肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)在TNF信号传导中的作用

肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAFs)是经TNF受体超家族和IL-1R/TLR超家族信号传导通路的重要成分.TNF信号传导中,TRAF2作为接头蛋白和调控因子在几乎所有分支通路中起作用,在调节TNF-R1介导的NF-κB和JNK激活过程中起重要作用.近来的研究提示,TRAF2是凋亡信号传导和抗凋亡信号传导的分支点.本文主要阐述TRAF2的分子结构及它的结构与功能的关系,TNF信号传导的分子机制及TRAF2在其中的作用,重点关注TRAF2作为凋亡途径和NF-κB介导的存活途径,即这2条相互拮抗的信号传导途径的分支点的重要性.     

慢性充血性心力衰竭过程中的肿瘤坏死因子及其受体

慢性充血性心力衰竭病人血清中TNFα水平升高，当其≥10^-8mol/L时，可能作为内分泌激素，通过与其受体(膜结合型及可溶型)结合，直接损伤心肌纤维，影响心肌细胞凋亡过程，引起或促进心功能不全的发生。TNF途径成为充血心衰发病机制中的新内容。可考虑应用TNFr拮杭剂治疗心衰。     

肿瘤坏死因子与临床检测

肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)最早是从巨噬细胞中发现的仅杀伤癌细胞而不损伤正常细胞的因子,它能激活中性粒细胞并刺激其产生超氧化物,释放溶酶体酶,从而提高杀灭微生物的活性.TNF水平测定对于某些疾病的诊断、判断预后及指导用药均具有重要意义.本文就这几方面国内外研究近况综述如下:一、TNF来源、特点、生理作用TNF-α最早由Carswell等于1975年首先报道的,1984年Penica等分离表达了人的TNF-α的cDNA.目前,人们根据TNT的来源暂分为三种:一是由活化的单核或巨噬细胞分泌产生的称为TNF-α;二是由活化的T-淋巴细胞分泌产生的称为TNF-β;三是由NK细胞分泌产生的称为TNF-γ.人TNF-α是由3个分子量为17KD的单体通过1个二硫键非共价组成的,含有157个氨基酸的非糖蛋白;人TNF-β则是由171个氨基酸组成的、分子量为25KD的糖蛋白,分子内无半胱氨酸.TNF的生物学效应是:适量的TNF可调节机体的免疫及代谢功能,增强机体对入侵病原体的抵抗力,对维持机体内部的稳定状态及抵制各种致病因子的侵袭具有重要意义.但是,TNF的过量表达则与机体的炎症、感染、机体损伤等病理状态有关.TNF-α诱导的各种细胞反应是通过与细胞表面两类特异性受体相互作用而产生的,即55KD的TNF受体(TNF receptor,TNF R_1)和75KD     

不同信号传导物质对玉米防御酶活性的诱导作用

茉莉酸（甲酯）和水杨酸（甲酯）已证实是植物体内信号传导物质，与植物防御物质的产生有密切关系。本文研究了信号传导物质（水杨酸、茉莉酸甲酯以及水杨酸甲酯）对玉米品种粤农9号玉米幼苗防御性酶的诱导作用。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合低剂量顺铂诱导多药耐药人卵巢癌细胞凋亡的实验研究

为研究卵巢癌多药耐药机制和逆转耐药,探讨在低剂量顺铂存在下,人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对多药耐药人卵巢癌细胞的杀伤增效作用及其可能存在的分子病理机制。用顺铂为诱导剂,逐步建立多药耐药人卵巢癌细胞株SKOV3/cDDP。(此细胞株经免疫组化检测P-gp高表达)。TRAIL、顺铂或两药联用12h,24h,48h,采用MTT法测试细胞毒作用,Hochest33258染色荧光显微镜下观察细胞形态学改变,透射电镜下观察亚细胞结构形态,通过流式细胞术检测细胞凋亡比例,Western blot分别检测在联用TRAIL作用前后cFLIP蛋白的表达情况。结果显示:1)单用100ng/mL TRAIL只能杀伤4.67%±0.26%的SKOV3/cDDP细胞,IC50>1000ng/mL。顺铂对SKOV3/cDDP细胞的作用存在剂量依赖性细胞毒效应,这种效应主要通过诱导细胞凋亡实现;2)亚毒性浓度TRAIL(100ng/mL)与亚毒性浓度DDP(1.0μg/mL)联用可杀死52.12%±2.84%的SKOV3/cDDP细胞。呈现出高效协同作用;3)流式细胞术分析、透射电镜观察及荧光显微镜证实其协同性杀伤作用主要通过促进诱导细胞凋亡实现;4)亚毒性浓度TRAIL(100ng/mL)与亚毒性浓度DDP(1.0μg/mL)联用,可使细胞cFLIP蛋白的表达下调,促进了细胞凋亡的发生。结论:TRAIL与亚毒性浓度顺铂联用表现出对多药耐药人卵巢癌细胞的高效杀伤作用,这种作用可能主要由促进细胞凋亡介导实现,cFLIP蛋白的表达减少可能参与这一过程。     

人肿瘤坏死因子cDNA衍生物在大肠杆菌中的表达及活性测定

应用基因工程方法构建了含人肿瘤坏死因子ＣＤＮＡ衍生物的重组体．转化大肠杆菌后酶切鉴定．转化菌经摇瓶培养及温度调控，获得高效表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，表达的ＴＮＦ分子量约为１７ｋＤ，蛋白量约为菌体可溶性蛋白的２０％．用Ｌ９２９细胞毒性测定法测得菌液ＴＮＦ的表达为２×１０８ｕ／ｍＬ．抗ＴＮＦ的单克隆抗体可以中和大肠杆菌表达的ＴＮＦ对Ｌ９２９细胞的细胞毒性．     

肿瘤坏死因子的来源及生物学功能简介

本文主要阐述了肿瘤坏死因子的来源及定位，以及在肿瘤的发生、一些重要疾病的发生过程以及卵巢发育过程中的生物学功能。     

人新型肿瘤坏死因子在E.coli中的高效表达、纯化及诱导凋亡活性

采用PCR技术获得了新型的人肿瘤坏死因子基因，在153位氨基酸处引入突变，使Gly突变为Leu.将突变体hTNF基因克隆到表达载体pQE30中，SDS-PAGE结果显示经IPTG诱导后,hTNF基因获得大量表达，通过Ni金属螯合层析柱亲和层析获得到纯化的hTNF融合蛋白，Western blot结果表明hTNF蛋白可与抗TNF的抗血清知识性发生特异性反应，荧光染色实验检测了hTNF蛋白诱导细胞发生凋亡的活性。     

JAK2在生长激素介导的信号传导中的作用

在细胞水平上,JAK2在生长激素介导的信号传导中具重要作用。生长激素与生长激素膜蛋白受体结合,激活胞质酪氨酸激酶JAK2后,JAK2自身磷酸化。同时磷酸化生长激素膜蛋白受体,从而形成信号传导因子与转录激活因子、适配蛋白Shc等细胞信号分子高亲和位点。生长激素刺激下的JAK2也会磷酸化胰岛素受体底物,从而激活磷酯酰肌糖3激酶以及其它相关的调节新陈代谢的生物分子活性。而且JAK2还能激活适配蛋白SH2-B。这些因子和激活途径可能是生长激素作用于机体并调节机体生长代谢的基础。     

柱层析法纯化且人肿瘤坏死因子α及其抑瘤作用

半合成人肿瘤坏死因子ＴＮＦ－α在大肠杆菌中高表达，发酵后收集菌体经超声破碎，然后在１２０００ｒ／ｍｉｎ４℃离心１０ｍｉｎ，上清经６０℃热处理３０ｍｉｎ，离心上清用６０％饱和度的硫酸铵沉淀，再依次经过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５，ＤＥＡＥ－５２纤维素和Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－７５柱层析，得到的纯化ｒｈＴＮｆ－ａ比活性为２×１０＾７ｕ／ｍｇ，回收率为２４％，经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和ＨＰＬＣ鉴定，纯度达９５     

一步法免疫亲和层析纯化重组人肿瘤坏死因子

提出一种简便的免疫亲和层析方法，有效地分离纯化重组人肿瘤坏死因子（ｒＨＴＮＦ），此法不需预先分离纯化单克隆抗体．用交联刘ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｂｅｒｉｍｉｄａｔｅ使抗ＴＮＦ的单克隆重抗体和ｐｒｏｔｅｉｎＡ—ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ共价结合，成为稳定的免疫基质，制备免疫亲和层析柱，将重组ＴＮＦ粗制品一步纯化为均一组份．     

人肿瘤坏死因子穿梭表达载体的构建

应用ＤＮＡ重组技术,将人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ插到质粒ＰＲＬ４３９的ＰｐｓｂＡ启动子下游,得到中间载体ＰＲＬ＿ＴＮＦ;再把ＰＲＬ＿ＴＮＦ上含ＰｐｓｂＡ和（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ的片段连到穿梭载体ＰＤＣ＿８上,构建成穿梭表达载体ＰＤＣ＿ＴＮＦ．转化大肠杆菌ＴＧ１后,进行发酵培养．ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ分析和免疫印迹检测结果显示ｒｈＴＮＦ获稳定表达,分子量为１７ｋｕ．本研究结果为ｒｈＴＮＦ在蓝藻中的表达提供了技术基础．     

植物蛋白激酶MAPK及其在病原信号传导中的作用

植物蛋白激酶在信号传递过程中越来越受到关注。促细胞分裂剂激活性蛋白激酶(MAPK)是一类存在于各种真核生物体中的丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶。它被上游激活因子MAPKK磷酸化而激活,并通过将底物蛋白上的丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化而传递信号。它与其他一些信号分子组成MAPK级联信号通路,接受外界刺激信号,将信号转入细胞内,影响特定基因的表达,它的作用受到不同因子的调节。文章主要介绍了植物体中的MAPK的结构特点、分类以及其在病原信号传导中的作用。     

膀胱肿瘤患者血清肿瘤坏死因子,白细胞介素2水平的测定及其意义

膀胱肿瘤患者血清肿瘤坏死因子、白细胞介素２水平的测定及其意义钟甘平秦大山陈雪红（兰州医学院第二附属医院７３００３０）肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）是单核细胞和巨噬细胞产生的一种多功能细胞因子，可以直接杀伤或抑制肿瘤细胞。白细胞介素２（ＩＬ—２）是Ｔ细胞生长...     

人肿瘤坏死因子α在鱼腥藻7120中的表达

通过三亲结合转移方式,将含人肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）ｃＤＮＡ和ｐｓｂＡ启动子的鱼腥藻－大肠杆菌穿梭质粒ＰＤＣ－ＴＮＦ导入单细胞丝状鱼腹藻７１２０中。     

肥胖大鼠胰岛素敏感性与肿瘤坏死因子的关系

对随机分组的两组大鼠分别饲以普通饲料和高脂饲料。10周后发现高脂饲养组大鼠体重、内脏脂肪组织重量及空腹血TNF-α水平均高于普通饲料组，且出现胰岛素抵抗。结果表明，高脂饮食可诱导大鼠肥胖伴胰岛素抵抗，其胰岛素抵抗的形成可能与TNF-α水平的升高有关。     

与肿瘤坏死因子—α—有关的抑制物（综述）

与肿瘤坏死因子－α有关的抑制物（综述）唐海兰（暨南大学医学院组织胚胎学教研室，５１０６３２，广州）关键词：肿瘤坏死因子；免疫；抑制中图分类号：Ｒ３４－２肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α）是机体免疫系统中产生的最重要的细胞因...     

人肿瘤坏死因子可溶性受体I cDNA的克隆及其在原核和真核细胞中的表达

以人的胎盘总ＲＮＡ为模板,用ＲＴ－ＰＣＲ的方法,获得人肿瘤坏死因子可溶性受体Ｉ（ｓｈＴＮＦＲ－Ｉ）的ｃＤＮＡ,并对其进行全序列分析,在此基础上构建了原核及真核的表达载体,进行真核瞬间表达及活性测定和原核表达及产物初步纯化