株为粪肠球菌。该程序可在60 h内完成,为快速准确的鉴定粪肠球菌提供了一种可参考的方法和程序。     

342株肠球菌的临床分类及耐药性分析

目的:了解肠球菌的临床分离率及其对常用抗生素的耐药性,指导临床合理使用抗生素。方法:用Vitek 2 Compact法进行细菌鉴定及常规药敏试验。结果:临床分离到的342株肠球菌中,粪肠球菌有140例,阳性率40.9%,屎肠球菌有186例,阳性率54.4%,其它肠球菌有16例,阳性率4.7%。342株肠球菌主要分离自尿液254例,阳性率74.3%;血液28例,阳性率8.2%;脑脊液21例,阳性率6.1%;胆汁15例,阳性率5.3%。屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素和四环素的耐药率已接近或达到90%,而粪肠球菌对青霉素和氨苄西林仍保持100%敏感性。未发现肠球菌对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药。结论:革兰阳性球菌中肠球菌是引起医院感染的重要病原菌之一,肠球菌引起的感染性疾病的治疗一定要以药敏结果为指导合理选用抗生素。     

犊牛源粪肠球菌分离鉴定及药敏试验

从河北省围场县某养殖场患病死亡的犊牛脏器样品中分离到1株优势菌株,对其进行常规形态学观察、生化鉴定、16S r DNA基因序列测定、动物致病性试验及药敏试验。结果显示,分离菌株的生化鉴定特性与粪肠球菌的生化鉴定特性相符;分离菌株16Sr DNA基因序列与粪肠球菌的同源性为96. 2%;在系统发育进化树上分离菌株与粪肠球菌聚为一簇;分离菌株对小白鼠具有一定的致病性,并将其命名为EFC QHD-1;分离菌株EFC QHD-1对替米考星、复方新诺明、卡那霉素等耐药;对环丙沙星、氟苯尼考、阿莫西林等敏感。     

重症监护病房的肠球菌种类及其耐药性分析

目的:了解我院重症监护病房肠球菌的种类及对其耐药情况进行分析.方法:用法国梅里埃公司生产的全自动细菌分析仪Vitek-32进行肠球菌鉴定和K-B法进行药敏试验.结果:113株肠球菌中以粪肠球菌和屎肠球菌为主,共94株占总数的83.18%,其中粪肠球菌63株占55.75%,屎肠球菌31株占27.43%.肠球菌对替考拉宁和万古霉素的耐药性最低,但屎肠球菌对12种抗菌药物的耐药性明显高于粪肠球菌.结论:临床对肠球菌的检测应达到种的水平,屎肠球菌对抗菌药物的耐药性较粪肠球菌为高,已经检测出对糖肽类抗生素万古霉素及替考拉宁耐药的肠球菌,值得重视.     

艾滋病并发新型隐球菌脑膜炎11例临床分析

目的:分析艾滋病(AIDS)并发新型隐球菌脑膜炎临床特征、诊断方法、治疗和预后.方法:对云南省德宏州医疗集团人民医院1998年12月-2005年12月收住院的AIDS并发新型隐球菌脑膜炎病人11例进行回顾性分析.结果:所有病例均有高热和头痛以及神经系统症状如呕吐、嗜睡、昏迷等,不同程度存在AIDS相关表现.所有病例AIDS病毒抗体(HIV-Ab)确诊试验阳性.所有病例脑脊液(CSF)墨汁染色法查见发新型隐球菌.结论:AIDS并发新型隐球菌脑膜炎临床表现无特异性,CSF墨汁染色仍不失为一种简单实用的诊断方法.本病例病情危重,预后差,病死率高.     

粘细菌代谢产物对乳腺癌细胞抗性的作用

粘细菌是一类具有丰富代谢产物的药源微生物,有潜在的新药开发价值。乳腺癌是多发于女性的一种恶性肿瘤,目前尚不能较好的控制,使用具有新作用机理的新型药物治疗可能提供其良好的解决方案。本研究对内蒙古鄂尔多斯地区土壤样品中分离到的七株粘细菌进行鉴定并对其代谢产物进行抗人乳腺癌MCF-7细胞检测,为研发高效安全的新型抗肿瘤活性物质奠定基础。采用兔粪诱导法、大肠杆菌划线法、大肠杆菌点种法、纤维素诱导法对采集的土样进行粘细菌的分离,通过形态学结合分子生物学手段鉴定纯化的粘细菌菌株。采用CCK-8法对粘细菌产生的代谢产物进行MCF-7细胞毒性检测,并对其抗肿瘤活性进行评价。经鉴定,E44属珊瑚球菌属珊瑚状珊瑚球菌（Corallococcus coralloides）,E603、E1201、E1202为粘球菌属变绿粘球菌（Myxococcus virescens）,E701、E703、E705为粘球菌属橙色粘球菌（Myxococcus fulvus）,其代谢产物均对人乳腺癌MCF-7细胞株具有抑制作用,最高肿瘤细胞抑制率在70.45%-106.29%之间,其中Myxococcus fulvus E701代谢产物对肿瘤细胞的抑制效果最强。本次实验分离的七株粘细菌菌株对人乳腺癌MCF-7细胞株均有明显的抑制效果,该研究为今后菌株活性物质的分离鉴定及作用机理研究奠定了基础。     

致羔羊脑炎型粪肠球菌的分离及鉴定

北疆地区几个不同羊场的羔羊连续几年发生了以各种神经症状和死亡为主要特征的疾病。对病、死羊进行了病原菌的分离、培养、生化鉴定、血清学鉴定和动物回归实验等,确定其致病菌为粪肠球菌。     

致羔羊脑炎粪肠球菌的分布规律

为了确定致羔羊脑炎粪肠球菌在人工感染小鼠体内的分布规律,本研究采用粪肠球菌人工培养物腹腔注射小鼠,无菌采集死亡或濒临死亡小鼠脏器,利用已建立的PCR技术对人工感染肠球菌小鼠主要脏器进行检测,结果显示在受检的6种组织中,即肝、脾、心、脑、肾均能扩增出与预计大小112bp一致的粪肠球菌的DNA阳性条带。与细菌分离结果一致。     

新型载盐酸四环素根尖充填材料的制备及其性能

目的:探讨新型载盐酸四环素根尖充填材料(NRFM-THC)制备、理化性能、细胞相容性及其对粪肠球菌的抑制作用.方法:在新型根尖充填材料中添加质量分数为1%盐酸四环素制备NRFM-THC;采用傅立叶红外光谱、X-射线衍射对其表征,并检测其固化时间、抗压强度、抗稀散性和X射线阻射性能;MTT比色法检测其细胞相容性;琼脂糖扩散法及直接接触法检测其对粪肠球菌的抑制作用.结果:NRFM-THC主要成分为羟基磷灰石、羧酸钙盐及氧化锆,固化时间为(11.7±0.6)min,固化1 d及7 d组抗压强度分别为(43.9±4.5)MPa及(69.6±13.5)MPa,X射线阻射值等效于(3.6±0.2)mm纯铝,抗稀散性能良好等;细胞毒性分级为0级或Ⅰ级,符合GB/T 16886.5—2003标准;对粪肠球菌有抑制作用.结论:NRFM-THC具有良好的理化性能、细胞相容性及抑制粪肠球菌性能.     

中药复方对口腔致病粪肠球菌超微结构的影响

目的:观察黄芩、大黄、五倍子、蛇床子4种药物及其配伍组合的中药复方对口腔致病粪肠球菌超微结构的影响.方法:采用透射电镜进行观察中药处理后的粪肠球菌形态结构的改变.结果:经黄芩处理后的粪肠球菌细胞壁较完整,胞浆轻度变性;大黄组大部分胞壁不完整,破裂呈不连续状态,质壁分离严重,胞浆内可见大量颗粒样黑色沉淀;五倍子组的胞壁无明显变化,胞浆基本完整;蛇床子组胞壁变薄,胞浆变性严重;中药复方组的细胞壁失去原有结构而明显变薄或消失,细胞变形,出现裂解或自溶状态,核浆消失,大量细胞内容物外排.结论:中药复方对口腔致病粪肠球菌抗菌效果良好.     

艾滋病并发新型隐球菌脑膜炎11例临床分析

目的：分析艾滋病（AIDS）并发新型隐球菌脑膜炎临床特征、诊断方法、治疗和预后。方法：对云南省德宏州医疗集团人民医院1998年12月—2005年12月收住院的AIDS并发新型隐球菌脑膜炎病人11例进行回顾性分析。结果：所有病例均有高热和头痛以及神经系统症状如呕吐、嗜睡、昏迷等,不同程度存在AIDS相关表现。所有病例AIDS病毒抗体（HIV-Ab）确诊试验阳性。所有病例脑脊液（CSF）墨汁染色法查见发新型隐球菌。结论：AIDS并发新型隐球菌脑膜炎临床表现无特异性,CSF墨汁染色仍不失为一种简单实用的诊断方法。本病例病情危重,预后差,病死率高。     

68株临床分离肠球菌的耐药性检测及临床意义

目的：了解肠球菌在临床标本中的分布及对常用的抗菌药物的耐药现状，指导临床合理用药．方法：对临床标本中分离出的细菌进行系统检验，采用纸片法对分离鉴定后的肠球菌进行药物敏感性试验．结果：肠球菌可在临床常见的多种标本中检出，粪肠球菌（86．7％）明显多于屎肠球菌（10．3％），其他肠球菌（3％）少见．对常用抗菌药物的耐药性，粪肠球菌和屎肠球菌之间的差异无统计学意义．结论：临床医生应关注临床常见病原菌的耐药性研究，参考抗菌药物敏感性试验结果调整用药种类．     

92株肠球菌的临床感染及耐药性分析

目的:了解肠球菌的临床感染特点和耐药性,为指导临床用药,控制感染提供依据.方法:回顾性分析2007年7月至2010年7月间从江汉大学附属医院临床标本中分离出的92株肠球菌的分布情况及药物敏感试验结果.结果:分离的92株肠球菌中粪肠球菌占73.9%,屎肠球菌13.1%,其他种类肠球菌13.0%.主要来源于尿液标本,占33.7%,且主要分布于干部病房和重症监护病房等科室.药敏结果显示耐药率最高的是环丙沙星38.0%和红霉素37.0%;青霉素G、氨苄西林和左旋氧氟沙星也呈中度耐药;替考拉宁和呋喃妥因的耐药率较低,为6.5%;未发现耐万古霉素和耐利奈唑胺的肠球菌.结论:该院肠球菌以粪肠球菌感染为主,主要引起泌尿道感染,对临床常用抗菌药物有不同程度的耐药,医务人员应根据药敏试验结果合理使用抗生素并加强对细菌耐药性的全面监测.     

藏绵羊肠道乳酸菌的分离鉴定及系统进化分析

为解藏绵羊肠道乳酸菌的菌群组成及其基本生物学特征,无菌采集12头健康藏绵羊新鲜粪便,分离培养及纯化乳酸菌株,并通过16S rDNA序列扩增和测序进行分子鉴定.结果显示:从12个样本中共分离纯化出19株乳酸单菌,分属于7个属,其中鹑鸡肠球菌、海氏肠球菌、粪肠球菌及植物乳杆菌所占分离比例较多.该结果为进一步了解藏绵羊肠道乳酸菌的菌群种类及藏绵羊益生菌制剂的开发提供了基础.     

新型隐球菌性脑膜脑炎的临床症状及MRI特点

目的研究新型隐球菌脑膜脑炎的临床特点及MRI特点.方法收集北华大学附属医院1999~2005年间确诊为新型隐球菌性脑膜脑炎的12例患者,分析相关资料.结果12例患者中,脑脊液压力正常3例,升高9例,10例涂片阳性,2例脑脊液培养阳性.MRI示2例正常,10例异常,为长T1、长T2信号.治愈10例,死亡1例,自动出院1例.结论临床症状、体征及脑脊液改变,加之MRI特点是早期诊断和治疗新型隐球菌脑膜脑炎的重要信息,对疾病的转归及预后密切相关.     

肠球菌临床耐药性分析及耐药基因vanM在屎肠球菌中的检测

目的了解肠球菌临床分离株耐药性及vanM基因在屎肠球菌的分布情况,为临床合理用药及探讨耐药机制提供依据.方法采用VITEK60全自动微生物分析仪对肠球菌进行鉴定及药敏试验,按NCCLS/CLSI标准判断并统计分析结果;PCR法检测耐万古霉素、替考拉宁菌株中的耐药基因vanM,并对阳性基因进行测序,分析耐药基因与耐药性的关系.结果临床分离肠球菌共506株,其中屎肠球菌277株,粪肠球菌229株.尿液标本来源比例最高,为167株（33%）;粪便标本114株（22.5%）;痰液标本78株（15.4%）;胆汁标本57株（11.3%）;脓液标本54株（10.7%）;其他来源36株（7.1%）.药敏结果显示：肠球菌对大部分临床抗菌药高度耐药,屎肠球菌对β-内酰胺类抗菌药物（氨苄西林）、喹诺酮类（左氧氟沙星）、糖肽类（万古霉素、替考拉宁）的耐药率明显高于粪肠球菌（P〈0.05）.vanM基因在耐万古霉素菌株中的检出率为100%,耐替考拉宁菌株检出率为90%.结论屎肠球菌可引起临床各类感染,屎肠球菌对大多数抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌,且呈多重耐药趋势.vanM基因可能在糖肽类药物万古霉素、替考拉宁耐药机制中发挥重要作用.     

中枢神经系统新型隐球菌感染临床分析(附22例报告)

报告了22例中枢神经系统新型隐球菌感染,并对影响预后的因素进行了初步分析。结论：早期诊断、早期治疗是提高治愈率的关键;合并视乳头水肿、脑实质损害、脑脊液压力过高及糖含量过低者预后不良;诊断不明者使用激素及抗菌素影响预后;大扶康是治疗隐球菌脑膜炎或隐球菌脑膜脑炎的有效药物。     

致羔羊脑炎粪肠球菌人工感染羔羊的试验研究

将从发生羔羊脑炎病例中分离纯化的粪肠球菌经静脉注射接种于健康的2只美利奴羔羊和1只土种羔羊.结果显示,被感染羊均表现出与自然感染绵羊相似的临床症状和病理变化,并从脑、心血、肝等组织中回收到了接种菌,从而证明了该粪肠球菌分离株具有较强的致病性.     

致羔羊脑炎粪肠球菌EF3183基因的克隆与生物信息学分析

为研究致羔羊脑炎粪肠球菌分离株表面蛋白EF3183基因的结构及功能,采用PCR方法扩增EF3183基因,将阳性克隆进行测序,用生物信息学软件预测其分子结构,推测其生物学功能,并构建系统进化树。结果显示:成功获得了长1060 bp的表面蛋白EF3183基因;经生物信息学分析,此序列包含有1个1056 bp的完整开放阅读框,编码351个氨基酸;无信号肽;有2个跨膜区;抗原表位预测显示表面蛋白EF3183有15个抗原表位;系统进化树分析显示致羔羊脑炎粪肠球菌XJ11株表面蛋白EF3183基因与粪肠球菌v583的EF3183基因的进化距离最近。本研究成功获得了致羔羊脑炎粪肠球菌EF3183基因,为今后研究此基因的生物学功能奠定了基础。