葡萄糖异构酶变性与复性的有关光谱

葡萄糖异构酶(GI)是当今重要的工业酶制剂之一。本文采用GU·HCI作变性剂,Co~(2+)为保护剂,对GI的变性与复性作用的有关光谱进行了一些研究。 1材料     

温度、酸碱度和变性剂对黄花石蒜凝集素活性和构象的影响

采用荧光光谱研究了不同温度、pH和变性剂对黄花石蒜凝集素（Lycoris aurea agglutinin,简称LAA）凝血活性和分子构象的变化关系,结果表明：LAA具有较强的温度和酸碱度的耐受性,经过3种变性剂的处理都能使LAA分子构象发生不同程度的变化并导致活性的丧失,浓度为6 mol/L的盐酸胍和脲,20 mmol/L的SDS可以使LAA完全丧失凝血活性,荧光光谱的变化表明了这种变性过程具有阶段性.     

层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶色氨酸环境的光谱探测

应用N-溴化琥珀酰亚胺(N-bromosuccinimide)研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶(PecE、PecF)色氨酸的化学修饰,用紫外吸收光谱、圆二色光谱和荧光光谱探测了色氨酸化学修饰过程中蛋白质结构微观环境,发现PecE和PecF的色氨酸都处在疏水区域或带负电荷区域,PecE的色氨酸残基更靠近分子表面.由于色氨酸是藻红蓝蛋白裂合异构酶的必需氨基酸,这些分析加深了解了色氨酸在藻红蓝蛋白裂合异构酶催化过程中的作用.     

应用光谱技术研究葡萄糖异构酶与金属离子的作用

利用紫外差分光谱和可见光谱对产自嗜热放线菌M1033菌株的葡萄糖异构酶进行了研究。结果表明，葡萄糖异构酶与其金属激活离子Co^2 ,Mg^2 及抑制离子Ca^2 存在键合作用，这种键合使用至少存在强键和弱键两种不同的结合方式，其结果使得葡萄糖异构酶分子结构发生了变化。Co^2 与酶分子有8个强键结合位，6个弱键结合位，而Mg^2 和Ca^2 则分别有32个和26个强键结合位，这3种金属离子在酶分子上有一些相同的结合位，结合物的微环境中存在色氨酸或酪氨酸残基。     

黄牛肝菌凝集素的化学修饰与荧光光谱研究

对黄牛肝菌凝集素(Boletus fulvus lectin,BFL)进行氨基酸化学修饰,结果表明,Trp残基、Tyr残基及Ser/Thr残基的修饰都会对BFL的凝血活性产生影响,表明这些残基是BFL凝血活性所必需的,可能参与了其凝血活性中心的构成.而Arg残基修饰后,BFL的凝血活性未发生改变,表明Arg不是维持BFL凝血活性的必需基团.内源荧光光谱分析结果表明,BFL所发射的荧光是由Trp残基贡献的,且Trp残基在BFL分子中所处的微环境极性较弱,屏蔽于一定的构象当中.温度、pH值及变性剂对BFL内源荧光光谱的影响与基本理化性质的实验结果一致.氨基酸修饰对荧光光谱的影响表明,Trp残基修饰会引起BFL內源荧光光谱较大变动,而Tyr、Ser/Thr残基修饰对BFL內源荧光光谱影响不大.     

受激拉曼光谱系统的研制

拉曼光谱是一种包含丰富样品结构信息的光谱技术,但是拉曼光谱检测的缺点是检测灵敏度低和荧光干扰.本实验室研制的受激拉曼光谱系统,是将一束皮秒(10-12 s)脉宽的可见泵浦光和一束由飞秒(10-15 s)脉宽的探测白光共同作用于样品,产生受激拉曼信号.该光谱系统的拉曼泵浦光在可见和近紫外波段可连续调谐,可以同时获取受激拉曼光谱的增益和损失光谱,具有灵敏度高和抑制荧光干扰等优点.分别考察了拉曼泵浦光和拉曼探测光脉冲相对时序、拉曼泵浦光强度对受激拉曼光谱的影响,受激拉曼信号强度在拉曼泵浦和拉曼探测脉冲时间上完全重合时达到最大.在拉曼泵浦光强较小时,受激拉曼谱峰强度随泵浦光强度增大而增大;当拉曼泵浦光强度较大时,损失谱峰强度会趋于饱和,在研究的光强范围内增益谱峰会持续增长,未达到饱和.     

可见光——近红外光谱矿物信息提取预处理技术

地物光谱特征研究是高光谱图像处理的基础,受观测环境的影响,野外测量的光谱数据中包含有噪声,不利于光谱矿物信息提取工作的进行.本文从光谱矿物信息提取的角度出发,探讨出一套光谱数据预处理流程.比较了小波降噪和Savitzky－Golay降噪的优缺点,实验表明,Savitzky－Golay方法更适合光谱降噪处理.在实际应用中,发现当前常用包络线算法存在一些局限性,在此基础上提出了一种改进的包络线算法.     

多色空间相干光经环形光阑衍射后的近场研究

研究了多色空间完全相干光经过环形光阑衍射后在近场出现的光谱变化,并给出了详细的数值计算结果和具体实例.结果表明,在近场强度为零的奇点附近也同远场一样发生了光谱显著的变化,即奇点一侧光谱发生红移,奇点另一侧光谱发生蓝移,而在奇点处则发生了红移和蓝移之间快速的转变.研究表明,中心拦截比的变化对近场的这种光谱变化有很大的影响,并随着中心拦截比的增大,近场逐渐过渡到远场.     

底物及其类似物对葡萄糖异构酶有关光谱的影响

采用均一态葡萄糖异构酶为试样,在其与底物或底物类似物共存下,测定了UV谱、荧光光谱和CD谱。     

潜望镜照相窗口光学系统二级光谱校正分析

潜艇潜望镜光学系统的二级光谱非常大,严重影响潜望镜照相窗口照片的清晰度和分辨率.根据二级光谱像差理论,将多光谱CVD硫化锌光学材料应用于潜望镜照相窗口光学系统.采用光学设计软件ZEMAX进行优化设计,结果表明这种材料在潜望镜照相窗口光学系统中具有良好的消像差作用,成像质量优良,能满足较高的使用要求.最后进行了环境变化对光学系统的影响分析,确定了该光学系统的环境自适应区间.     

h—SOD在脲、胍变性剂中的光谱学特征

研究了人血超氧化物歧化酶（h-SOD)在脲、胍及不同温度下变性的分子构象与活力之间的关系。酶的吸收光谱与酶活力的变化表明：当用不同的变性剂处理后,酶蛋白的空间结构发生了改变,紫外吸收表现出明显的增色效应;酶的荧光强度随脲浓度的增加有所增加随胍浓度的增加明显下降,在4mol/L胍变性条件下,h-SOD的发射峰自337nm红移到353nm,且酶活力明显下降。据此结果推测：酶活力的下降与构象的改变是同步发生的。     

大阪鲫鱼两种卵黄蛋白紫外吸收特性的研究

采用大柱制备电泳的办法从大阪鲫鱼卵巢中提纯出两种蛋白质:卵黄脂磷蛋白和类似于卵黄高磷蛋白的卵黄蛋白L。分析了两种蛋白的氨基酸组成,并对两种蛋白的紫外吸收和紫外吸收四阶导数谱特性进行了分析研究。发现卵黄脂磷蛋白在溶液的pH改变(pH3.12-8.12-11.00)时。紫外吸收谱和四阶导数谱未发生明显变化,而卵黄蛋白L在溶液的pH改变(pH7,66-9,35-11,89)时,其紫外吸收谱最大吸收波长红移,紫外吸收四阶导数谱出现新的未知峰,发生显著变化。这表明卵黄脂磷蛋白所含的大量脂类存在于蛋白质分子的表面,从而影响了蛋白质分子中产生紫外吸收的氨基酸—酪氮酸、色氨酸、苯丙氨酸的紫外吸收。在卵黄蛋白L中,这几种氨基酸则位于蛋白质分子的表面,从而对溶液pH的变化尤为敏感。     

Effect of Urea on Activity and Conformation of a Glycoprotein

Introduction In some enzymes, inactivation occurs before noticeable conformational change can be detected during denaturation by guanidinium chloride or urea[1-6]. Tsou[7] suggested that enzyme active sites are formed by relatively weak molecular interact…     

白术多糖的溶液构象及其变化

采用刚果红实验判断白术多糖WAM在溶液中的构象特征,通过测定不同溶液体系中多糖分子的黏度、比旋度、紫外吸收光谱和圆二色谱的变化来研究多糖构象及其变化规律.实验结果表明:WAM不具有螺旋结构,温度、金属离子、变性剂均可以使WAM构象发生改变.WAM在溶液中以无规则线团形式存在.     

绿色木霉NUST~(996)发酵产纤维素酶的提纯和性质分析

该文研究了绿色木霉发酵产纤维素酶的情况。对NUST996的纤维素酶酶活力和发酵参数进行了测定 ,通过葡聚糖SephadexG - 2 0 0柱层析对纤维素酶进行了分离提纯 ,表明其主要含 2种组分。通过红外、紫外光谱等手段进一步分析其组成 ,对其中CMC(羧甲基纤维素酶 )组分对热及 pH的稳定性进行了分析 ,并测定了其米氏常数。     

柚皮苷与人血清蛋白作用机理探索

利用荧光光谱及同步荧光光谱法研究了柚皮苷与人血清蛋白相互作用.结果表明,相互作用使得人血清蛋白荧光猝灭且引起蛋白构象改变;猝灭常数大小证明人血清蛋白荧光猝灭机制为静态猝灭;根据能量转移原理求得结合距离为3.7 nm,存在发生能量转移的可能性.     

计算机辅助解析FTIR定量研究蛋白质构象的应用进展

综述了计算机辅助解析傅里叶变换红外光谱在蛋白质构象定量研究中的应用进展,简要介绍了红外光谱测定及二阶导数谱、去卷积和曲线拟合等计算机数学处理方法.对已有的研究结果进行了分类总结,最后讨论了该领域中存在的问题和发展方向.     

Effects of Alkali Treatment on the Structure of Tencel Fibers

Alkali treatment can change the structures and properties of cellulosic fibers. The aim of this work was to study the mechanism of structure changes of Tencel fibers treated with different alkali concentration and two treatment methods. Raman spectrum showed that the molecular conformation of Tencel fibers remained unchanged. XRD (X-ray diffraction) indicated that the crystallinty of Tencel fibers in original length increased while that of fibers in relaxation condition remained unchanged. The average crystallite size increased and the orientation index decreased. The quasi-crystallite disassociation and recrystallization in the quasi-crystalline phase during the process of alkali treatment lead to the changes of the crystallinity and the orientation index of Tencel fibers.     

双规准反应谱与统一设计谱理论

双规准反应谱的概念和统一设计谱的理论是基于当前各类结构抗震规范设计谱普遍存在的不确定性和现有大量强震记录由于信息不完备而得不到有效利用的现实提出的．首先给出了地震动双规准加速度反应谱的概念,分析了双规准加速度谱在表征地震动频谱特性方面与传统反应谱相比较所具有的新特点,探讨了双规准加速度谱用于建立抗震设计谱的构想和方法;其次,叙述了双规准拟速度反应谱的概念,通过对典型近断层地震动双规准拟速度谱的分析,将双规准拟速度谱应用于近断层设计谱的确定中;最后,针对双规准反应谱在表征地震动一致特性方面的突出优势,提出了基于双规准反应谱发展统一设计谱理论,并建立新一代抗震设计谱理论体系的设想．