龙柚芽变系的RAPD分析鉴定

利用100个10bp的随机引物对龙柚的4个芽变系的基因组DNA进行RAPD扩增分析,探讨芽变系遗传物质的变化．在这100个随机引物中,筛选出能在4个芽变系中扩增出稳定多态性片段的引物11个,一共扩增出了63条片段,其中多态性片段有19个,占30．16％．聚类分析的结果,芽变系2和4的遗传距离最小（0．1001）,相似系数最大（0．9048）．表明了芽变引起的遗传物质的改变能够通过无性繁殖的方式存在,用RAPD的方法来分析不同芽变系的遗传关系是可行的．     

点带石斑鱼遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD标记技术对海南点带石斑鱼养殖群体和野生群体的遗传结构进行了初步研究.从100个随机引物筛选出20个,在养殖群体和野生群体各20尾中分别扩增出183和176条DNA片段,其中多态性片段的比例分别为67.57%和75%,平均杂合度分别为0.498 0和0.531 1,遗传相似率分别为0.816 5和0.794 6,群体间遗传距离为0.329 6.Shannon遗传多样性指数表明,两群体中的遗传变异有40.95%来自群体内,而59.05%来自群体间.野生群体的多态位点比例和杂合度明显高于养殖群体.点带石斑鱼与野生群体相比,养殖群体的杂合度和遗传多样性有所下降,提示在点带石斑鱼的人工繁育过程中应引进标记辅助选择等技术手段.     

福建省6种早熟良种柚的RAPD分子标记研究

采用改良的CTAB法成功提取龙柚等6种福建省旱熟良种柚叶片的DNA,并对其进行RAPD分析．从初选的100个随机引物中筛选出12个扩增效果较好的引物,对提取的DNA进行PCR扩增,获得清晰可重复的位点107个,平均每条引物产生的位点为8．9个,其中多态性位点93个,占86．9％;在部分样品中检出了特异性RAPD标记24个,占23．4％：样品间遗传相似系数比较和UPGYA聚类分析表明坪山柚和文旦柚的亲缘关系最近,度尾蛮柚和四季柚分别与其它5个柚类的亲缘关系较远．     

福建6种柚RAPD鉴定分析

以福建省栽培面积较广,果实成熟期不同的渡尾文旦柚、琯溪蜜柚、坪山柚、长泰文旦柚、龙柚、下河蜜柚6种柚为研究对象,用100个10bp的随机引物对6种柚的基因组DNA进行RAPD分析,筛选出能扩增出稳定多态性片段的引物31个,一共扩增出174条片段,其中多态性片段有137个,占78.74%.聚类分析的结果,RAPD标记所反映的6个品种之间的遗传相互关系与传统的分类结果是一致的.     

花粉管通道法转柱头外露棉DNA及转化体RAPD分析

提取“异9-3”柱头外露棉总基因组DNA，通过花粉管通道法经微量注射导入抗虫棉707．1的胚囊内，D1代田间筛选到柱头外露的转化植株，遗传分析结果表明转化株柱头外露性状由一对隐性基因控制，50个随机引物进行PCR扩增，33个引物扩增出的DNA在供体、受体和转化体之间呈现出多态性，其中引物S462(TCG GCA CGC A)在供体和转化体之间出现相同产物而受体没有出现扩增产物，该引物有可能作为柱头外露系的分子标记．RAPD分析结果表明转化体与受体有较多相同基因位点，而与供体相同基因位点较少，转化体还有供体和受体都不具有的基因位点，这可能是外源DNA导入时引起碱基突变所致。     

带有白花甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系RAPD分析适宜引物的筛选

运用68个10bp随机引物对白花甜菜、载培甜菜、带有白花甜菜染色体的栽培甜菜单体时扣系进行了PCR扩增,所选引物中有2个扩增产物不明显,44个引物扩增产物在所选材料中无多态性.22个引物的扩增产物对白花甜菜具有特异特殊异片段,这22个引物将可以用于白花甜菜单体对扣系的RAPD分析研究.     

拟南芥FIE基因特异片段的克隆及序列测定

根据拟南芥FIE基因的序列设计PCR引物,以拟南芥基因组DNA为模板,通过PCR反应扩增FIE基因特异性片段,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,长为1633bp,与预期结果相符。将该基因片段定向克隆到pGEM-T载体上,得到重组质粒p1633,酶切鉴定及测序分析结果表明该克隆为拟南芥FIE基因特异片段,与拟南芥FIE基因比较同源性达99.8％,可以作为探针使用。     

玉米丝黑穗病苗的快速鉴定

通过提取玉米根和叶片组织的DNA,再选用玉米丝黑穗病菌的特异性引物(GSP)进行PCR扩增检测,结果发现,GSP引物在玉米根组织中丝黑穗病的检测率在80%,叶片中玉米丝孢堆黑粉菌的检测率为15%.表明,可以利用GSP引物通过检测玉米根部组织,快速发现玉米丝黑穗病病苗.     

G型小麦细胞质雄性不育RAPD分析

对小麦G型细胞质雄性不育的供体材料、轮回亲本和近等基因品系进行RAPD分析,在200个随机引物中获得二个具有多态性的特异片段．     

PCR扩增HBV x基因特征序列检测乙肝病毒DNA

提出了通过扩增特征序列检测乙肝病毒DNA的新方法．根据乙肝病毒DNA保守区的特点,利用Primer Premier 5.0设计出乙肝病毒x基因的特异性引物,并在以血清DNA为模板的聚合酶链反应体系中进行扩增,由此检测待测血清中是否存在乙肝病毒DNA．实验结果表明,该方法较传统的酶联免疫法灵敏,可以检测出酶联免疫法所检测不到的乙肝病毒,具有与免疫印迹一样的准确度;通过与以乙肝病毒s基因为靶序列的PCR反应体系比较,发现乙肝病毒x基因比s基因在序列上更为保守,更适合做乙肝病毒DNA检测的特征序列．     

黑龙江省西部葡萄的ISSR分析

采用ISSR技术对黑龙江省西部地区葡萄的 9个品种进行亲缘关系的研究 ,用 7个引物共扩增 86个位点 ,其中 5 4个位点为多态性位点 ,多态性百分率为 62 .8% .对 9个供试材料间遗传关系进行聚类分析 ,结果表明 :ISSR能检测遗传多态性 ,如L =0 .63供试材料可分出欧亚种和美洲种 .     

RAPD技术在蜘蛛遗传多样性研究中的方法探讨

进行了RAPD技术在蜘蛛遗传多样性研究中的方法探讨.利用蜘蛛的附肢作为其基因组DNA抽提的材料,且该改进的方法所抽提的蜘蛛基因组DNA的产量与纯度足以满足RAPD分析的要求;通过优化RAPD PCR反应条件,可以获得清晰度高,重复性好的RAPD图谱以用于蜘蛛(如拟水狼蛛Piratasubpraticus)、拟环玟豹蛛(Par dosapseudoannulata)、武昌獾蛛Trochosawuchangensis等)的遗传多样性研究;在不投食饲养武昌獾蛛一个月以上的前提下,用随机引物S92(5′CAGCTCACGA3′)比较分析了武昌獾蛛的头胸部与其附肢各自的RAPD图谱的差异,差异不显著(P>0.05).结果表明:蜘蛛的附肢和头胸部均可作为其遗传多样性研究材料,但以前者为材料可以有效防止异源DNA的干扰.因而,其基因组DNA在作为蜘蛛遗传多样性的RAPD分析模板时要优于头胸部.     

四棱豆种质资源遗传多样性的RAPD分析

对12个四棱豆品种的遗传多样性进行了RAPD分析,6条引物共扩增出41条DNA带,73.2%具有多态性,表明品种间存在较丰富的遗传差异.通过聚类分析,在相似系数0.68的水平上将12个四棱豆品种分为3类,并且该聚类结果与以主要农艺性状为依据进行品种类群划分基本一致.     

5个温郁金居群遗传多样性的ISSR分析

应用ISSR标记技术对瑞安、乐清和平阳三个地区5个居群的温郁金(Curcuma wenyujin)遗传多样性进行分析,筛选出6个引物用于温郁金5个居群的50个个体ISSR-PCR扩增,共检测到42个结合位点多态位点34个,多态位点百分率是80.95%.总的基因多样度平均值为0.239 5,居群内的基因多样度为0.161 8,居群间的基因多样性为0.0777.基因分化系数在0.019 1⁰.9414之间,平均值为0.324 5,其中居群间的遗传变异占总遗传变异的32.45%,居群内的遗传变异占总变异的67.55%.温郁金有着较高的遗传多样性水平,且居群内发生了较高的遗传分化.基因流系数Nm为1.041 0,表明温郁金居群间的基因交流也比较多.     

Y型沸石分子筛羟基谱带的红外光谱研究

本文制备了一系列不同硅铝比的Y型沸石样品,以红外光谱法系统地研究了样品的羟基谱带及其变化情况。结果表明,Y型沸石羟基谱带随沸石体系组成的变化及晶格空位和骨架外铝的出现而发生一系列的变化,样品表面羟基振动频率受骨架内电负性和骨架外电荷变化的影响会产生规律性的位移,进一步还讨论了其作用的机理,另外讨论和归属了Y型沸石常出现的几种羟基红外吸收谱带。     

苏云金芽孢杆菌伴孢晶体中20-kb DNAs上染色体基因的鉴定

已有的研究表明苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株菱形晶体中含有与原毒素紧密结合的20-kb DNAs,利用PCR-RFLP分析发现在这些20-kb DNAs上含有cry1Aa、cry1Ac、cry2Aa和cry2Ab基因.本研究利用特异引物从4.0718菌株中20-kb DNAs上分别扩增出带有自身调控序列的cry1Ac和cry2Aa基因,并将其分别电转至Bt无晶体菌株Cry-B中获得重组菌株Cry-B(pHC42)和Cry-B(pHC39).SDS-PAGE和透射电镜分析表明这两种重组菌株能够分别产生由130-kDa的Cry1Ac原毒素形成的菱形晶体以及由65-kDa的Cry2Aa原毒素形成的方形晶体.毒力生测的结果显示,这两种菌株的表达产物对棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫具有预期的杀虫效果.重组菌株分别形成的两种晶体经不同的缓冲液溶解后能释放出与20-kb DNAs紧密结合的原毒素,同时在20-kb DNAs上均可检测到源于Bt染色体的spo0A和nprA基因片段.