受精滴中精子不同平衡时间对牛卵母细胞体外受精的影响

为寻找精子在受精滴中的最佳平衡时间, 以加入精子时间为０ ｈ （对照组）, 分别在０ｈ, ０．５ ｈ, １ ｈ, ２ ｈ, ４ ｈ 随机加入等数卵母细胞到各受精滴, 结果显示： ０ ｈ, ０．５ ｈ 组卵裂率较高, 分别为８７．７％ 、８４．７％ , 与其他组相比差异显著（ Ｐ＜ ０．０１）; ０．５ｈ 组的囊胚率最高,为６７．５％ ,与对照组的５７．７％ 比较差异显著（ Ｐ＜ ０．０１）。结果表明,受精滴中精子经过０．５ｈ 平衡后, 弱精及死精粘聚沉淀, 余下活力强的健壮精子, 此时加入牛卵母细胞受精, 可获得较高卵裂率及囊胚率     

冷冻保存对人类附睾精子功能的影响

目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后,每例冷冻标本均见活动精子,但精子活动率显著降低,精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降,头膜损伤－ 尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子） 显著升高,精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本,采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１） 冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响,造成精子功能减弱;（２） 冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选,有可能拾取到的是尾膜完整,但头膜损伤的精子;（３） 建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。     

体外受精过程中多精受精发生机制

对哺乳动物体外受精（IVF）过程中多精受精的发生原因进行了阐述，指出多精受精的发生是影响各种哺乳动物体外受精效率的重要原因，其中在猪和人的IVF中表现得尤为突出。大量研究表明，除了物种的特异性以外，不完全的卵母细胞胞质成熟、异常透明带、高精子浓度、受精培养基中不适当的添加物以及在受精过程中的其他一些异常因素都与多精受精密切相关。     

细针睾丸抽吸精子加卵胞浆内单精子显微注射的临床研究

目的 :探讨细针睾丸抽吸精子加卵胞浆内单精子显精注射(ICSI)的临床价值。方法 :本中心采用控制性超排卵方案并使用改良的显微操作系统 ,对6例(6个周期)梗阻性无精子症患者经细针睾丸抽吸精子加ICSI术治疗。结果 :其受精率、优质胚胎率和临床妊娠率分别为(60/76)、(38/60)、(4/6)。结论 :经细针睾丸抽吸精子加ICSI是治疗梗阻性无精子不育症的有效方法。     

Ionomycin诱导小鼠精子顶体反应的初步研究

目的:探讨Ionomycin诱导精子顶体反应的效果.方法:收集小鼠附睾尾精子,体外获能后用不同终浓度的Ionomycin处理相同时间,以及用相同浓度的Ionomycin处理不同时间.FITC-PNA染色观察并统计精子顶体反应率.结果:用终浓度为1、5、10、50μmol/L Ionomycin处理1 h的精子AR率分别为31.6%、52.2%、57.4%和64.0%.用终浓度为5μmol/L的Ionomycin处理10、30、45、60、120、180 min的精子AR率分别为17.2%、25.0%、41.2%、52.2%、54.0%和55.0%.结论:Ionomycin可以诱导小鼠精子的顶体反应,且顶体反应率随着浓度和诱导时间的变化而变化.     

人类体外受精助孕治疗中多原核受精的相关因素分析

收集2011年7月至2012年11月在广西生殖医学研究中心行体外受精助孕治疗的456例患者资料,将观察到多原核受精的235例作为多原核受精组,未观察到多原核受精的221例作为无多原核受精组,比较两组间基础卵泡刺激素(基础FSH)、黄体生成素(LH)水平、窦卵泡数(AFC),促性腺激素(Gn)总剂量及天数,HCG(人绒毛膜促性腺激素)日血清雌二醇(E2)水平、HCG日血清孕酮(P)水平、HCG日血清黄体生成素(LH)水平,HCG日大卵泡(≥14mm)数,获卵数,受精密度等助孕治疗相关指标的差异,分析人类体外受精中多原核受精的影响因素。结果提示,Gn用量小,HCG日血清E2水平较高,卵泡数及获卵数较多,受精率较高的周期中出现至少1个多原核受精合子的可能性比较大。     

以精子载体法制备转基因小鼠的初步研究

将外源融合基因BaLA-HI与DOSPER脂质体等比较混合,加入获能精子悬液中,37度,5％CO2共培养0．5h,以这种处理精子作为转基因载体乾鼠的体外受精及胚胎移植,在获得的40只移植后代后,经PCR特异片段扩增和Southern杂交,共检测出2只呈相性的转基因小鼠,证明人胰 基因已在小鼠染色体上实现了整合,基因整合率为5％。     

体外受精过程中多精受精发生机制

对哺乳动物体外受精(IVF)过程中多精受精的发生原因进行了阐述,指出多精受精的发生是影响各种哺乳动物体外受精效率的重要原因,其中在猪和人的IVF中表现得尤为突出.大量研究表明,除了物种的特异性以外,不完全的卵母细胞胞质成熟、异常透明带、高精子浓度、受精培养基中不适当的添加物以及在受精过程中的其他一些异常因素都与多精受精密切相关.     

体外受精过程中多精受精发生机制

对哺乳动物体外受精(IVF)过程中多精受精的发生原因进行了阐述,指出多精受精的发生是影响各种哺乳动物体外受精效率的重要原因,其中在猪和人的IVF中表现得尤为突出。大量研究表明,除了物种的特异性以外,不完全的卵母细胞胞质成熟、异常透明带、高精子浓度、受精培养基中不适当的添加物以及在受精过程中的其他一些异常因素都与多精受精密切相关。     

Ca-ALC络合物和鱼精子DNA反应的电化学与光谱研究

在pH为6．0的六次甲基四胺缓冲溶液中,Ca—ALC(茜素)络合物与鱼精子DNA在室温下2min内结合生成了非电活性的超分子化合物,导致络合物的峰电流降低和峰电位的负移,峰电流值在一定范围内与DNA的浓度成线性关系,线性范围为0．1～3μg／mL,方法可以用于DNA的测定．和其它方法相比,该方法简便,快速,有较强的选择性和实用性．在加入DNA的条件下,电化学参数(电子转移系数α,标准速率常数Ks)显示了较大的改变．同时,结合荧光法和UV光谱法,推断反应的结合方式可能为嵌入结合．     

冷冻保存对精子运动的影响

目的：观察精子运动状态,其中包括精子折断现象与冷冻损伤的关系。方法：对精液标本进行一步冷冻保存和分步冷冻保存,并用鉴别精子形态湿片法对冷冻前后精子运动状态及折断率进行评价。结果：冷冻保存复温后的精子活动率与冷冻前的精了活动率比较明显下降（P＜0．01）;含冷冻保护剂的实验组与不含冷冻保护剂的对照组比较,精子率呈显著性差异（P＜0．01）,精子折断率无显著性差异（P＞0．05）;一步冷冻和分步冷冻保存的精子之间活动率及折断率相比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论：冷冻保存易造成精子活动率下降、运动形态异常,但不能显著地导致精子折断发生率增加。     

硝酸钐对雄性小鼠的急性毒性及精子质量的影响

通过灌胃口服方式,研究了硝酸钐对雄性小鼠的半数致死量(LD50),并探讨了不同染毒剂量下存活小鼠的脏器系数、精子质量的变化.结果表明:硝酸钐对雄性小鼠的LD50为3 393.56 mg/kg,LD50的95%可信限为3 175.50～3 626.60 mg/kg;小鼠染毒后体质量增加缓慢,肾脏脏器系数明显地低于对照组(P＜0.05);2 880.00mg/kg剂量组小鼠的脾脏脏器系数与对照组相比极显著增加(P＜0.01),且小鼠精子活力明显降低(P＜0.05).提示硝酸钐对雄性小鼠的毒性较低,但染毒后部分脏器有急性损伤,而且会降低小鼠的精子质量.     

Effect of matrix metallo-proteinase-26 (MMP-26) during embryo implantation in the mouse

Matrix metalloproteinase-26 (MMP-26, endometase and matrilysin-2), a novel member of the MMPs family, is detected not only in the placenta and uterus, but is widely expressed in malignant tumors from different sources as well as in diverse tumor cell lines. However, the function of MMP-26 in the reproductive system has never been reported. Expression of MMP-26 in mouse embryos and the function of the MMP-26 antibody during mouse embryo implantation was examined for the first time by injecting the uterine horn, immunohistochemistry,in situ hybridization, co-culture of mouse blastocysts and uterine monolayer epithelial cells, Western blot, RT-PCR, Northern blot and zymography. Our results show that there is strong expression of MMP-26 mRNA and protein in the mouse embryo. Furthermore, the MMP-26 antibody dramatically inhibited mouse embryo implantation and significantly inhibited adhesion and outgrowth of mouse blastocysts onin vitro uterine monolayer epithelial cells. At the same time, the MMP-26 antibody inhibited the expression of integrin αV mRNA and protein in a dose-dependent manner. These data suggest that MMP-26 may play a role in some of the tissue-remodeling events associated with the invasion of the endometrium by trophoblast cells and facilitate successfully embryo implantation.     

Genomic organization and sequence analysis of the vomeronasal receptor V2R genes in mouse genome

Two multigene superfamilies, named V1R and V2R, encoding seven-transmembrane-domain G-protein coupled receptors (GPCRs) have been identified as pheromone receptors in mammals. Three V2R gene families have been described in mouse and rat. Here we screened the updated mouse genome se- quence database and finally retrieved 63 putative functional V2R genes including three newly identified genes which formed a new additional family. We described the genomic organization of these genes and also characterized the conservation of mouse V2R protein sequences. These genomic and se- quence information we described are useful as part of the evidence to speculate the functional domain of V2Rs and should give aid to the functionality study in the future.     

p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠T细胞增殖中的作用

目的:了解p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在ConA刺激下小鼠T细胞增殖中的作用。方法:以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)刺激下评价小鼠T细胞增殖的模型,通过流式细胞术分析p38丝裂原活化蛋白激酶的特异性抑制剂SB203580在不同剂量、不同时间对T细胞增殖的作用,并应用CellQuest和SPSS10.0 forW indows软件分析增殖细胞各代所占比例和增殖指数(PI)。结果:羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯染色分析显示,随着SB203580浓度从0.5μmol/L逐渐增至15.0μmol/L,T细胞增殖逐渐减弱,以15.0μmol/L SB203580的抑制作用最为明显,呈剂量依赖关系(r=-0.97,P<0.01);SB203580浓度增加至20.0μmol/L时,细胞大量死亡。选用SB203580最佳浓度(15.0μmol/L),随时间从24 h至72 h递增,SB203580对T细胞增殖的抑制作用逐渐增强,以72 h抑制作用最为明显,84~96 h后,抑制作用逐渐减弱。结论:p38 MAPK在ConA刺激的T细胞增殖中起着重要的作用。