小型猪2 型糖尿病模型研究进展

摘要: 小型猪在生理学、解剖组织学、饮食结构和营养代谢等方面与人高度相似,已成为人类疾病模型研究的关注热点。本文在简要介绍2 型糖尿病发生机制和啮齿类动物模型的局限后,重点阐述了高脂高能量饮食和药物诱导小型猪2 型糖尿病模型的特点,及基因工程小型猪模型的研究进展和存在不足,并对小型猪2 型糖尿病模型的发展进行了展望。     

小型猪采血技术

目的在应用小型猪的实验研究中,经常需要采集血液用以进行各种指标的检测。在对五指山小型猪、广西巴马小型猪和中国农大小型猪的长期实验过程中,我们摸索总结出一些采血经验:在小型猪清醒状态下,借助保定吊床,可以比较方便地从耳静脉、后肢外侧隐静脉采集血液;在牢固保定或麻醉状态下,可以从前腔静脉采集血液;也可以通过手术在颈内静脉留置导管进行反复采血。     

小型猪保定吊床的设计与使用

由于在解剖学、生理学、疾病发生机理等方面与人相似,小型猪是人类医学研究的理想模型动物已成为广泛共识,然而,由于小型猪在实验操作中不配合,成为限制其广泛应用的因素之一。本实验室参照Panepinto的方法,设计了小型猪保定吊床,成功地完成了小型猪清醒状态下的采血、给药、静脉糖耐量试验、心电图测定等实验操作,本文介绍保定吊床的设计及使用方法。     

三个品系小型猪静脉糖耐量试验及相关血清生化指标的比较

目的比较三个品系小型猪静脉葡萄糖耐量及血糖相关指标的差异。方法实验用4月龄广西巴马小型猪和贵州小型猪,5月龄五指山猪,在相同饲养条件下进行实验。静脉注射50%葡萄糖进行静脉葡萄糖耐量试验;常规生化方法检测血清血糖;化学发光法检测血清胰岛素;放免法测定HbAlc。结果静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)中,注糖后10 min血糖达到峰值,贵州小型猪和广西巴马小型猪分别在60 min和90 min时恢复至实验前血糖值。五指山猪在120 min时恢复至注糖前水平,而且在30~90 min各时间点的血糖值高于广西巴马小型猪和贵州小型猪(P<0.05)。三组动物中,贵州小型猪HbA1c含量较高(P>0.05),五指山猪胰岛素水平较低(P<0.01)。三个品系小型猪的空腹血糖和胰岛素敏感指数差异不显著(P>0.05)。结论在IVGTT实验中,三个品系小型猪的血糖下降趋势基本一致,五指山猪有一定特殊性;相关血清生化指标测定值接近。     

比较烫伤和烧伤致小型猪皮肤深二度损伤的异同

目的研究五指山小型猪的深二度皮肤损伤模型的制备方法,并比较烫伤和烧伤两种不同途径所致五指山小型猪的深二度皮肤损伤存在的差异。方法使用烫伤仪于92℃下,持续接触12 s在五指山小型猪皮肤上烫伤8个创面,同时使用含有无水乙醇的4 cm×5 cm纱布贴敷在去毛位置,点火燃烧18 s,烧伤8个创面,计算创面愈合率并进行病理检测,比较两种造模方法对深二度皮肤烧伤的异同。结果观察烧烫伤部位在临床观察、愈合率和病理检查方面的动态变化过程。结论实验结果表明烫伤法和烧伤法均可在五指山小型猪皮肤上制备深二度烧烫伤动物模型。     

三个品系小型猪Ⅱ型糖尿病模型的比较研究

目的比较三个品系小型猪对高糖高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病模型的敏感性,为我国小型猪在Ⅱ型糖尿病研究中的应用提供基础资料。方法4~5月龄巴马小型猪、五指山小型猪和中国农大小型猪各6头,以4头中国农大小型猪为对照,同步开展高糖高脂饲料喂养试验,试验周期8个月。每月称1次体重,测定血糖、血清胰岛素含量,每2个月进行1次静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT),测定脂质代谢相关指标。结果巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料比较敏感,在饲喂5~6个月后,开始出现糖代谢异常,表现为显著肥胖、血清胰岛素升高和胰岛素敏感性下降。至实验后8个月,巴马小型猪和五指山小型猪各有1头发展为糖尿病,分别有3头和2头出现糖尿病前期症状。中国农大小型猪对高糖高脂饲料诱发糖尿病相对不敏感,实验期间空腹血糖水平、血清胰岛素含量、胰岛素敏感指数和IVGTT一直无显著变化,仅在实验后7个月开始表现肥胖,8个月出现胰岛素敏感性减低。三个品系小型猪在高糖高脂饲喂后,血脂相关指标(TG,CHO,HDL-C,LDL-C)普遍升高,以巴马小型猪升高幅度最大。结论巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病比较敏感,品系内个体差异较大。中国农大小型猪相对不敏感。这一结果为进一步的Ⅱ型糖尿病相关基因分析和高敏感家系培育研究提供了基础资料。     

三个品系实验用小型猪部分血液生化指标比较

目的检测广西巴马小型猪、五指山小型猪和中国农大小型猪三个品系实验用小型猪的血液生化指标并进行比较。方法选用4月龄广西巴马小型猪和中国农大小型猪,5月龄五指山小型猪,用日立-7600型自动生化分析仪检测三个品系小型猪的血液生化指标,对同一品系雌、雄小型猪的测定值及对3个品系小型猪的13项指标进行组间比较。结果三个品系小型猪的血液生化测定值比较接近。在13项检测指标中,广西巴马小型猪的ALT、BUN低于其他两个品系(P<0.05),五指山小型猪的TG高于而ALP低于其他两个品系(P<0.01)。雌雄小型猪之间除广西巴马小型猪的BUN差异有显著性(P<0.05)外,其余各项指标雌雄间差异不显著(P>0.05)。结论同一品系小型猪的大部分血液生化测定值不受性别影响;3个品系小型猪的血液生化测定值接近。     

全国首次小型猪实验动物化与开发利用研讨会在北京召开

早在 19世纪 ,科学家就发现猪在解剖、生理和代谢等方面与人类十分接近 ,是极为理想的实验动物 ,因而 ,猪的实验动物化工作一直受到国际科学界的普遍重视。特别是近年来 ,猪作为人类器官移植的供体研究成为学术界关注的焦点。但由于实验动物化的工作一直未能突破近交系的瓶颈 ,致使相关领域的研究受阻。我国小型猪资源得天独厚 ,早在七十年代 ,我国科学工作者就开始了小型猪近交系的选育工作 ,科学工作者对小型猪资源的开发利用研究也给予了高度重视。目前 ,云南的西双版纳小耳猪、中国农业科学院培育的五指山小型猪、广西的广西巴马小型猪…     

我国实验用小型猪的应用研究前景

我国小型猪在分类学上与普通家猪相同 ,但其在体型、体重、器官、组织等方面与普通家猪存在差异。由于小型猪的解剖及生理结构与人类极为相似 ,因此它已逐渐成为研究人类疾病的实验动物。现就我国小型猪的生物学特性、应用研究概况、研究特点及将来发展方向作一概述。     

2型糖尿病易感小型猪遗传选育研究进展(一)

由于小型猪代谢机制与人类十分相似,使其成为糖尿病研究的理想动物模型。然而在作为家畜的长期选育过程中,小型猪获得了抵抗致糖尿病因素的特性。本实验室经过对245头成年巴马小型猪的空腹血糖筛选,获得了一头孕期高血糖的个体,这头猪生产了11头后代(存活10头),我们以这10头小型猪为基础,以高糖高脂饲料诱导过程的表现性状作为选育条件,经过2世代的选育,小型猪的糖尿病易感性从诱导7个月发病,进展为6个月发病。因此,推测有希望获得一个糖尿病易感的小型猪新品系。