一年蓬提取物的抗菌活性

为了研制安全、高效、经济的植物源杀菌剂,以入侵植物一年蓬(Erigeron annuus)为原料,2种植物病原真菌——黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium)和番茄早疫病菌(Alternaria solani)的抑制率为指标,通过单因素及响应面实验,优化得到一年蓬抑菌活性成分的最佳提取工艺:提取时间6 min、料液质量浓度1∶60 g/mL、提取温度60℃;所得提取物依次经石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取得各萃取相,其中乙酸乙酯相对2种病原菌抑制率均最高;乙酸乙酯对黄瓜枯萎病菌及番茄早疫病菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.75,1.50 mg/mL,对2种病原菌的最小杀菌浓度(MBC)皆为36 mg/mL;经离体叶片实验,乙酸乙酯对黄瓜枯萎病和番茄早疫病均具有一定的预防和治疗效果.表明一年蓬提取物的乙酸乙酯相具有开发成植物源杀菌剂的潜力.     

10种蔬菜内生细菌的分离筛选

以抑制植物主要病害病原菌和内生防病相关酶活性为评价标准,从蔬菜作物体内分离筛选植物内生细菌资源。从苦瓜、丝瓜、空心菜、大豆等10种蔬菜体内分离到101株细菌,发现内生细菌在不同种类的蔬菜中出现的频率不同,其中丝瓜叶上的内生细菌数量最多,洋葱体内分离到的内生细菌数量最少。运用平板对峙法从中筛选出了对黄瓜枯萎病菌、番茄青枯病菌、水稻细条病菌、荔枝霜疫霉病菌等有较强拮抗作用的菌株,获得对以上4种病菌均有拮抗作用的内生细菌有41株,占总株数的40．6％。对101株细菌进行纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶活性测定表明,同时具有3种酶活性的菌株有32株,占总菌数的31．7％。从中选出13株拮抗效果较好的内生细菌。经初步鉴定均属于芽孢杆菌属（Bacillus sp）。进一步对筛选获得的同时对以上4种病原菌均有拮抗作用,且具有纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶活性的13号、14号、59号和82号菌株进行16SrDNA序列分析,表明4个菌株均为枯草芽孢杆菌（B．subtilis）或其近缘种。     

斑蝥素对植物病原菌抑制作用的研究

研究了斑蝥素对植物病原菌的抑菌活性，结果表明：500mg/L的斑蝥素溶液对所测的9种植物病原细菌均无抑制作用，对所测的8种植物病原真菌中的水稻纹枯病菌、棉花立枯病菌、蚕豆菌核病菌、油莱菌核病菌、苹果炭疽病菌、棉花枯萎病菌等6种有明显的抑制作用。其中，500mg/L的斑蝥素对水稻纹枯病菌、棉花立枯病菌、苹果炭疽病菌的生长抑制作用较强。以不同的斑蝥素提取物浓度处理水稻纹枯病菌，实验结果表明：斑蝥素抑制水稻纹枯病菌生长的战EC90=4．80mg/L，EC50=1．84mg/L，且10mg/L的斑蝥素对水稻纹枯病菌菌核萌发的抑制率为100％。     

筛选假单胞菌株M18防治大棚黄瓜枯萎病害

设计了一种新的高效筛选程序,从植物根际土壤中分离出一株具有ＡＣＣ脱氨酶活性的促生拮抗双功能假单胞菌株Ｍ１８．在培养皿中,Ｍ１８能有效地抑制黄瓜枯萎病菌以及多种其他枯萎病原菌和植物病原菌的生长．Ｍ１８活菌浸种处理春黄瓜种子以及在大棚定植后根际土壤浇灌的试验中,与对照组相比,黄瓜枯萎病的株发病率降低７０％～８０％,霜霉病的发病率和病情指数都同时平均下降７０％左右,黄瓜产量提高２０％以上,每公顷可增加产值０．９万元以上,Ｍ１８的生物防治效果达到极显著程度．     

微生物絮凝剂产生菌HF28的筛选与培养条件优化

从污水处理厂的活性污泥中筛选出微生物絮凝剂HF-8,并对菌株的培养基组成和培养条件进行了优化;培养基最佳配方（g／500mL）：蔗糖10g、（NH4）2SO4 0．2g、KH2PO4 2g、K2HPO4 2．5g、NaCl 0．05g、Mg（SO4）·7H2O 0．1g、水500mL;最佳培养条件：温度30℃、初始pH值6．O、摇床转速120r／min,优化之后的絮凝剂对高龄土悬浊液的絮凝率提高到了90．3％。     

天然物质复配铁型絮凝剂及其处理味精废水的研究

采用不同天然物质（城市草炭土、草甸土、火山灰和红壤）与聚合硫酸铁复配，制备一种更为经济的新型絮凝剂，利用其对高浓度有机味精废水进行絮凝实验，并讨论了各组分的不同投加量比例及其絮凝的影响因素．研究结果表明：此种天然物质．聚合硫酸铁复配絮凝剂处理味精废水表现出优良的絮凝性能．其中以草甸土、红壤为天然复配材料处理效果最为显著，其最佳投加量比例为草甸土（g）：聚合硫酸铁（ml）：助剂（g）=11：4：6，最佳pH为7．0-8．0；红壤（g）：聚合硫酸铁（ml）=10：6，最佳pH为1．0-2．0．在此条件下，该天然复配铁型絮凝剂对味精废水的CODcr，去除率远远高于聚合硫酸铁（PFS）本身，分别可达到71．1％和55．0％。     

西芹根物质丙酮浸提液二次层析物对黄瓜枯萎病菌的化感作用

利用柱层析法及生长速率法研究了西芹根物质丙酮浸提液二次层析物对黄瓜枯萎病菌的化感作用.将西芹鲜根丙酮浸提液经一次层析后得到的最佳抑制流分进行二次分离,并对所得流分分别进行化感作用实验,得出流分1、2、4、5、6、7、9对黄瓜枯萎病菌的生长具有化感抑制作用,其中流分1和流分2的抑制效果最强,抑制率分别为79.31%和79.13%,与ck差异极显著(P<0.01);流分3、8、10对黄瓜枯萎病菌的生长具有化感促进作用.而将西芹根际土壤丙酮浸提液进行同样处理后,得出流分1、2、3、4、6、7、9、10对黄瓜枯萎病菌的生长具有化感抑制作用,其中流分1和流分3的抑制效果最强,抑制率分别为80.44%和81.28%,与对照ck差异极显著(P<0.01);流分5和流分8对黄瓜枯萎病菌的生长具有化感促进作用.随着时间的增加这种化感抑制或促进作用逐渐减弱.     

HPLC法测定复方双花气雾剂中麻黄碱的含量

为建立一种用高效液相色谱法测定复方双花气雾剂中麻黄碱含量的方法，用C18－ODS为固定相，甲醇－水－三乙胺（20：80：0．1，用磷酸调pH值3．5－4．5）为流动相，检测波长为527nm。结果表明，在进样量2．04－10．20μg范围内，该方法线性关系良好（r=0.9992)，平均回收率为98．9％，RSD为3．61％（n=5)。表明该方法简便、准确、重复性好，可作为该制剂含量的测定方法。     

7种植物提取物对几种病菌生物活性的初步研究

以7种植物丙酮提取物为材料，测定了其对几种病菌的生物活性．结果表明：在供试质量浓度为0．1g/mL时，马尾松粗提物对杨树溃疡病菌和番茄早疫病菌的菌丝生长抑制率均在60％以上，对其它3种病菌的抑制率均在50％左右．马尾松作为植物源杀菌剂值得进一步研究．     

雷斯青霉转化左旋乙基甾烯双酮15α-羟基化反应工艺研究

对雷斯青霉（Penicillium raistrickii）微生物转化左旋乙基甾烯双酮15α-羟基化反应的培养基组成和转化条件进行优化．结果表明：优化后最佳培养基组分为葡萄糖30g／L,玉米浆20g／L,NaNO3 2g／L,KH2PI4 1g／L,K2HPO4 2g／L,MgSO4 0．5g／L,FeSO4 0．02g／L,KCl 0．5g／L;最适转化条件为接种量10％,初始pH7．5,摇瓶装量50mL,转化温度28℃,投料量0．2％,投料时间30h,转化时间60h,底物添加方式为底物超声粉碎后加4％V醇和1．5％吐温80溶解．在此条件下。摇瓶转化率可达70％以上。     

苦参蛇床子等六种药用植物的抑菌研究

采用试管药基方法,进行了苦参、蛇床子、黄连、青蒿、白头翁、大蒜等６ 种药用植物水提液对大肠杆菌、产黄青霉等６ 种微生物的抑菌试验和最低抑菌浓度的测定,发现这６ 种药用植物水提液对Ｇ＋ 和Ｇ－ 细菌以及真菌均有抑制能力。除了青蒿外,其它５ 种植物均具有广谱高效的抑菌作用。     

内生细菌YBS106菌株发酵条件优化

对一把伞南星内生细菌YBS106发酵条件进行研究,确定其最佳发酵液培养基配方和最佳发酵条件。通过杯碟法测定YBS106发酵液对棉花枯萎病原菌的抑菌作用,研究了该菌株在不同培养基,不同生长条件下的代谢产物活性。菌株YBS106的最佳生长条件为:pH7.0,28℃,发酵72 h,接种量4%,揺床转速为200 r/min。在最佳培养条件下,该菌株对棉花枯萎病菌的抑菌率可达56%。     

内生细菌YBS106对棉花的诱导抗性研究

本实验以从一把伞南星(Arisaema erubescens(Wall.)Schott)组织分离到的内生细菌YBS106对三叶一心棉苗进行灌根诱导,同时挑战接种棉花枯萎病菌或棉花黄萎病菌,测定YBS106诱导对棉叶中抗性相关酶POD和PPO活性及与抗性相关的MDA和VC含量的影响,同时测定YBS106对棉花枯、黄萎病的相对防效。结果表明,YBS106诱导对POD和PPO活性及MDA和Vc含量均有显著影响。YBS106能有效诱棉叶中POD和PPO等防御酶活及Vc含量增加和MDA含量的减少,MDA和Vc含量在诱导后第5天达到最高,POD和PPO活性在诱导后第10天达到最高。病原菌挑战接种100 d时,YBS106对棉花枯萎病菌和黄萎病菌的相对防效分别为64.24%和71.37%,这与棉花系统抗性相关的防御酶活及相关物质(MDA和Vc)含量的变化趋势吻合。该结果表明YBS106诱导棉花产生了对棉花枯萎病菌和棉花黄萎病菌的系统抗性。     

香蕉内生真菌、放线菌类群分析

采用内生菌分离法对华南种植的健康香蕉根、叶内生真菌、内生放线菌进行分离研究表明：叶内部的内生真菌主要为盘长孢刺盘孢菌物Colletotrichum gloeosporioides占60.77％；而根内部曲霉Aspergillus spp. ，青霉Penicillium spp.，拟青霉Pacecilomyces spp.的分离频率较高，共占70．4％。在根、叶内生放线菌中灰红紫类群链霉菌分离频率最高，分别占65.2％与78．2％；在整个植株中玫瑰浅灰链霉菌Streptomyces roseogriseolus的分离频率最高(占57．7％)，叶中该种链霉菌占69.0％，根中占43．5％。对峙实验表明：内生真菌在体外对香蕉枯萎病的病原菌(尖孢镰刀菌香蕉专化型)不显示明显的拮抗作用而内生放线菌则显示明显的拮抗活性，玫瑰浅灰链霉菌中有42．5％的菌株显示拮抗作用，该种链霉菌在提高香蕉植株对香蕉枯萎病的抗性中的作用值得重视。     

黄芩提取物对脓肿分枝杆菌生长及生物膜形成的影响

为了研究黄芩提取物对脓肿分枝杆菌浮游细菌及生物膜的影响，本研究以脓肿分枝杆菌标准菌株ATCC 19977以及临床分离株作为受试菌，采用Alarmar-Blue液体药敏法测定黄芩提取物对脓肿分枝杆菌的最小抑菌浓度（MIC），平板涂布法测定最小杀菌浓度（MBC），结晶紫染色法和扫描电子显微镜分析黄芩提取物对脓肿分枝杆菌生物膜形成量及形态结构的影响，进一步采用了RT-qPCR探究黄芩提取物对分枝菌酸合成相关基因表达的影响.结果表明黄芩提取物对脓肿分枝杆菌标准菌株ATCC 19977以及8株临床分离株的MIC90为50~100 mg/mL，MBC为50~200 mg/mL；黄芩提取物可显著降低脓肿分枝杆菌生物膜形成量（P<0.05），破坏生物膜的结构，并且显著降低分枝菌酸合成相关基因表达量（P<0.01）.本研究表明黄芩提取物能够抑制脓肿分枝杆菌的生长以及生物膜的形成.     

香石竹扦插苗茎腐真菌病研究

从香石竹扦插茎腐苗上分离纯化了35株镰刀菌，优势菌为：串珠镰孢（F．moniliform Sheldon）11株，串珠镰孢中间变种（F．moniliforme var．intermedium Neish＆leggestt）9株，尖孢镰孢（Fusarium oxysporum Schlecht）8株，其次还有茄病镰孢蓝色变种（Fusarium solanivat．coeculeum（Sacc．）Booth）等7株，共6个种和变种；选用12株菌检测其致病性，其中11株菌的致病率高达88～100％；农药药效实验表明。大生的效果最好，0．1g／L即能完全抑制5株试验菌的生长；其次为甲霜灵-锰锌；根病必治的效果最差。     

贵州省药用植物在ICD-10中的应用

报道了贵州省药用植物4258种,根据世界卫生组织1993年创建的ICD-10(《国际疾病分类系统》第十次修订本)国际疾病分类系统,对贵州省的药用植物进行了与国际疾病分类接轨的分类应用。并对药用植物涉及到的21类、932条疾病进行了统计分析,结果表明:对R00～R99症状、体征和临床与实验室异常所见,不可归类在他处者有疗效的药用植物占总数的13.63%、A00～B99某些传染病和寄生虫病占12.34%和K00～K93消化系统疾病占11.59%。贵州省药用植物中,涉及最多的疾病是S00-T14跌打损伤、A03.901痢疾、M79.094风湿性肌痛症,计有1156种、828种和784种植物与此相关。     

内生真菌JSM 10的分离及鉴定

以蛇足石杉为材料,经过严格的表面消毒,分离纯化得到1株内生真菌JSM 10.对JSM 10进行培养特征、显微形态观察和基于ITS序列的系统发育分析.结果表明：菌株JSM 10和Fusarium属的 Fusarium oxysporum菌株系统发育关系最为密切,聚在同一个小枝上,相似程度为99%.因此,从系统发育分析来看,JSM 10应为Fusarium oxysporum菌株.     

解淀粉芽孢杆菌Q426可湿性粉剂的研制

通过对载体、润湿剂、分散剂、紫外保护剂的筛选,确定了解淀粉芽孢杆菌Q426可湿性粉剂的最佳配方。最终所得制剂中载体D10％、润湿剂6％、分散剂6％、紫外保护剂0．5％。测得制剂的芽孢数量为2．82×10”efu·g-1,润湿时间为43s,悬浮率为76％,指标均达到国家标准及预期目标。     

干酪乳杆菌IMAU10041抗甜瓜枯萎病菌的作用及理化性质

从60株乳酸菌中筛选出22株具有抗甜瓜枯萎病菌活性的乳酸菌菌株,其中9株具有较强抗甜瓜枯萎病菌活性.对这9株乳酸菌的抗植物致病真菌谱进行研究发现,9株菌对番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜疫霉菌(Phytophthora drechsleri Tucker)、苹果炭疽病菌(Glomerella cingulate)、灰葡萄孢霉菌(Botrytis cinerea)的生长均有抑制作用.其中干酪乳杆菌IMAU10041对甜瓜枯萎病菌具有较强的抑制作用,并且对甜瓜疫霉和番茄早疫病菌有较高的抑菌活性.分别经过调节pH、加热、蛋白酶处理干酪乳杆菌IMAU10041的发酵滤液后,发现干酪乳杆菌IMAU10041发酵液具有一定的热稳定性;在pH 4.0时具有最大抑菌活性,在碱性条件下抑菌活性迅速失活;发酵液经胰蛋白酶、中性蛋白、蛋白酶K处理后失去部分抑菌活性,这表明干酪乳杆菌IMAU10041发酵液中可能含有一定的蛋白类抑菌物质.