辐射诱变愈伤组织选育耐寒型蕨菜

用γ射线对具有100%分化率的蕨菜愈伤组织进行辐射处理,将未致死的愈伤组织于1~2℃无光条件下处理20 d,再把未冻死的愈伤组织所分化的试管苗进行低温处理.将低温处理后的试管苗叶片、叶柄诱导的愈伤组织和分化的试管苗再进行低温选择,获得了耐寒蕨菜试管苗,由这种试管苗所形成的孢子苗仍然具有耐寒性.结果证明用剂量为5.16×10-1C.kg-1的γ射线对蕨菜的愈伤组织进行辐射处理,可选育出耐寒型蕨菜.     

东北红豆杉愈伤组织培养研究

以东北红豆杉幼茎为培养材料诱导出愈伤组织，并分析了不同的激素组合、糖浓度、培养条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明，NAA激素组合比2，4－D组合更有利于愈伤组织的诱导，在25℃、2％蔗糖、0．7％琼脂、每天光照12h条件下愈伤组织诱导率达100％。     

珙桐花药诱导愈伤组织的初步研究

采用濒危植物珙桐花药为外植体,研究了花序外形与小孢子发育时期的关系以及低温预处理、激素种类与浓度、蔗糖浓度等对诱导花药愈伤组织的影响并初步探讨了其诱导分化的可能性.结果表明:低温预处理对愈伤组织的形成影响不显著,随着低温时间的延长,愈伤组织诱导率逐渐降低;高浓度的蔗糖不利于愈伤组织的形成;愈伤继代后褐化严重未产生分化.在本实验中,诱导珙桐花药愈伤组织的最佳条件为:选用长度为1.7～2.2 cm的花序,4℃预处理2d,培养基为MS+2,4-D 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA31 mg/L+5％蔗糖,最高诱导率为91.3％.     

不同温度培养对根癌农杆菌生长及水稻幼胚再生的影响

设计26,30,34,36,38,40℃6个温度对根癌农杆菌进行培养.结果显示:根癌农杆菌在38℃和40℃条件下无法生长;将水稻幼胚经26℃诱导获得的愈伤组织分别放置在农杆茵不能耐受的38℃和40℃环境中培养.并设计了7,14,21,28d不同培养时间,同时以26℃常规培养温度作为对照,分析在较高温度条件下培养对水稻愈伤组织再生的影响.结果显示:水稻幼胚诱导的愈伤组织经过38℃所有时间及40℃部分时间(7,14d)下模拟抗性筛选培养,仍然能够正常生长,而且经38℃、14d继代培养的愈伤组织植株再生率比26℃常规培养提高63.17%,统计分析两者达显著差异.     

红砂愈伤组织耐低温和盐胁迫的适应性

对荒漠植物红砂愈伤组织分别在不同低温(0℃,4℃)和不同浓度NaCl处理下细胞的相对活性、质膜透性和脂质过氧化程度、抗氧化物质黄酮类质量分数以及抗氧化系统酶活性的变化进行研究.结果表明:低温0℃,4℃处理对红砂生理变化的影响差别不大.与室温相比,红砂愈伤组织在0℃,4℃低温胁迫的48 h内敏感性较高,细胞质膜透性增大,细胞活性有所降低,H_2O_2、丙二醛(MDA)和具有抗氧化能力的花色素苷质量分数升高,抗氧化系统酶过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性逐渐升高,但活性均低于对照材料的,而总黄酮质量分数以及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性的变化随处理时间变化不太明显.低温处理48 h后这些生理指标都趋于稳定.同时,不同浓度NaCl处理下发现红砂愈伤组织在50 mmol/L NaCl中生长最快,总黄酮质量分数随着盐浓度增加而升高.这些结果表明红砂愈伤组织具有很强的适应低温和盐胁迫的调控能力.     

东北红豆杉的愈伤组织诱导

提取并检测东北红豆杉茎和叶中紫杉醇的含量,茎和叶中均含有微量紫杉醇,茎中含量稍高一些。以茎和叶为外植体,MS为基础培养基,采用10种激素配比在黑暗条件下诱导愈伤组织。综合愈伤组织诱导率、愈伤组织生长状态和愈伤组织传代过程中的褐化情况,2,4-D 1.0 mg.L-1和6-BA1.0 mg.L-1为东北红豆杉茎愈伤诱导和传代的最佳激素配比。低温预处理外植体有利于减轻愈伤组织的褐化情况,但却降低了愈伤组织诱导率。在愈伤组织及培养基中未检测到紫杉醇。     

杜鹃红山茶花药愈伤组织的诱导

杜鹃红山茶花蕾经4℃低温预处理5～15 d后,用不同消毒剂进行表面消毒.以花药为外植体,MS为基本培养基,研究低温预处理下,花蕾表面消毒方法以及2,4-D与KT、NAA浓度组合对杜鹃红山茶花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:4℃低温预处理花蕾的最佳时间为5 d,花蕾的最佳消毒方法为75%乙醇浸洗30 s后,用0.1%升汞消毒10 min;诱导花药愈伤组织的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT和MS+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L NAA,于23～25℃暗培养30 d,愈伤组织诱导率分别达34.44%和35.33%.     

影响宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的因素

对宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的影响因素进行分析,结果表明,宁夏枸杞根外植体的年龄及其生理状态能影响胚性愈伤组织的形成和体细胞胚发生;4℃低温处理两周能明显促进愈伤组织形成体细胞胚,同时也能增加愈伤组织内源多胺的含量;添加Ag+有利于愈伤组织的体细胞胚发生,适当增加Ca2+浓度也有利于愈伤组织的生长及其体细胞胚发生;Eu3+的添加能明显促进愈伤组织生长,而低浓度的Ce2+、Eu3+作用有利于愈伤组织体细胞胚发生.     

不同色光、温度、pH对草珊瑚愈伤组织的培养效应

报道了草瑚珊愈伤组织生长和次生代谢物与光、温度、ｐＨ不同的物理因子培养条件的关系。结果表明，暗培养的愈伤组织生长和代谢物含量较高，而蓝光在草珊瑚愈伤组织培养中，表现了蓝光效应，诱导出一个优良的愈伤组织系，其相对增长率和总黄酮月产率分别为７５９％，１．８６８ｇ／Ｌ。最佳培养温度为２６℃恒温，最适愈伤组织生长的培养基ｐＨ值为５．５；而最适愈伤组织代谢次级产物的生产培养基ｐＨ值为６．０。     

香雪兰愈伤组织超低温保存的研究

对香雪兰愈伤组织超低温保存的几个因素进行了初步的讨论。实验结果表明：香雪兰愈伤组织的适宜冷冻年龄为１５－２０ｄ;较佳的冷冻程序是从０℃直接投入液氮的快速冷冻法;氯化三苯四氮唑在４℃化冻和４０℃水浴化冻时有着较高的光密度值。     

紫花苜蓿抗寒性突变体的筛选

首先由紫花苜蓿叶片诱导产生愈伤组织，然后用ＥＭＳ对愈伤组织进行处理，并进行低温筛选，获得抗寒性突变体，并用生理生化方法对愈伤组织突变体的抗寒性进行了鉴定．     

大蒜细胞培养及超氧化物歧化酶产生的研究

经8℃低温下贮藏一个月的大蒜,在添加0. 1mg/1KT 和2mg/12,4-D 的 MS 培养基中培养,产生大量的愈伤组织,间隔20天继代培养,愈伤组织能够脱分化地持续增殖。培养中,随愈伤组织的增长,细胞内超氧化物歧化酶含量亦随之提高。培养15天,比活达到33. 7U/mg 蛋白,比天然贮藏大蒜中的含量提高了56％。     

结缕草农杆菌介导转基因中辅助处理的效果

利用农杆菌介导法，研究了辐照、愈伤组织状态、共培养条件及负压等辅助处理对结缕草愈伤组织转化频率和存活率的影响。结果表明：2J／kg的辐照剂量有利于提高转化频率；1～2个月的愈伤组织适于转化；全光照的共培养条件下转化频率高于16h光照培养和8h暗培养条件下的转化频率；农杆菌与愈伤组织混合培养时给予适当的负压条件可提高愈伤组织转化频率和存活率。     

剑麻组织培养诱导产蛋白酶研究

以剑麻株芽或幼叶为外植体,研究了不同培养基、不同培养温度和光照条件下,剑麻愈伤组织的诱导和生长特性．结果证明,Ｎ６培养基诱导剑麻愈伤组织启动最快;ＭＳ、ＬＳ培养基无论对愈伤组织的诱导还是继代培养都具有良好的效果;Ｂ５培养基不适于剑麻组织培养．剑麻愈伤组织诱导和生长最适宜的温度为（２５±２）℃、光照为１２ｈ．剑麻愈伤组织细胞可诱导产生蛋白酶．     

不同理化因子对黄花乌头花药愈伤组织诱导的影响

目的：通过不同理化因子对黄花乌头花药愈伤组织诱导研究，为国家一类新药关附甲素的工业化生产提供新的原料来源．方法：以黄花乌头花药为外植体，考察不同植物激素及其配比、不同种类的培养基、碳源、NH4^ 与NO3^-比例、天然添加物及低温处理对花药愈伤组织诱导的影响．结果：2，4—D 2mg/L，KT 0．2mg／L为最佳激素配比；MS培养基诱导愈伤组织效果最好;以蔗糖为碳源，ρ(NH4^ )/ρ(NO3^-)为4：1时有利于愈伤组织的诱导；分别以0．03mmol/L的组氨酸、赖氨酸、色氨酸、谷氨酰胺代替MS培养基中的甘氨酸有利于愈伤组织的诱导，而丝氨酸对其有抑制作用；水解酪蛋白能提高愈伤组织诱导率；低温(4—10℃)处理48—120h能促进愈伤组织生成．结论：植物细胞工程技术是解决黄花乌头原料匮乏问题的可行方法之一．     

平贝母的愈伤组织的培养和器官再生

我们用组织培养的方法,诱导平贝母的不同器官,形成了愈伤组织,鳞茎和植株,为促进平贝母的繁殖速度创造了条件,经过对愈伤组织的初步测定,证实有生物碱反应,而当年新鳞茎低温处理(3-7℃)后进行的组织培养,使进行“二季作”成为可能,同时也为用组织培养的方法进行贝母生物碱的工业化生产提供了重要条件。本试验共分为两个阶段进行的。第一阶段:80年7月18日至81年2月,主要进行鳞片切块培养试验,具体又分为低温(3-7℃,65-70天)及未经低温处理(即收获后     

紫花苜蓿抗赛性突变体的筛选

首先由紫花苜蓿叶片诱导产生愈伤组织，然后用ＥＭＳ对愈伤组织进行了处理，并进行了低温筛选，获得抗寒性突为体。并用生理生化方法对愈伤组织突变体的抗寒性进行了鉴定。     

青大1号紫花苜蓿愈伤组织的诱导

为了探讨青大1号紫花苜蓿愈伤组织的最佳诱导条件,本文以MS培养基为基本培养基,分别选用青大1号紫花苜蓿的种子、无菌苗的叶片、根为外植体,通过改变MS培养基中生长素(2,4-D)和细胞分裂素(6-BA)的配比以及光照条件,研究影响紫花苜蓿愈伤组织形成的条件因素。结果表明:在25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,选用种子为外植体,在添加40μmol/L 2,4-D和15μmol/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织诱导率为92.5%;选用叶片为外植体,在添加45μmol/L 2,4-D和10μmol/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织的诱导率为45%;选用根为外植体,在添加10μmol/L2,4-D和2.5μmol/L6-BA的MS培养基上愈伤组织的诱导率为40%;全日照或者全黑暗都不利于紫花苜蓿愈伤组织的诱导。继代培养发现,25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,10μmol/L 2,4-D的MS培养基上最适宜紫花苜蓿的愈伤组织继代生长。青大1号紫花苜蓿愈伤组织形成的最佳组合为:选用种子为外植体,25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,添加40μmol/L 2,4-D和15μmol/L 6-BA的MS培养基进行诱导,10μmol/L 2,4-D的MS培养基进行继代生长。     

玻璃化法优化保存川贝母组织培养物研究

为筛选出川贝母组织培养物中最适于用玻璃化法进行超低温保存的材料及其最适的玻璃化溶液脱水处理时间,将继代15 d的优质川贝母芽、愈伤组织和鳞茎接入MS+30 g/L蔗糖+5%二甲基亚砜的固体培养基中预培养6 d后,用60%玻璃化溶液II常温装载25 min,再于2℃下用100%玻璃化溶液II分别进行不同时间的脱水处理后投入液氮中保存.结果显示,在玻璃化超低温保存过程中,川贝母芽、愈伤组织和鳞茎的最佳脱水处理时间均为60 min,其中愈伤组织细胞保存后的相对存活率最高为80.08%.     

低温驯化对西藏绵头雪莲愈伤组织抗冻性及抗氧化能力的影响

【目的】研究高山植物对低温驯化的生理生化适应机制。【方法】以西藏绵头雪莲愈伤组织为材料,检测在变温[4 ℃/0 ℃(白天/夜晚,黑暗)]的低温驯化0、3、6、9、12 d过程中抗冻性、抗氧化酶和抗氧化物质含量的变化。【结果】经变温[4 ℃/0 ℃(白天/夜晚)]低温驯化后第9天西藏绵头雪莲抗冻性达到最高值,愈伤组织半致死温度(LT₅₀)由常温培养-3.5 ℃降低到 -12.0 ℃;经4 ℃/0 ℃低温驯化后,愈伤组织的可溶性蛋白质和脯氨酸含量以及抗氧化酶活性显著提高,至第9天达最大值,蛋白质比对照增加了89.1%、脯氨酸含量为驯化前的2.14倍,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)的活性分别比对照增加了48.04%、47.28%和73.18%,同时3种抗氧化酶的同工酶酶谱也验证了以上活性检测结果;低温驯化还提高了多酚含量,驯化至第12天时多酚含量为驯化前的3.91倍,此时多酚氧化酶(PPO)活性比驯化前增加了91.35%,与PPO同工酶的检测结果较为一致。【结论】低温驯化显著提高了高山植物绵头雪莲愈伤组织的抗寒力,在低温驯化过程中绵头雪莲发生了特有的适应低温环境的生理生化变化。