龙眼不同愈伤组织培养方法的探讨及细胞观察

试验中以龙眼"红核子"品种胚性愈伤组织LC2细胞系为材料,研究不同条件对龙眼胚性愈伤组织生长的影响以及龙眼非胚性愈伤组织培养体系的建立,并通过显微镜观察比较龙眼胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的形态学差异。试验结果表明,高9cm、直径6cm、瓶口内径5cm的玻璃培养瓶在接种量约为30mg/瓶时龙眼胚性愈伤组织生长最好;龙眼非胚性愈伤组织以MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+活性炭0.5 mg/L培养效果最好;细胞观察表明,龙眼胚性愈伤组织较非胚性愈伤组织细胞更规则,有更多的内含物。     

曲阜香稻胚性愈伤组织培养及悬浮细胞系的建立

水稻 (OryzasativaL .)曲阜香系 10 3成熟胚在MS1培养基上诱导培养 ,初始愈伤组织为深黄色、瘤状 ,非松脆类型 .当在MS2 培养基上继代培养 ,经 3～ 4月初始愈伤组织转变为浅黄色、小颗粒状 ,松脆型胚性愈伤组织 .将胚性愈伤组织置于液体培养基中悬浮培养 ,经 4月多可得分散性好、生长快的胚性悬浮细胞系 .     

墨西哥玉米草组培体系的建立及愈伤组织切片观察

墨西哥玉米草是与玉米最近野生近缘种之一,可多茬刈割,产量高,品质好,被誉为青饲料之王,在畜牧业中扮演着重要角色,因此对墨西哥玉米草的深入研究具有重大的科研价值和经济效益．虽然墨西哥玉米草杂交体系已有较多报道,但墨西哥玉米草组培体系却鲜有研究．组培快速繁殖体系是通过生物技术对墨西哥玉米草进行品质改良的基础,因此建立高效的墨西哥玉米草组培快速繁殖体系具有重要意义．文中以墨西哥玉米草 8493 种子为实验材料,在含有2,4-D和6-BA的MS培养基上可以诱导幼苗基部的膨大节间,其在黑暗条件下两周可以诱导出愈伤组织．石蜡切片观察显示愈伤组织具备胚性愈伤特性．     

黄芩愈伤组织的诱导培养及其黄芩苷的含量测定

试验首次建立了黄芩愈伤组织中黄芩苷的测定方法,并对黄芩愈伤组织生长和黄芩苷生成的稳定性进行了初步研究.采用高效液相色谱法测定愈伤组织中黄芩苷的含量,色谱条件为:色谱柱为ODS-C18柱,流动相:水-甲醇-磷酸(47∶53∶0.2),流速为1 mL/m in,检测波长为280 nm,室温.结果表明:黄芩苷在2.6μg/mL~120μg/mL范围内线形关系良好(r=0.9994),平均回收率为99.74%,RSD为0.85%,该方法具有简便、快速、稳定性好,可用于愈伤组织中黄芩苷的含量测定.     

黄芩愈伤组织与丛芽诱导

为寻求黄芩愈伤组织、丛芽诱导的最佳条件,分别以茎尖、茎段、叶片、带节茎段等为实验材料比较不同诱导条件对诱导率的影响;比较培养过程中愈伤组织的增重量及生长状态.结果表明,诱导率:带节茎段要高于其它外植体;MS+6-BA0.5 mg/L +NAA0.5 mg/L为愈伤组织诱导率最高、愈伤组织增殖最大的培养基组合;MS+6-BA1.0 mg/L +NAA0.5 mg/L为不定芽诱导最合适培养基.     

茴香胚性愈伤组织的诱导和再生植株

以茴香幼苗的茎和叶柄为外植体，在不同种类和浓度的植物激素处理下产生了愈伤组织，进一步诱导生成胚性愈伤组织，在分化培养基上，愈伤组织通过形态建成的两种基本方式：器官发生和胚状体发生，得到了茴香的再生植株。     

刺槐不同愈伤组织的酯酶和过氧化物酶同工酶的差异分析

本研究以刺槐体细胞分化、发育过程中采用的垂直平板聚丙烯酰胺电泳方法分析了不同类型的愈伤组织之间表现出的多态性,结果表明,酯酶同工酶和过氧化物同工酶可用来区分刺槐胚性与非胚性愈伤组织及绿色愈伤组织.     

何首乌块根愈伤组织培养

探讨了何首乌组织培养的快繁技术,为优良品种的快速繁殖并进一步提取、开发有用次生代谢物奠定基础.本文采用何首乌的块根为原料,以MS(Murashige and Skoog)培养基为基本培养基,附加不同的植物生长调节剂,筛选何首乌愈伤组织生长的最佳条件和激素组合.结果表明:不同消毒剂及其组合对何首乌块根进行消毒,70%的酒精 0.1%HgCl2具有很好的消毒作用;诱导何首乌块根产生愈伤组织的最佳激素配比是2,4-D 0.5 mg.L-1 IAA 3.0mg.L-1 6-BA 0.1mg.L-1,且这三种激素的作用主次为2,4-D>IAA>6-BA.     

黄芩生长与黄芩苷积累规律研究

试验研究了黄芩愈伤组织和栽培黄芩的生长特性和黄芩苷积累规律.研究表明,黄芩愈伤组织的生长和黄芩苷的积累并不同步,而是先生长后合成.栽培黄芩在6～7月和8～9月有两个生长高峰期,其中6～7月的黄芩地上部分增长量最为显著,增长了582%,在此期间主要进行初级代谢,在9～10月,根部的黄芩苷含量快速积累,其含量提高了76.4%,而茎叶中的黄芩苷含量均明显减小,分别减少了33.8%和21.5%,说明黄芩生长由初级代谢向次级代谢快速转化,这与在黄芩愈伤组织中的积累规律非常相似.     

不同产地黄芩中的黄芩苷提取转移率研究

采用同一提取方法对不同产地的黄芩中黄芩苷的提取转移率进行考察,并对结果进行分析,以研究不同产地黄芩药材中黄芩苷提取转移率,完善黄芩药材的质量标准.实验结果显示,不同产地的黄芩药材的有效成分转移率有显著差别,药材转移率是影响药材质量的一个重要参数.建议在黄芩药材质量标准中加入提取转移率这项指标作为药材主要质量指标之一.     

中药黄芩中4种黄酮类化合物的密度泛函理论研究

采用DFT B3LYP方法在6-311G(d)基组下优化计算了黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷和汉黄芩素,分别从自然电荷分布、酚羟基的解离焓及前线轨道等方面分析了它们的活性.结果表明;4个分子C5处酚羟基氢原子上的正电荷数都是最大的,所带正电荷顺序是:黄芩苷>黄芩素>汉黄芩素>汉黄芩苷;酚羟基的解离能分析得到抗氧化活性顺序与其相同;最高占据轨道和最低空轨道的能级差ΔE的顺序是:黄芩苷<汉黄芩苷<黄芩素<汉黄芩素.黄芩苷消除.OH自由基的过渡态计算得到的活化能是113.2kJ.mol-1,反应热为-1 053kJ.mol-1.各种计算数据都表明黄芩苷在这四种黄酮化合物中的活性最大,消除自由基的理论活性顺序与文献报道的顺序一致.     

影响宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的因素

对宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的影响因素进行分析,结果表明,宁夏枸杞根外植体的年龄及其生理状态能影响胚性愈伤组织的形成和体细胞胚发生;4℃低温处理两周能明显促进愈伤组织形成体细胞胚,同时也能增加愈伤组织内源多胺的含量;添加Ag+有利于愈伤组织的体细胞胚发生,适当增加Ca2+浓度也有利于愈伤组织的生长及其体细胞胚发生;Eu3+的添加能明显促进愈伤组织生长,而低浓度的Ce2+、Eu3+作用有利于愈伤组织体细胞胚发生.     

仙客来种苗球茎胚性愈伤的诱导及体胚的发生

为了建立仙客来稳定的快繁增殖体系,以仙客来种苗为试材,接种于含不同浓度激素组合的I／2MS培养基上,经过初培养和多次继代培养,诱导产生胚性愈伤,结果表明：球茎是较好的诱导胚性愈伤的材料,1／2MS＋6-BA0．2mg／L＋2,4-D2mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6．5g／L＋肌醇100mg／L＋酪蛋白100mg／L是较好的诱导配方,将胚性愈伤转接到不含激素的1／2MS基本培养基上,诱导产生大量球形胚和鱼雷胚,2—3周后正常成熟的体胚萌发,表明此研究可以为仙客来的快速繁殖提供技术参考．     

黄芩总黄酮的提取工艺研究

采用正交试验,以黄芩苷和总黄酮为指标,筛选水煎煮提取工艺,通过提取工艺研究,寻求黄芩总黄酮的最佳提取方法,提取方法的正交试验表明,水煎煮法中A 3B 2C 3D1为最佳提取工艺.获得最佳提取条件:药材粉碎成粗粉,煎煮三次,每次加12倍量水,提取1小时,趁热滤过,合并滤液.优选的工艺稳定可行.