植物4CL基因家族结构功能与表达特性研究进展

4-香豆酸：辅酶A连接酶（4CL）是植物苯丙烷衍生物,如类黄酮和木质素等,生物合成途径的一种关键酶,在大多数维管植物中4CL基因以基因家族的形式出现.4CL基因家族成员在植物组织中存在差异表达,并参与不同的苯丙烷类衍生物的生物合成.从4CL酶的基因结构、基因家族组成与表达特性等方面详细论述了当前最新研究进展,这将有助于更好地理解植物4CL基因参与苯丙烷类衍生物途径的合成与代谢机制.     

重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶催化不同肉桂酸衍生物的酶促动力学研究

4-香豆酸:辅酶A连接酶是杨树木质素合成途径的关键酶之一,催化维管植物木质素合成羟基肉桂酸及其衍生物辅酶A酯化合物的形成.对毛白杨的重组Pt4CL1蛋白的不同肉桂酸衍生物底物的酶促动力学进行了分析,Pt4CL1对肉桂酸、4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸具有催化活性,其中的4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸,Km(μM)值分别为55.02±3.5、52.94±6、44.62±4,Vmax(nM.S-1)值分别为4.23±0.27、4.12±0.11、2.16±0.07;4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kcat(S-1)值分别为44.73×10-3、43.57×10-3、7.61×10-3;对4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kenz(M-1.S-1)值分别为823、812.98、170.55.Pt4CL1对肉桂酸的催化能力很弱,而对芥子酸没有催化活性.结果表明,Pt4CL1对4-香豆酸的催化效率最高,对咖啡酸的催化效率略低于4-香豆酸,而对阿魏酸的催化效率最低,对咖啡酸的催化效率略有很高的转化效率.     

GRP1.8融合4CL1基因调控杨树木质素生物合成

将形成层定位启动子GRP1.8与毛白杨的4-香豆酸:辅酶A连接酶基因融合,叶盘法转化毛白杨741,southern杂交检测表明融合基因已经整合到转基因杨树的基因组中.通过实时定量PCR技术测定mRNA的表达量,GC-MS分析4CL底物香豆酸的含量和定量硫酸木质素含量,分析了4CL基因的过量表达对转基因杨树生理生长的影响.实验结果表明,整合了正义4CL1的转基因植株在茎中的酶活性比野生植株增加了30%,木质素含量增加了40%.     

植物脂酰-CoA合成酶基因家族研究进展

脂酰-CoA合成酶在植物的脂肪酸代谢中有非常重要的作用. 本文对长链脂酰-CoA合成酶(LACS)与一种新的脂酰-CoA合成酶(ACOS)的基因功能、酶学特性和基因家族表达调控的研究进展进行了综述.     

高效液相色谱仪测定2-氰基-4-硝基苯胺

介绍了一种全新的用高效液相色谱仪测定2-氰基-4-硝基苯胺的方法，克服了现有国家行业标准中同分异构体对检测结果准确度的影响，具有十分重要的意义.     

茉莉酸甲酯对烟草幼苗抗病毒相关酶活性的影响

研究茉莉酸甲酯对烟草幼苗抗病毒相关酶活性的影响．以茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MJ）处理或接种烟草花叶病毒的广黄55和K326烟草幼苗为材料,测定一些抗病毒相关酶活性．发现MJ处理提高广黄55幼苗的几丁内切酶、几丁外切酶、超氧物歧化酶（SOD）和脂氧酶活性,降低β1,3-葡聚糖苷酶活性;MJ处理后接种烟草花叶病毒,K326幼苗的β1,3-葡聚糖苷酶和SOD活性都降低．上述结果表明,MJ诱导K326抗花叶病毒的机制可能不同于巴西烟草。     

非酶棕色化反应在烟草增香中的应用研究

文章研究了以天然大豆粉水解液提供氨基酸与葡萄糖或其它羰基化物之间的非酶棕色化反应在烟草增香中的作用，并与己酸和葡萄糖反应的棕色化产物进行对比，认为大豆粉水解液的棕色化产物对烟草增香效果更佳，对烟草薄片的改进作用更为显著。     

杨树木质部特异性定位表达4CL1启动子的结构与表达特性

4-香豆素COA连接酶(4CL1)是木质素代谢途径中的一个关键酶,对该基因启动子的表达特性与调控元件进行了研究:首先,对毛白杨4CL1启动子进行了生物信息学分析,结果表明该启动子包括3个顺式作用元件,box P(CCTTCACCAACCCCC),box A(CCGTTC),box L(TCTCACCAACC),这3个顺式作用元件在已知的木质素代谢途径相关酶系如苯丙氨合成酶(PAI)和4CL中普遍存在;其次,运用PCR方法对该启动子进行了剪切,获得一个长393 bp的启动子片断,该启动子片断包括以上3个顺式作用元件;最后,将该启动子片段与GUS报告基因构建了植物表达载体并转化烟草,成功获得转基因再生苗,结果发现转基因烟草的茎木质部呈现GUS染色阳性.研究结果表明,一个393 bp长度的4CL1启动子片断足以介导外源基因在木质部特异性定位表达.     

对香豆酸抑制肺癌细胞增殖、迁移并诱导其凋亡的机制研究

探究了对香豆酸（p-coumaric acid,p-CA）对人肺癌细胞细胞A549和H1299增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制.结果显示,添加0～10 mM p-CA能显著抑制两种肺癌细胞的生长和迁移,并呈剂量和时间依赖性（P<0.001）. p-CA显著抑制了细胞周期发生,并将细胞周期阻滞在G1期,且细胞凋亡发生明显增加（P<0.05）. p-CA显著抑制了CDK2、CDK6、Cyclin D1等周期正调控因子表达,并诱导细胞周期负调控因子p21、p27等基因的表达上调;与此同时,p-CA还诱导了促凋亡因子Bax表达上升和抗凋亡因子Bcl-2表达水平的降低且caspase-3和caspase-9的表达上调,而对迁移相关基因表达的检测结果也显示p-CA抑制了β-连环蛋白（β-catenin）的表达并促进钙粘附蛋白E(E-cadherin)表达上升.上述结果表明,p-CA具有抑制肺癌细胞生长、诱导凋亡并抑制其迁移的作用,它主要是通过促进Bax、caspase-3、caspase-9、p21、p27、E-cadherin等蛋白的表达而抑制Bcl-2、Cyclin D1、β-ca...     

2，4-D对玉米根氧化还原活性的影响及其与根生长和酶活性等的关系

将5mm长的玉米根尖与不同浓度的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)一起保温,在加10^-15mol／L至10^9mol/L浓度范围内,根尖对铁氰化钾的还原活性随2,4-D浓度升高而增加;当2,4-D浓度超过10^8mol／L时,还原活性受到抑制,根尖的生长与铁氰化钾还原速率具有很好的相关性,葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)脱氢酶活性与铁氰化钾的还原和细胞内NADPH2心水平相平行,ATP酶活性也与上述变化相一致,在低浓度的2,4-D处理下,介质pH下降,高浓度的2,4-D则使介质碱化,上述结果表明2,4-D对玉米垠氧化还原活性和生长速率有显著影响．它的作用是通过活化质子分泌和它对代谢途径的调节实现的。     

盐度影响真鲷幼鱼消化酶活力的研究

报告了海水盐度对真鲷幼鱼消化酶活性的影响．４１日龄的真鲷幼鱼的蛋白酶、α－淀粉酶和脂肪酶的比活力均在盐度２５时达最高值,随着盐度的上升或下降,消化酶的比活力下降．从３种酶的相对比活力来看,盐度对消化酶的活性影响较大,其中对脂肪酶的活性影响更大．这对于真鲷的人工育苗和养殖有参考价值．     

高效液相色谱法研究对羟基苯丙酮酸烯醇-酮式互变异构动力学

采用高效液相色谱-紫外检测法测定了对羟基苯丙酮酸烯醇-酮式互变异构动力学.结果表明,在以甲醇与13 mmol/L NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液(pH为5.91)(体积比为10∶90)为流动相,流速0.8 mL/min时,对羟基苯丙酮酸烯醇式和酮式在10 min内得以完全分离.根据酮式结构的含量测定工作曲线的线性范围为1.0×10-5～1.0×10-3mol/L,相关系数R2＝0.998 8,峰高和保留时间的相对标准偏差为3.4%和0.6%.对羟基苯丙酮酸互变异构符合一级反应动力学,测得其在20 ℃下的速率常数为k=0.005 min-1,半衰期为t1/2=138.6 min.     

cDNA cloning and functional analysis of 4-coumarate --CoA: ligase (4CL) gene in Chinese white aspen

cDNA encoding 4-coumarate: CoA ligase (4CL) was isolated from the secondary developing xylem of Chinese white aspen (Populus tomentosa) by RT-PCR for the first time, which was 1619 bp in length. The coding sequence and putative amino acid sequence showed 97.53% and 97.00% identity to that of Pt4CL1 in quaking aspen (P. tremuloids), respectively. Molecular analysis indicated that 4CL was encoded by multiple genes in P.tomentosa, its mRNA was highly accumulated in xylem and the expression of 4CL revealed a biphasic pattern in one growing season, almost in phase with the expression of other related enzymes in lignin biosynthesis. Transgenic research showed that expression of antisense 4CL cDNA led to the decreasing of lignin content in transgenic tobaccos, among which the average reduction was 10.3% and the highest could be up to 18.9%. These data suggested that 4CL gene was a potential gene used in altering lignin biosynthesis by biotechnology for producing new materials of papermaking.     

Obtaining the transgenic poplars with low lignin content through down-regulation of 4CL

The antisense 4CL (4-coumarate: CoA ligase)gene was transformed into triploid Chinese white poplar(Populus tomentosa) mediated by Agrobacterium tumefaciens.PCR and Southern blot analysis indicated that antisense 4CLgene had been integrated into the genome of the transgenicChinese white poplars. The antisense gene had also beenexpressed, which was indicated by RT-PCR and Westernanalysis. Klason lignin content assay showed that repressionof 4CL expression could result in remarkable reduction oflignin content in transgenic poplars, with most reduction of 41.73% compared with that of wild type in this paper. Butthere is no significant difference in holocellulose content be-tween trans- genic and wild poplars. We considered that 4CLmight not be the metabolism control point between ligninand carbohy- drate biosynthesis. The stems of transgenicpoplars displayed red-brown color with different levels afterthe bark was peeled, while those of untransformed plantswere white. No visible differences in growth and developmentwere observed between transgenic and wild plants. Wiesnerreaction analysis of the transgenic plant stems with reducedlignin content exhibited red color, while that of untrans-formed plant was typically purple-red.     

镍-磷纳米非晶合金催化剂晶化过程及其C2H4+H2活性

利用化学还原法制备了Ni893P10．7非晶态纳米合金催化剂，用电感藕合等离子体光谱法(ICP)、分析电子显微镜(TEM)、X-射线粉末衍射法(XRD)、BET表面积测试及X-光电子能谱(XPS)等手段对新鲜样品及经过热处理后的样品进行表征，并用微型催化反应装置评价其C2H4 H2催化活性，结果表明，非晶态Ni-P纳米合金具有比其晶态更高的催化活性。     

利用扣式电池模块评估磷酸铁锂材料循环效果

利用实验室用扣式电池模块对磷酸铁锂正极材料的循环性能进行评估,发现采用全密封结构的扣式电池模块,可以较好地评价磷酸铁锂正极材料的循环性能.主要的控制因素是拧紧力、密封性和隔膜的隔离效果.当几个因素达到优化配合时,可以使磷酸铁锂材料的循环性能达到最佳.实验表明,利用扣式锂电池模块可以进行超过500次的循环测试,且电池制造的成功率和测量一致性大大提高,可以替代全电池评价材料的循环性.     

饮用水中2,4,6-三硝基甲苯测定：以EPA固相萃取气相色谱法为例

介绍了用EPA固相萃取—气相色谱法测定饮用水中2,4,6-三硝基甲苯的方法,本方法用带C18萃取膜的固相萃取仪处理样品,然后用带FID检测器的VARIAN CP-3800气相色谱仪测定,操作简便、萃取时间短、溶剂用量少、回收率较好,从而减少了对环境的污染和对人员的伤害。     

用路由软件组建BGP4+协议一致性测试平台

IPV 6协议是下一代互联网协议.BGP 4 协议是支持IPV 6的多协议扩展的外部网关路由选择协议.简要介绍了BGP 4 协议和路由软件Zebra.对BGP 4 协议一致性测试平台的结构进行讨论,给出了一个用路由软件Zebra组建支持IPV 6的BGP 4 协议一致性测试平台的例子.