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相似文献
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1.
从厦门文昌鱼体内提纯了一种酸性磷酸酶,用快速蛋白液相层析法(FPLC)的Su-perose12柱和MonoS柱对其进一步纯化,用聚丙烯酰胺凝胶电泳和FPLC的Superose12柱鉴定为单一纯的酶制剂.它的分子量为52000,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定该酶为二聚体.酶的提纯倍数为612.52.  相似文献   

2.
中华眼镜蛇毒神经生长因子的研究   总被引:5,自引:0,他引:5       下载免费PDF全文
采用CM-SepharoseCL-6B和SephosilC8以及HPLC层析方法,自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子(NGF),此NGF经8d鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经HPLC及聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组成,经SDSPAGE及HPLC测定分子量分别为24.1KD和24.9KD,等电聚焦电泳测得pI为8.2,氨基酸组分分析表明NGF含酸性氨基酸较少,通过125|标记NGF测定出NGF在生物体内主要分布于肾、肺、及周围神经  相似文献   

3.
蛇毒神经生长因子的分离纯化及鉴定   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用Sephadex G50、CM-Cellulose 32柱层析,从中华眼镜蛇中分离出神经生长因子(Nerve Growth Facter,NGF)。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blotting法证明所得以的NGF为单一组分,相对分子质量约为1.3×10^4。经凝胶等电聚焦电泳测得NGF等电点PI约为7.0左右。经HPLC及电泳图像分析系统测得纯度为98%。此NGF等8d鸡胚背  相似文献   

4.
用Sephadex G-25、Sephadex G-50、Celluose CM32三步层析从意大利蜜蜂毒中分离纯化得到对家兔血小板具有强诱导聚集作用的Melittin活性组分,它在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈一均匀蛋白带,分子量为3000,凡26个氨基酸残基组成。  相似文献   

5.
采用DEAE,S-SepharoseF·F离子交换层析,ConA-Sepharose,HeparinSegharose亲和层析,从110例妊娠3~8周早孕妇女混合静脉血清中提取,纯化早孕因子(EPF)。以玖瑰花结抑制试验(Ea-RIT)检测孕血清及各阶段提取物的EPF活性,盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其纯度.结果表明提取,纯化的EPF达电泳纯,在国内尚未见报导。  相似文献   

6.
林肯链霉菌林肯变种是林可霉素的产生菌,研究中发现其菌丝体中谷氨酰胺合成酶的比活力与林可霉素的生物合成存在正相关性。在此基础上,报道了GS的分离纯化,分子特征,酶学性质和活力调节特性,采用硫酸铵分级沉淀,DE-52离子交换层析,Sepharose 6B凝胶过滤等方法,从林肯链霉菌林肯变种中分离纯化了GS,用聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组分。  相似文献   

7.
黑曲霉(Aspergillusniger728)的粗酶液,经硫酸铵沉淀,SephadexG-25柱凝胶过滤脱盐,DEAE-Toyopearl离子交换柱层析和SephacryS-100凝胶层析纯化,经PAGE鉴定为一条带SDS凝胶电泳测定分子量为70000.金属离子Fe3+对该酶有一定的抑制作用,该酶的等电点为3.7,最适pH为4,最适温度为60℃.E2801%为15.72,Km值为0.112×10-3m.  相似文献   

8.
蓝、绿藻SOD同工酶类型及其进化   总被引:4,自引:0,他引:4  
以新鲜蓝藻极大螺旋藻(Spirulina m axim a)、钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)、盐泽螺旋藻(Spirulina subsalsa)、单细胞绿藻盐藻(Dunaliella salina) 、多细胞绿藻轮藻(Chara)、水绵(Spir-ogyra)和鞘藻(Odeogonium )为实验材料.经抽滤、超声波破碎后,进行聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳和抑制剂处理,结果表明三种螺旋藻都只含有Fe- SOD,其中极大螺旋藻、钝顶螺旋藻含有4 条Fe- SOD同工酶谱带,而盐泽螺旋藻含有6 条谱带;盐藻、水绵、鞘藻含有Fe- SOD和Mn- SOD两种类型,而轮藻含有Fe- SOD、Mn- SOD和Cu·Zn- SOD三种类型.  相似文献   

9.
吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶关系的同工酶研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
用细胞质雄性不育系小麦和普通小麦中国麦与鄂恩1号为材料,用Davis和Reisfeld不连续聚丙烯酰胺垂直析以凝胶电泳技术进行吲哚乙酸氧化酶和阴、阳离子过氧化物酶同工酶分析,并用SC910型双波段薄层扫描仪进行扫描,记录其谱带数及强弱,结果表明阳离子过氧化物酶同工酶谱与IAA-氧化酶同工酶谱十分相似,而阴离子过氧化物酶酶谱相差甚远,由此表明具有吲哚乙酸氧化酶活性位点的过氧化物酶,应主要是阳离子过氧  相似文献   

10.
利用含有真核细胞复制起始区(OriginofDNAReplication)的Ors12DNA作为探针,检测了人血清中与Ors12DNA特异结合的蛋白质。凝胶电泳迁移率改变实验表明人血清中存在特异Ors12DNA结合蛋白。实验还对影响Ors12DNA与蛋白质最适宜结合的各种因素进行了研究。苯酚处理反应体系及限制性内切酶的酶切位点保护实验都证实了Ors12DNA-蛋白质复合物的存在。利用硫酸铵盐析及DNA亲和层析,对血清中的Ors12DNA结合蛋白进行了部分纯化,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,Ors12DNA结合蛋白为一组非均一的蛋白质,亚基分子量分别为64kD、44kD和24kD。  相似文献   

11.
黄山铜镍成矿带中含镍矿物种类繁多,成分复杂。根据显微镜下鉴定和电子探针成分分析,含镍矿物可分为Fe-Co-Ni-S系列;Fe-Co-Ni-As系列;Fe-Co-Ni-As-S系列。由于此类矿物相似的光性较多,本文着重进行了组分特征的研究。  相似文献   

12.
长毛对虾酸性磷酸酶的纯化与性质   总被引:32,自引:2,他引:32  
分别从健康和患病长毛对虾(Penaeuspenicilatus)肌肉提取一种酸性磷酸酶(AC-Pae,EC.3.1.3.2.),进一步用硫酸铵分级分离,SephadexG-200柱纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,并于BeckmanDU-8B紫外分光光度计扫描为单一区带酶液。该酶紫外吸峰在280nm处,荧光激发峰在284nm处,发射峰在347nm处。酶的分子量为73000道尔顿,等电点为4.7酶水解对硝基苯磷酸二钠(PUPP)最适pH为4.5,最适温度40℃。健康虾与病虾酶的活化能分别为41.03kJ/mol·L和45.78kJ/mol·L,米多常数km值分别为0.80×10-4mol/L和1.43×10-4mol/L。重金属离子Cu2+,Hg2+,有机溶剂甲醇,乙醇,乙二醇等对ACPase有明显的抑制作用。  相似文献   

13.
大片吸虫谷胱甘肽S-转移酶的提纯及生化分析   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
用谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析法从中国广西水牛源大片吸虫(Fasciolagigantica)成虫体内提纯大片吸虫谷胱甘肽S-转移酶(FgGST)。提纯的FgGST在12%SDS-PAGE图谱上呈现二条清晰谱带,分子量分别为26.5kD和28kD。以CDNB为标准底物测得FgGST的活力为17.08μmol/minmg。用谷胱甘肽亲和层析柱纯化的FgGST,不仅纯度好,而且获得率高,所得FgGST至少占上柱上清液总蛋白含量的3.1%。  相似文献   

14.
黄河鲤和德国镜鲤及其杂种F1同工酶的比较研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
本研究用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,以亲本黄河鲤(CyprinuscarpioL.(YellowRivercarp))和德国镜鲤(SeatteredCyprinusCarpio.L.mirror)及其杂种F_1的肝脏、脾脏、心、肾脏、脑和肌肉为材料,进行了乳酸脱氢酶同工酶(LDH),苹果酸脱氢酶同工酶(MDH)和酯酶同工酶(EST)电泳图谱的比较分析,结果表明,同种鱼不同组织的同工酶谱有明显的组织特异性,亲本及F_1的同种不同组织同工酶谱也有差异,亲本各组织的大多数同工酶在F_1代得到表观,杂种F_1的同工酶谱的表现又可分为三类:1)与双亲完全互补型;2)部分互补和少数亲本酶带消失型;3)产生双亲均无得以出现的酶带或杂种酶带型.本文还讨论了黄河鲤、德国镜鲤及其F_1的同工酶的遗传基础和亚基组成.  相似文献   

15.
IDENTIFICATIONOFTHEHYBRIDCELLFROMTHEINTER┐KINGDOMPROTOPLASTFUSIONBETWEENRhodobactersphaeroidesandSacharomycescerevisiaeCheng...  相似文献   

16.
本文研究了非晶态(a)-Fe-TM-Si-B(TM=Co,Si,Mo,Nb)合金从1.5K到300K的磁化强度及室温穆斯堡尔谱,得到了成里温度Tc、饱和磁化强度σs(0)、自旋波颈度常数D及平均超精细场等。结果表明,(a)对于Fe83Si5B12,当Nb,Mo与Si,Co取代Fe后,Fe-(Nb,Mo)-Si-B的磁性质不同于Fe-(Si,Co)-Si-B;(b)a-Fe-(Mo,Nb,Cr,W,  相似文献   

17.
枯草芽孢杆菌(Bacillus sublilis)BF7658产生的α-淀粉酶,经絮凝、流水 层析和DEAE--纤维素层分析进行了提纯。提纯的酶活力为132413.8U/g,与业用酶相比,纯度提高19-22倍,为精酶。用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,图谱上只出现单一的区带。  相似文献   

18.
脱落酸受体及其基因的分子免疫学研究(英文)   总被引:1,自引:0,他引:1  
发展了研究脱落酸(ABA)结合蛋白的两类免疫探针。其一,用ABA-C1-BSA-Sepharose4B亲和层析柱纯化出ABA结合蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示该蛋白分子量为56KD的一条带,它具有特异结合ABA的能力(Kd=2.0×10-9mol/L)。当用蛋白水解酶K水解该蛋白,并用1%琼脂糖凝胶电泳时,发现其中存在约300个核苷酸的rRNA分子。用识别ABA结合蛋白的抗体筛选cDNA表达文库,从200,000个独立噬斑中获得120个编码玉米17sRNA的cDNA克隆和1个cDNA编码结合蛋白的cDNA克隆(24cDNA)。24cDNA有1075个碱基对,含编码254个氨基酸的开放阅读框架。其二,制备了识别抗ABA单克隆抗体的独特型抗体(anti-Id),它具有模拟并竞争ABA的能力。用上述两类免疫探针定位了植物细胞中的ABA结合蛋白。发展了研究脱落酸(ABA)结合蛋白的两类免疫探针。其一,用ABA-C1-BSA-Sepharose4B亲和层析柱纯化出ABA结合蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示该蛋白分子量为56KD的一条带,它具有特异结合ABA的能力(Kd=2.0×10-9mol/L)。当用蛋白水解酶K水解该蛋?  相似文献   

19.
应用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳对水稻幼苗SOD同工酶进行了研究。结果表明,4个品种的水稻幼苗的均含有6种SOD同工酶,其中5种为Cu.Zn-SOD,一种为Mn-SOD,未发现Fe-SOD.Cu.Zn-SOD活性占SOD总活性的90%左右,Mn-SOD占10%左右,品种间同酶类型,酶活性无明显差异。  相似文献   

20.
用改进的Kuby等人方法从大熊猫骨骼肌中纯化了肌酸激酶,并对此酶的某些性质进行了研究。纯化倍数为 35.7;收率17.3%;比活力为 55.3U/mg;等电点为 6.60。聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为一条带。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其亚基分子量为42 000,总分子量为 84 000,该酶是由两个相同亚基组成的二聚体。酶对肌酸的Km 为 5.26mmol/L;对ATP的 Km为 0.74mmol/L,酶的最适温度是 30~36℃;酶的最适pH大于8.0。  相似文献   

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