丝状真菌原生质体技术的研究（Ⅷ）：渗透压稳定剂对？…

报道用五种无机盐和有机糖醇作渗透压稳定剂,对草菇、银丝菇、台湾根霉和黑曲霉原生质体分离和再生的影响。分离原生质体以ＫＣｌ、ＮａＣｌ和ＭｇＳＯ４等无机盐渗稳剂较有机糖醇效果好。ＫＣｌ和蔗糖对四种真菌原生质体再生都有较好的效果。就浓度而言,分离原生质体０．５ｍｏｌ／Ｌ ＫＣｌ、ＭｇＳＯ４、蔗糖和甘露醇对黑曲霉和台湾根霉都是最佳的浓度。草菇和银丝菇以０．４ｍｏｌ／Ｌ蔗糖或０．５ｍｏｌ／Ｌ ＫＣｌ和ＭｇＳ     

丝状真菌原生质体技术研究——培养条件对原生质体的影响(VII)

研究了培养基成分、培养方式和培养时间对台湾根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｆｏｒｍｏｓａｅｎｓｉｓ）、糙皮侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）、草菇（Ｖｏｌｖａｒｉｅｌａｖｏｌｖａｃｅａ）和银丝菇（Ｖ．ｂｏｍｂｙｃｉｎａ）原生质体分离再生的影响．分离原生质体培养基,草菇以ＰＤＡ＋稻草浸出液,银丝菇以ＣＹＭ培养基,糙皮侧耳以２０％平菇子实体浸出液配制的ＰＱＡ培养基为好．原生质体再生培养基,草菇以ＰＤＡ＋稻草浸出液,糙皮侧耳以ＢＭ培养基为好．不同培养方式对不同菌种原生质体再生率的影响是不同的．台湾根霉的原生质体在液体再生培养基上的再生率为４５％,而在固体培养基上再生率为０．０９％;草菇的原生质体以固体和液体两种培养方式再生无明显差异．试验过的所有丝状真菌,夹层固体再生较单层固再生率高．菌龄影响原生质体的分离和再生．不同真菌分离原生质体的菌龄不同,台湾根霉的菌龄以１４～１６ｈ（３２℃）、草菇以４８ｈ、银丝菇以７２ｈ（３０℃）为最适培养时间     

丝状真菌原生质体技术的研究——去壁酶对丝状真菌原生质体形成的影响(Ⅱ)

本文研究了几种丝状真菌原生质体形成的最佳酶类和酶浓度(W/V).结果表明:台湾根霉为2％的溶壁酶(Ⅱ);黑曲霉,平菇,草菇,银丝草菇为1.5％的溶壁酶(Ⅰ);放线菌的红霉素链霉菌为0.025％的溶菌酶.     

丝状真菌原生质体技术研究

研究了培养基成分,培养方式和培养时间对台湾根霉、糙皮、侧耳、草菇和银丝菇原生质体分离再生的影响。分离再生质体培养基,草菇以ＰＤＡ＋稻草浸出液,银丝菇以ＣＹＭ培养基,糙皮侧以２０％平菇子实体浸出液配制的ＰＱＡ培养基为好,原生质体再生培养基,草菇以ＰＤＡ＋稻草浸出液,糙皮侧以ＢＭ培养基为好,不同培养方式对不同菌种原生质体再生率的影响是不同的。台湾根霉的原生质体在液体再生培养基上的再生率为４５％,而在固     

丝状真菌原生质体技术研究（V）──原生质体融合的形态学观察

本文报道了台湾根霉、黑曲霉、米曲霉、草菇、银丝草菇和糙皮侧耳等，几种丝状真菌原生质体释放、再生和融合过程的形态学观察结果，并对其机制进行了讨论．原生质体释放有顶位、侧位和原位释放３种方式；原生质体分无核、单核、双核和多核４种类型．原生质体的再生过程由壁的再生、修复和萌发３个阶段组成．原生质体萌发可成芽管状、念珠链状和３个以上方向分裂形成的不规则状．原生质体融合分为两个、３个和原生质体再融合３种类型，无核原生质体、原生质修复不完整、遗传物质不完全整合性和细胞壁合成机制不协调，是造成种间融合再生率低的重要因素．     

丝状真菌原生质体技术研究（Ⅵ）：高脚小伞原生质体…

报道高脚小伞菌丝体原生质体制备及再生的结果，多种因素影响原生质体的产量及再生率，在最适条件下，质原质体产量可达２．５４×１０＾６个／ｍｌ，再生率达２３．６％，还对原生质体的活力及核数进行了测定，本研究为进一步的原生质体融合及外源基因转化工作打下了基础。     

丝状真菌原生质体技术——(Ⅰ)黑曲霉原生质体灭活

在GM玻璃纸平板上接种10~6数量级的孢子悬液,31℃培养17～18hr,收集菌丝于1.5%Lywallzyme中酶解4hr,过滤离心收集原生质体,原生质体经50℃,5min处理,并20W紫外灯40cm照射,150s,0.1MHNO_2,pH4.6.再经31℃恒温处理7min,原生质体可达到全部灭活.     

丝状真菌原生质体技术研究(Ⅵ)——高脚小伞原生质体的制备与再生

报道高脚小伞菌丝体原生质体制备及再生的结果．多种因素影响原生质体的产量及再生率，在最适条件下，原生质体产量可达２．５４×１０６个／ｍｌ，再生率达２３．６％，还对原生质体的活力及核数进行了测定，本研究为进一步的原生质体融合及外源基因转化工作打下了基础     

枯草杆菌(B.subtilis)原生质体融合的方法学研究

利用改良的HM制备液,在适宜的条件下酶解制备亲本株的原生质体,在DNase存在的条件下,用PEG(MW6000)做为聚合剂,经低温短时间处理,将枯草杆菌(B.subtilis)Ki—2—132衍生株与BR_(151)衍生株的原生质体融合。再在适宜的条件下使用改良的DM_3再生培养基,补加适量经处理的人血清白蛋白,同时加入适量适合于枯草杆菌细胞壁再生的引物进行再生,使再生率达到了55～58.15％左右。融合率高达1.82×10~(-2)。筛选出51种不同类型的融合子923株,经传代8代测得其融合子的稳定率达32.46％,从而在工业菌株的选育中使获得高产菌株成为可能。     

小白链霉菌(Streptomyces albulus)的原生质体制备研究

广谱天然防腐剂ε-多聚赖氨酸产生菌Streptomyces albulus的育种工作目前仅处于常规育种水平,为对其进行原生质体技术的育种改造,对影响S.albulus原生质体制备的几个重要因子进行了详细研究。测定了S.albulus的生长曲线,确定制备原生质体的最佳菌龄为稳定期初期即培养40h;S发酵液中添加2·0%甘氨酸可使原生质体形成率最高;以破坏链霉菌细胞壁效果最好的溶菌酶进行酶解,确定最佳酶解温度为为35℃、最佳酶解时间为180min、最佳溶菌酶浓度为2.0mg·mL-1;在以上最佳原生质体制备条件下可获得纯净且量多的S.albulus原生质体,形成量达1.74×108cfu·mL-1,为S.albulus原生质体的进一步遗传育种奠定了良好的基础。     

环境渗透压影响硬骨鱼精子运动启动的研究进展

鱼类精子的运动启动受多种外界环境因素的影响,渗透压是影响大多数硬骨鱼类精子运动启动的重要因素.渗透压对鱼类精子运动启动的影响存在较大的种间差异和精子的个体差异,它通过影响精子细胞膜的形态结构、膜电位的变化和离子通道的开放状态,来调节鱼类精子运动启动的过程.     

过氧乙酸的稳定性及稳定剂的研究

为考察含量为40%左右过氧乙酸的稳定性及适宜的稳定剂,选择了五种化学试剂,分别添加在40%过氧乙酸中并分别进行了恒温38±1℃和室温避光条件下的含量监测.实验结果如下恒温38士1℃条件下稳定剂的稳定`果为焦磷酸钠＞硫氰酸钾＞草酸＞水杨酸＞EDTA;室温避光条件下稳定剂的稳定效果为焦磷酸钠＞水杨酸＞硫氰酸钾＞草酸＞EDTA.结果表明,五种稳定剂对延长40%过氧乙酸的稳定期均有明显效果,其中焦磷酸钠、硫氰酸钾等含P、S元素的稳定剂效果较好.     

细菌科间原生质体融合方法的研究

本文通过对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)151衍生株和北京棒杆菌(Corynebacterium pekinese)1134衍生株的科间原生质体融合的研究以及灭活原生质体的科间融合的研究,揭示了细菌科间原生质体融合的可能性,同时进行了不同融合方法的分析对比,为今后工业微生物的远缘育种提供了可以选择的有效途径和理论依据。     

Bacillus licheniformis原生质体形成及再生最佳条件的研究

研究了多种因素对Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ原生质体形成及再生的影响。在原生质体形成及再生的最佳条件下制备原生质体，原生质体的形成率和再生率分别达到９９．７％和３０．９％。     

酿酒酵母W5原生质体制备及再生条件的初步研究

对影响酿酒酵母W5制备与再生的一系列因素做了初步的研究,确定了原生质体制备与再生的最佳条件:菌龄为12h,脱壁预处理剂作用20min,在30℃,pH为偏酸或者偏碱的条件下,选用2%(m/v)的蜗牛酶用10mL试管摇床温育15min;渗透压稳定剂采用17%(m/v)蔗糖,原生质体制备率和再生率可达到95.11%和14.66%。     

枯草杆菌(B.subtilis)ki—2—132原生质体化及其活性的研究

本文探讨了原生质体制备液的种类、渗透压、PH值、酶解温度、酶量、细菌生长时期等条件对枯草杆菌原生质体化及其活性的影响。首次将Fodor等对巨大芽孢杆菌(B.megaterium)的原生质体制备液(HM)用于供试菌株,并经改良其渗透压,使再生率可达13.3％。经再改良,于HM液中加入适量的牛血清白蛋白,并同灭活的产气杆菌(E.aerogenes)混合后倾注再生平皿培养,可使再生率提高至32.4％,为进一步开展细菌细胞融合提供有益的资料。     

烧结温度对Zn_(0.98)Cu_(0.01)Co_(0.01)O稀磁半导体性质的影响

本文以Zn(NO3)2·6H2O,Co(NO3)2·6H2O,Cu(NO3)2·3H2O为原料,与适量的柠檬酸配制成溶液,采用溶胶—凝胶法(sol-gel)合成前驱体,将前驱体在氩气气氛中选择不同温度进行烧结得到Zn0.98Cu0.01Co0.01O稀磁半导体样品,利用X射线衍射(XRD)、光致发光谱仪(PL)、振动样品磁强计(VSM)对所制备样品的结构、光学性能及磁性进行研究.实验结果表明:制备的样品为单一的纤锌矿结构,烧结温度改善了样品的光学性质及磁性.     

对羟基苯甲酸合成的研究(Ⅰ)

本文研究了以悬浮法进行Kolbe-Schmitt反应合成对羟苯甲酸的工艺流程及适宜的反应条件;探讨了一种使产品纯度高、损失少、钾盐回收简便、省能的后处理方法。产率达45%。