Bt毒蛋白基因重组大肠杆菌的杀虫活性研究

本文对Bt毒蛋白基因(cry1Aa)重组大肠杆菌(ECE52)的发酵条件及杀虫活性进行了研究,结果表明该菌在37℃下培养或发酵8～12h较为合适.经超声波破碎的菌体对家蚕4龄幼虫有较强的毒性,用62.5×10-6g/mL的菌体稀释液处理过的桑叶饲喂4龄家蚕幼虫12h,96h内死亡率达100%.当浓度分别为125×10-6g/mL、250×10-6g/mL、500×10-6g/mL时,供试幼虫在72h,48h,24h内全部死亡.饲喂后24h,48h,72h的LC50值分别为0.101×10-3g/mL、0.045×10-3g/mL、0.028×10-3g/mL.     

白背叶黄酮化合物QB3对人肿瘤细胞增殖的抑制作用

为研究白背叶黄酮化合物QB3(芹菜素-7-O-β-D-(6″-反式-对-香豆酰基)-葡萄糖苷)对人肿瘤细胞增殖的抑制作用,采用四氮唑盐还原法(MTT)评价QB3体外对卵巢癌Skov3、Cne—2 z细胞增殖的影响。结果QB3在浓度为25、50μg/mL时对卵巢癌Skov3细胞有明显的抑制作用(P<0.05),其IC50为167.79μg/mL;QB3在浓度为50μg/mL时对Cne—2 z细胞有明显的抑制作用(P<0.05),其IC50为126.63μg/mL。说明QB3对Skov3、Cne—2 z细胞增殖有明显抑制作用。     

茶多酚诱导卵巢癌COC1细胞凋亡的研究

卵巢癌是女性生殖系统恶性肿瘤之一,而茶多酚具有抗肿瘤和抗氧化的作用,作者研究茶多酚对体外培养的卵巢癌COC1细胞凋亡的影响.采用不同浓度茶多酚处理卵巢癌COC1细胞,24h后分别采用AO/PI双染法和琼脂糖凝胶电泳法(DNA Ladder),观察和分析茶多酚对COC1细胞凋亡的影响.结果显示,低浓度茶多酚(≤500μg/mL)处理24h后,出现早起凋亡现象;而高浓度的茶多酚(2 000μg/mL)后,出现了明显的晚期凋亡现象;过高浓度(4 000μg/mL)处理,细胞出现死亡现象.不同浓度的茶多酚处理后,细胞均可检测到DNA Ladder,且随着茶多酚浓度的增加,DNA裂解程度加深,电泳中DNA Ladder更明显.实验结果表明,不同浓度茶多酚处理均可以诱导卵巢癌细胞株COC1产生细胞凋亡,研究结果为筛选新型的抗癌药物提供参考.     

琐琐葡萄多糖对PC12细胞损伤的神经保护作用

 体外培养PC12细胞,采用20μmol/L β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)作用24h诱导细胞损伤,建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,研究琐琐葡萄多糖(VTP)对PC12细胞损伤的神经保护作用。设立对照组、模型组和VTP保护组(20,40,80μg/mL),CCK-8法检测各组细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜通透性及完整性,化学比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,20,40,80μg/mL VTP可提高PC12细胞存活率,减少LDH渗漏,增加SOD活力,减少MDA含量,降低细胞凋亡率,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。由此推论,VTP对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡和氧化损伤具有明显的保护作用。     

重楼皂苷Ⅶ抑制PC3细胞的增殖和周期阻滞的研究

探讨重楼皂苷VII (PolyphyllinVII, PP7)对人前列腺癌PC3细胞增殖和周期的影响及其机制.采用Cell Counting Kit-8(CCk-8)方法观察PP7对PC3细胞增殖的影响.流式细胞术研究PP7对PC3细胞周期的作用.培养 PC3细胞并给予0.33和 0.5 μg/mL的PP7. 经过24 h后,采用Western blot法检测周期相关蛋白Cy-clin D1和p21的表达变化.结果表明,PP7可明显抑制 PC3 细胞增殖,并呈明显的浓度依赖性,其IC 50 值为(0.67±0.02) μg/mL;PP7可上调PC3细胞p21的表达,下调Cyclin D1的表达. PP7将PC3细胞周期阻滞于G1期是通过上调p21,抑制Cyclin D1周期调控蛋白的表达实现的.     

脑疏宁对缺血性脑卒中神经再生作用的研究

中药脑疏宁是基于中风本虚标实、气血亏虚、痰瘀闭阻的病因确立的活血、利水、通腑、调气的临床经验方,已有研究表明其在大鼠MCAO模型和TBI模型中具有改善脑损伤的作用,但在体外细胞实验上鲜有研究。应用体外分离培养大鼠神经干细胞,探讨脑疏宁对神经干细胞增殖的影响及其相关作用机制。本文采用WST-1法测定经不同浓度(21.4 mg/mL、2.14 mg/mL、214μg/mL、21.4μg/mL、2.14μg/mL、0)脑疏宁分别处理神经干细胞24 h和48 h后,其对细胞增殖的影响;利用U0126建立MAPK/ERK信号通路阻断模型,WST-1法检测脑疏宁对该阻断模型的作用; Western blot法检测脑疏宁处理后细胞中p-ERK1/2蛋白的表达情况。结果表明,与对照组相比,一定浓度范围内的脑疏宁可以显著促进神经干细胞的增殖(P0.05),与浓度呈依赖关系,但高浓度脑疏宁抑制干细胞增殖并使细胞死亡。WST-1结果显示,脑疏宁可以使MAPK/ERK信号通路阻断模型组的干细胞增殖,但其增殖结果不显著。Western blot结果显示,脑疏宁能显著上调MAPK/ERK信号通路中p-ERK1/2的表达,促进ERK1/2磷酸化。适宜浓度的中药脑疏宁可以促进体外培养的神经干细胞增殖,其机制可能与促进MAPK/ERK信号通路中ERK1/2的磷酸化有关。     

DPPH·法评价葡萄籽提取物淬灭自由基的方法研究

通过DPPH·法测定葡萄籽梯度提取各组分清除自由基能力的研究,结果表明,最佳活性测定样品浓度范围1.0-10μg/mL、放置时间30min、温度25℃,运用此法测得的清除率在25-80%之间,具有较高的灵敏度和准确度。样品浓度0.25-10μg/mL与活性呈正相关关系,其中从1.0-5.0μg/mL范围内有良好的线性关系。当样品用量低于25μg/mL时,样品自身的贡献微不足道,清除率按公式:IP(%)=[(Ac-Ai)/Ac]×100计算。浓度大于25μg/mL时,其结果计算必须扣除样品背景影响IP(%)=[1-(Ai-Aj)/Ac]×100%,否则可能得出样品无抗氧化性或有助氧化作用的错误结论。     

莪术醇对HNE1鼻咽癌细胞荷瘤鼠的抑瘤作用

目的考察研究莪术醇对HNE1鼻咽癌细胞荷瘤鼠的抑瘤作用。方法体外通过细胞划痕试验,考查莪术醇不同浓度(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL)对HNE1鼻咽癌细胞迁移能力的影响,计算细胞迁移率(细胞迁移率(%)=(0 h划痕距离-12 h//24 h/48 h划痕距离)/0 h划痕距离×100%);体内采用HNE1鼻咽癌细胞接种裸鼠待长出实体瘤,将实体瘤移植裸鼠皮下建立HNE1鼻咽癌荷瘤鼠模型,用莪术醇分别给实验组裸鼠灌胃0.79 mg/10 g,对照组给灭菌蒸馏水,阳性组给予去氧氟尿苷,每日1次,连续30 d。每周测量体质量和肿瘤大小2次,第30天给药后处死小鼠,解剖称肿瘤质量,体积计算公式V=a×b×c×π/6,计算抑瘤率,评价莪术醇对HNE1鼻咽癌荷瘤鼠的抑制作用。结果与对照组比较,体外试验证明莪术醇100μg/mL对HNE1鼻咽癌细胞迁移性有统计学意义(P0.05),体内试验证明莪术醇组对HNE1鼻咽癌细胞荷瘤鼠肿瘤的抑制作用明显,抑瘤率为34.04%,肿瘤质量与对照组比较有统计学意义(P0.05),与对照组和去氧氟尿苷组比较,肝脏和脾脏系数均有统计学意义(P0.05),且与去氧氟尿苷组比较,肝脏系数有统计学意义(P0.05)。结论通过实验得出莪术醇能降低HNE1鼻咽癌细胞迁移能力并对荷瘤鼠肿瘤具有抑制作用,为莪术醇对肿瘤的抑制作用研究提供了实验基础。     

翘鳞肉齿菌多糖的分离纯化及抗氧化活性的研究

为了分离纯化翘鳞肉齿菌多糖,解析其结构特征,并研究其抗氧化活性.运用DEAE-cellulose column进行柱层析分离纯化翘鳞肉齿菌多糖,高效凝胶渗透色谱(HPGPC)方法研究其均重分子量,通过红外光谱解析其结构特征,进一步研究其对羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH-)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+)的清除作用,同时研究了翘鳞肉齿菌多糖在H2O2作用下对PC12细胞的保护能力.其结果显示从四川省小金县翘鳞肉齿菌子实体分离纯化得到一种水溶性杂多糖(SIKP-1)纯品,其重均分量约为2.0×104 Da.通过化学方法研究了不同质量浓度的翘鳞肉齿菌多糖(SIKP-1)抗氧化活性,结果表明:当SIKP-1质量浓度为0.1mg/mL时,其对DPPH-自由基的清除率可达到40.63%;当SIKP-1质量浓度达到0.32mg/mL时,对·OH自由基的清除率可达到51.61%;当SIKP-1的质量浓度为3mg/mL时,对ABTS+自由基的清除率可达69.75%;在细胞生物学实验中,结果显示在用终质量浓度为0.5,1,2 mg/mL的SIKP-1处理下,PC12能免于H2O2的损伤,随着剂量的增加其存活率越高,分别为15.89%,27.60%,29.36%.综上试验结果显示,翘鳞肉齿菌多糖(SIKP-1)具有显著的抗氧化功能,因此可以作为一种理想的抗氧化剂资源.     

ERK通路对TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

为研究不同浓度TGF-β1、不同作用时间对体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响,并在此基础上探讨ERK信号转导通路在TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用.取大鼠胸主动脉,用贴块法进行原代培养,取3～5代细胞.分别施加不同浓度TGF-β1(0、0.01、0.1、1、10ng/mL)作用24h和10ng/mL TGF-β1作用不同的时间(0、8、12、16、20、24h),用MTT法测定各组细胞吸光值,确定TGF-β1作用浓度和时间.再取生长正常的细胞,分四组:对照组,TGF-β1组,ERK阻断剂组和 TGF-β1 ERK阻断剂组.继续培养24h后,用MTT法测细胞的增殖活性.TGF-β1浓度≥1 ng/mL作用24h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05),10ng/mL TGF-β1作用时间≥12h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05),10ng/mL TCF-β1作用时间≥12h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05);与对照组相比,其他三组吸光值均明显降低(P＜0.05),ERK阻断剂组吸光值低于TGF-β1组(P＜0.0 5).TGF-β1呈浓度依赖和时间依赖方式抑制体外培养的血管平滑肌细胞的增殖,ERK信号转导通路可能不参与TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用.     

ELT in 2015 in China

本文推测了中国未来英语教学的状况。文章简要介绍了中国目前使用的英语教学法;在未来的十年中,英语的教和学可能产生的变化;探讨了学生可能产生的变化及他们学习英语原因的变化;英语语言及网络的发展可能对中国的英语教育产生的影响;以及英语教师们如何看待未来他们的工作。     

k-因子的哈密顿性质

借助Bauer定理给出了一个猜想的简短证明：如果图G含有k-因子且是2-连通的,并满足σ２（Ｇ）≥ｎ－ｋ,那么图G是哈密顿的.     

论战后日本体育课程目标的发展变化

通过文献资料法,对战后日本历次颁布的体育教学大纲进行研究,对大纲中的课程目标进行历史分期,归纳起来,战后日本现代体育课程目标大致可划分为六个时期:(1)强调生活目标时期(1945—1957年);(2)强调基础运动能力与技能时期(1958—1967年);(3)学校体育的发展体力时期(1968—1977年);(4)终身体育与快乐体育时期(1978—1988年);(5)自我教育时期(1989—1997年);(6)多元化体育课程目标时期(1998—今)。研究对各段时期课程目标的侧重点进行深入分析。     

论中国学校人文精神教育的现实意义

教育是培养人的活动.社会发展最终是以人的发展为尺度的,而人的精神生活,是人的发展的重要标志,更是当代中国教育改革的重要内容.受传统教育思想的影响,中国教育存在的主要问题在于对人的精神世界的漠视和冷淡.构建未来中国的和谐社会之根本在于教育,尤其是人文精神教育.     

浅谈中国旅游立法活动中存在的问题

本文结合中国旅游立法的现状,分析旅游立法活动中存在的问题,旨在重视旅游立法,进一步加强和完善旅游立法工作.     

罗非鱼海水养殖试验

本文报导了罗非鱼海水养殖鱼种运输、海水放养驯化等技术措施。     

我国湿地研究的现状与发展趋势

概括了近年来我国湿地的研究进展，包括湿地的定义、湿地的分类，并探讨了近年来湿地功能和效益、湿地开发利用、湿地保护以及湿地恢复和重建等四方面研究工作进展，并提出了今后湿地研究的发展方向。     

论中国历史上的"国中之国"--兼驳"台独"、"疆独"、"藏独"谬论

“国中之国”问题是关乎国家安全利益和中华民族凝聚力的一个大问题。笔通过对中国历史上曾经存在过、当今中国仍存在着的冠有“国”字称谓之政权组织的分析研究。得出迄今为止，中国历史上所有的“国中之国”都不是现代国际法语汇中的“独立国”，更不是相对中国而言的所谓“外国”。它们或为中国改朝换代时遗留的“残存国”，或为统一多民族中国缔造时期的“并立国”，或为中国巩固时期的“藩属国”，全部都是完整中国的组成部分的结论。有力批驳了“台独”、“疆独”和“藏独”谬论，阐明了台湾、新疆和西藏自古就是完整中国的组成部分的正确结论。