酱曲源毛霉的分离及其产蛋白酶条件的优化

利用稀释平板法从曲样和窖泥单菌落中分离得到2株毛霉1#和2#,在优化的发酵培养基和发酵条件下产蛋白酶活力分别达到:1#菌6 565 U/g,2#菌9 146 U/g.对两株菌进行紫外诱变,获得的诱变U1#菌、U2#菌分别比出发1#菌、2#菌产蛋白酶活力提高了48.58%和54.45%.     

高产胞外蛋白酶毛霉的筛选及酶学性质研究

通过平板初筛和发酵复筛从保藏的16种毛霉菌株中筛选出了四株高产胞外蛋白酶毛霉菌株,分别为3.4906、3.4909、3.4943和3.5009。筛选过程中发现平板筛选法用于毛霉筛选不易观察,需改进方法,发酵法仍是最直接有效筛选的方法。对四株毛霉所产蛋白酶酶学特性研究发现,在温度耐受性方面,3.4943和3.4906的蛋白酶耐温性强;在反应温度方面,3.4906和3.5009的最适反应温度较低,3.4943和3.4909的最适反应温度较高;在反应p H方面,4种毛霉所产蛋白酶的最适p H在6.0~8.0范围;在受Na Cl浓度影响方面,3.4943的酶活力受Nacl浓度影响较大,3.4909的酶活力受Na Cl浓度影响最小。各菌株的酶学特性存在差异,根据发酵食品的工艺特性选择适宜的菌株。     

雅致放射毛霉AS3.2778碱性蛋白酶的制备及应用

毛酶蛋白酶对大豆蛋白具有较高的水解效率以及对蛋白水解物良好的脱苦效果,因此在大豆多肽的制备方面显示出很好的应用前景。为了开发这一蛋白酶系,采用离子交换,疏水层析及凝胶层析对其进行了分离纯化,从雅致放射毛霉As3.2778的发酵麸曲中分离纯化出一种蛋白酶,其纯度提高了22.7倍,酶活回收16.1%,最终比酶活可达到6094u/mg。电泳分析发现,该蛋白酶在还原及非还原条件下均显示出单一条带,表明该酶已达到电泳纯,并且是一单体蛋白,其分子量大约在32KDa。酶谱分析表明,纯化的蛋白酶仅为原发酵麸曲中三种蛋白酶组分中的一种。以大豆蛋白为底物,探讨了纯化后的蛋白酶对大豆蛋白的水解效果。结果显示,该蛋白酶在55℃,pH8.0～10.0的条件下对大豆蛋白显示出较强的水解能力。对比实验发现,纯化的毛酶蛋白酶对大豆蛋白的水解效果优于Papain、Alcalase及Protamex,表明该蛋白酶具有更为广泛的肽键选择性,对大豆蛋白亲和力更强,在大豆蛋白肽链上存在相对较多的酶切位点。     

雅致放射毛霉AS3.2778碱性蛋白酶的纯化及水解特性

毛霉蛋白酶可以高效地水解大豆蛋白,而且对蛋白水解物具有良好的脱苦效果.为了开发这一蛋白酶系,采用离子交换、疏水层析及凝胶层析等方法,从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中分离纯化出一蛋白酶组分,并对其水解特性进行了探讨.结果显示：纯化后的蛋白酶是一单体蛋白,其相对分子质量大约为32000;该蛋白酶在55℃、pH8.0-10.0的条件下对大豆蛋白显示出较强的水解能力,其水解效果明显优于商品化的蛋白酶（如木瓜蛋白酶、Alcalase及Protamex）,表明该蛋白酶比以上几种商品化蛋白酶具有更广泛的肽键选择性,对大豆蛋白亲和力更强,在大豆蛋白肽链上有相对较多的酶切位点.     

雅致放射毛霉蛋白酶SP1基因的克隆及序列分析

雅致放射毛霉蛋白酶具有较好的脱苦味和水解豆类蛋白的能力.为了揭示其结构和功能的关系,促进其开发应用,文中通过RACE和PCR技术克隆获得丝氨酸蛋白酶SP1基因.根据生物信息学中的理论和方法,对SP1进行了较全面的预测和分析.结果表明:SP1基因由4个外显子和3个内含子组成,编码454个氨基酸残基.SP1属于蛋白酶K家族,与Rhizopus microsporus var.chinensis的丝氨酸蛋白酶同源性最高,亲缘关系最近.以蛋白酶K晶体结构(PDB code:1IC6)作为模板进行同源建模,通过对模拟结构的分析可知:SP1分子内无二硫键,具有1个Ca2+结合位点;SP1与蛋白酶K在底物结合区域、氢键、盐键和二硫键等方面均存在差异,这些差异可能就是SP1具有独特的水解作用和脱苦能力的原因.     

天然有机物对碱性蛋白酶活力的影响

探讨了两种不同天然有机物对2709碱性蛋白酶活力的影响,采用福林法测定了该蛋白酶的最适作用条件.分别考察了不同浓度的天然有机物T、天然有机物S及这两种有机物的共同作用对2709碱性蛋白酶活力的影响.结果表明:T、S及T和S的协同作用对酶活均有不同程度的激活,其中提高酶活最显著的是天然有机物T和S共同作用于蛋白酶的混合体系.     

产低温蛋白酶海洋细菌的筛选及发酵条件

采用平板初筛和摇瓶复筛等方法,从渤海秦皇岛海域的海水样品中筛选到产低温蛋白酶活力较高的菌株HYM-16,初步鉴定为黄色杆菌属,设计单因素和正交试验,确定该菌的最佳发酵条件。结果表明,在装液量50 mL液体培养基的250 mL三角瓶中,以体积分数0.01的接种量、摇床转速180 r/min条件下,25℃培养48 h酶活最...     

培养条件对康宁木霉产酶的影响

通过对康宁木霉纤维素酶（C1酶和Cx酶）、酸性蛋白酶活力的比较,筛选出了康宁木霉产酶的最适培养条件.康宁木霉在m（麸皮）∶m（秸秆）=2∶8,氮源为w=1%的NH4NO3,含水量为65%,起始pH值为6.5的条件下培养72h,C1酶活力最高,为191.3U/g;在m（麸皮）∶m（秸秆）=6∶4,氮源为w=1%的（NH4）2SO4,含水量为65%,起始pH值为7.5的条件下培养48h,Cx酶活力最高,为2006.5U/g;在m（麸皮）∶m（秸秆）=8∶2,氮源为w=1%的（NH4）2CO3,含水量为65%,起始pH值为4.5的条件下培养96h,酸性蛋白酶活力最高,为1859.6U/g.     

温度和氮源对耐冷蜡状芽孢杆菌产冷适蛋白酶的影响

对影响耐冷蜡状芽孢杆菌SYP-A2-3合成冷适蛋白酶的主要因素进行了研究，主要包括培养温度对产酶水平和产酶周期的的影响、不同相对分子质量分布的酪蛋白水解物对菌体细胞诱导产酶的差异以及菌体芽孢形成过程与产酶过程的关系等．结果表明通过采取前高后低的变温培养策略可以使菌体在发酵初期快速增殖，从而提高冷适蛋白酶的产量，粗料氮源预水解可增加相对分子质量较低的氮源水平，能提高前期的菌体产量．研究认为，在产酶期间应保持低分子量氮源的低速释放，使诱导作用得到持续加强并减缓代谢阻遏作用，避免芽孢的快速形成，实现产酶期的延长．     

组培条件对何首乌愈伤组织诱导及生长的影响

为了寻找适合何首乌愈伤组织诱导与生长的培养条件，本文考察了愈伤组织形成的比率，分析了取样时间、光照条件、培养基中2，4-D、6BA和IBA的浓度对愈伤组织诱导和生长的影响。实验表明，在黑暗中，在添加有1．5mg/L2，4-D，1mg/L 6BA和0．5mg/L BA的MS培养基上，夏季取样的茎段，愈伤组织诱导率可达100％。     

微小毛霉凝乳酶摇瓶发酵的基本条件初探

对利用微小毛霉摇瓶发酵合成凝乳酶的基本条件进行了初步研究，在质量分数为２％的麸皮水解液中，起始ｐＨ６．０，装液量３０ｍｌ／２５０ｍｌ三角瓶，３５℃，振荡速度１２０ｒ／ｍｉｎ条件下摇瓶发酵７２ｈ可达产酶高峰。可得凝乳酶５０００ｕ／ｇ麸皮。同时对微生物凝乳酶的工业生产可能性作了简要分析。     

小麦巯基蛋白酶抑制剂的纯化和性质研究

将小麦麦胚和麸皮的浸取液，经加热和利用ｐＨ沉淀，获得疏基蛋白酶抑制剂粗品；再经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００分子筛层析，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＨＰＬＣ柱上得到均为单一蛋白带的小麦ＣＰＩ纯品。其纯化度为原料浸液的４２倍。由ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得ＣＰＩ分子为单一肽链     

温度对方形臂尾轮虫(Brachionus quadridentatus)种群增长与生活史参数的影响

研究了在实验室条件下温度对方形臂尾轮虫种群增长和生活史参数的影响.实验用轮虫来自武汉东湖,分别在20,25和30℃3个温度条件下进行单克隆培养.结果表明:随着温度的升高,轮虫的平均寿命和不同阶段的发育历时逐渐缩短.在30℃时轮虫种群的内禀增长率和净生殖率达到最大值,平均世代时间最短.因此,本文推测方形臂尾轮虫的最适生长温度为30℃.     

不同培养条件对龙胆毛状根生长及龙胆苦甙含量的影响

不同基本培养基、ｐＨ及碳源对龙胆毛状根的生长和龙胆苦甙的含量都有影响，毛状根在五种培养基中，以ＭＳ培养基的生长速率及龙胆苦甙的含量最高。毛状根的最适生长ｐＨ是６．０；龙胆甘甙含量高峰则在ｐＨ５．５．蔗糖为２０￣３０ｇ／Ｌ时，利于毛状根的生长和龙胆苦甙含量的形成。葡萄糖的效果不如蔗糖２５０ｍｇ／Ｌ水解乳蛋白加入，对培养物中龙胆苦甙含量影响不明显，但是对毛状根的生长具有抑制作用，毛状根的龙胆苦甙含量（     

几个环境因子对鱼类生长发育影响的研究进展

本文主要从光照、盐度、温度和溶解氧四个方面简述了环境因子对鱼类胚胎及幼鱼、成鱼的影响,旨在为鱼类的健康养殖提供依据。光照通过光照强度及光周期变化对鱼类胚胎发育及幼鱼、成鱼生长产生影响,且因种而异;盐度在一定范围内不影响鱼类生长发育,但超出适宜盐度后,会对鱼类生长发育产生影响;温度主要对鱼类代谢反应速率起控制作用,影响其生理生化进程,从而成为影响鱼类生长和发育的重要环境变量;溶解氧在一定适宜范围内不影响鱼类生长发育,但不在适宜范围内（偏高或偏低）则会影响鱼类正常的胚胎发育及生长。     

红曲霉界面生长动力学模型的建立

采用界面培养系统,模拟红曲霉固态发酵过程。将红曲霉发酵过程分为快速期,减速期和衰退期,进而建立了界面上红曲霉生长的动力学模型。模型较好地吻合了界面上红曲霉生长的动力学曲线,反映了红曲霉固态发酵过程中微环境下的生长过程。     

Cu、As单一及其复合污染对小麦种子萌发及幼苗生长的影响

通过水培试验研究了不同浓度的Cu、As及其复合作用对小麦种子萌发、幼苗生长的影响以及对小麦淀粉酶、过氧化物酶活性的影响。结果表明：低浓度的Cu、As单一及其复合污染时,对种子萌发初期有短暂的促进作用,高浓度时有抑制作用,且随着浓度的升高,抑制作用加强,毒害增强,复合污染时表现出一定的拮抗效应,除此以外,Cu、As对小麦种子萌发过程中的淀粉酶、过氧化物酶的活性也会产生一定的影响。     

植物生长调节剂对丰花月季茎段培养的影响

本试验以ＭＳ，１／２ＭＳ为基本培养基，研究了细胞分裂素和生长素对丰花月季茎段培养的影响。结果表明：两种细胞分裂素ＢＡ，ＺＴ单独使用和与三种生长素ＮＡＡ，ＩＡＡ，ＩＢＡ配合使用均能诱导丰花月季的茎段出芽，而单独使用效果更好。两种细胞分裂素比较，不论单独使用还是配合使用，ＺＴ的效果都明显优于ＢＡ。