黄连木叶片基因组DNA提取方法

黄连木叶片中酚类化合物、色素、多糖和其它次生代谢物质含量较高,这给黄连木基因组DNA提取带来困难。为了从黄连木叶片中提取高质量基因组DNA,本文运用CTAB法和改良CTAB法提取黄连木基因组DNA,通过定性、定量及PCR分析检测所提取DNA的质量。结果表明:改良CTAB法提取的DNA电泳条带清晰无RNA等污染,OD260和OD280比值在1.8左右,RAPD扩增条带清晰、无弥散现象、亮度均一。说明改良CTAB法提取的DNA纯度较高,适用于PCR扩增反应。     

一种适用于地衣总DNA提取的改进方法

目的:针对地衣初生、次生代谢产物丰富的特点,提出了一种适于地衣总DNA的提取方法。方法:应用改良的CTAB法,对3种常见地衣进行了总DNA提取,经过琼脂糖电泳、紫外吸收分析DNA质量。结果:3个样本DNA的A260/A280值均在1.8～2.0之间,琼脂糖电泳图像清晰。结论:改良的CTAB法简便、省时、价廉,适合于地衣总DNA的提取,获得的DNA含量高,纯度好。     

3种提取淡水涡虫基因组DNA方法比较

分别用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的酚-氯仿抽提法提取活体涡虫和95%酒精固定的涡虫标本的基因组DNA.结果显示:试剂盒法提取的基因组DNA质量最好,主要表现在分子完整,几乎无降解,并且该方法所得DNA的产率也比另外两种方法的产率要高,试剂盒法是最适合涡虫基因组DNA制备的方法.相同起始物质量条件下,3种方法从活体涡虫中提取的DNA量和纯度均高于95%酒精固定的涡虫标本,但试剂盒法提取95%酒精固定半年以上的涡虫标本,所得DNA产率较高、质量较好,可满足PCR扩增等分子生物学实验的要求.     

远志属腊叶标本DNA提取方法研究

以远志属植物腊叶标本为例,研究如何从植物腊叶标本中提取到高质量的DNA。在改良CTAB法的基础上,对水浴时间、水浴温度、沉淀时间进行优化。结果表明,降低水浴温度为45℃,延长水浴时间为5-6h,延长沉淀时间为1-2h,可以从远志属腊叶标本中提取到用于PCR反应的DNA。     

从针叶树营养体组织中提取高纯度DNA的方法

ＤＮＡ提取质量是影响ＤＮＡ分析实验结果的关键因素之一,保持不同样本间ＤＮＡ质量的一致性对实验结果的可靠性至关重要,这要求在材料选择和提取方法两个方面都要加以考虑。介绍了从针叶树营养体组织中提取高纯度ＤＮＡ的方法,提取的关键是选择合适的材料,不同于通常采用针叶进行ＤＮＡ提取,本实验选用尚未木质化的针叶树嫩梢进行ＤＮＡ提取,可以在较为简单的实验条件和实验程序下提取高质量ＤＮＡ。按照作者提供的提取方法,     

葡萄DNA提取与纯化方法的比较研究

以巨峰葡萄叶片为试材,在ＣＴＡＢ法,ＳＤＳ法及高盐低ｐＨ法基础上加以改进,应用５种方法对葡萄ＤＮＡ提取,纯化方法进行了比较研究。结果表明,高盐低ｐＨ法和区室化提取法是２种适合于葡萄属植物ＤＮＡ提取的方法。     

CTAB法提取动物DNA

针对实际操作中常用的动物基因组DNA提取方法所面临的一些不足,对CTAB法进行改进,将其运用于动物基因组DNA的提取。结果表明,改进后的CTAB法具有时间短、质量高、成本低的优点,与实验教学中植物DNA和RNA提取的方法相一致,使分子生物学教学用品一体化,价格低廉化,效果改进,是一个不仅可以用于研究,也可以大规模用于实验教学的好方法。     

冬青卫矛胚珠和雌配子体的发育

 用石蜡切片的方法研究了冬青卫矛(Euonymus japonicus Thunb.)的大孢子发生和雌配子体的发育过程,得到以下结果:①胚珠发生为厚珠心类型,珠心表皮细胞平周分裂产生多层珠心周缘细胞,胚珠有直生与倒生胚珠2种类型,具双珠被,珠孔在成熟胚囊时期为内外珠被共同形成;②胚珠内孢原细胞为单细胞,并直接分化为大孢子母细胞,大孢子发生时,珠孔端一个细胞不分裂,合点端的一个细胞正常分裂,大孢子发育三分体,为直线型排列.③胚囊发育为蓼型,胚囊成熟后为7细胞8核胚囊,胚囊合点端有承珠盘.开花前,两极核融合为一个次生核,反足细胞退化较晚.     

剑叶龙血树叶DNA三种不同提取方法的比较分析

采用CTAB法、改良SDS法、高盐低pH法提取了剑叶龙血树叶DNA,并通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测了不同方法的提取效果.结果表明：CTAB法所提取的DNA浓度与纯度均高于其它2种方法,泳带分布集中,无拖尾现象,A260/A280=1.81,DNA浓度为735 ng/μL,能满足RAPD、SSR/ISSR扩增的要求,是提取龙血树叶片DNA的最佳方法.     

苔藓植物DNA不同提取方法的比较分析

以苔藓植物为材料,比较快速提取法、SDS法和改良CTAB法(自行设计)提取苔藓植物总DNA的效果.结果表明:改良CTAB法提取的基因组DNA质量最好(A260/A280为1.83～1.86;A260/A230为2.05～2.50),快速提取法次之(A260/A280为1.64～1.73;A260/A230为1.68～1.77),SDS法较差(A260/A280为1.51～1.61;A260/A230为1.56～1.76).改良CTAB法提取的苔藓植物的DNA适合于作为PCR的模板,并成功地进行了RAPD扩增.     

超声处理对大叶黄杨叶片表面气孔结构的影响

通过扫描电镜观察,测量并计算气孔的纵、横径,首次采用外径长宽比与内径长宽比作为气 孔开度指标,研究了超声处理对大叶黄杨叶片下表皮气孔开度变化的影响.LSD分析表明:对照组 和超声处理组有显著性差异.     

鬼箭羽药材的薄层色谱鉴别

对鬼箭羽的各主要成分进行了定性研究。采用现代薄层色谱(TLC)技术对鬼箭羽中何帕22(29)-烯-3β-醇、β-谷甾醇、羽扇豆酮、白桦酯醇、齐墩果酸、雷公藤内酯甲进行了色谱鉴别,结果表明,用TCL技术鉴别鬼箭羽,方法的专属性强,重现性好,操作简便,完全可以作为鬼箭羽药材的质量控制标准。     

忍冬叶化学成分的研究进展

忍冬叶为金银花采摘后的副产物,产量约为花的10倍,且具有较强的药理活性。本文对忍冬叶中挥发油类、有机酸类、黄酮类以及环烯醚萜苷类等化学成分进行综述,发现忍冬叶中的化学成分与金银花相似,在目前药材市场上金银花价格居高不下的情况下,可以考虑作为金银花的替代品。目前对忍冬叶的研究热点主要集中在含量测定、成分分离及提取物药理研究方面,今后应开展对忍冬叶系统的化学分离及基于活性导向的活性部位研究,同时与列入药典的金银花和忍冬藤进行同类药理活性的比较研究。     

五种提取草珊瑚叶片总DNA方法的比较研究

运用五种方法提取草珊瑚叶片总DNA。结果证明,加入PVP（聚乙烯吡咯烷酮）的改良CTAB法可以有效地提取产量高、质量高的草珊瑚叶片的总DNA。为草珊瑚及其它草珊瑚属植物的起源、分类、亲缘关系分析及品种特征图谱的建立提供可借鉴的依据。     

不同叶面营养对忍冬花期的影响

为了对忍冬的花期进行人为干预,确保金银花的产量和品质,通过花前叶面喷施尿素、磷酸二氢钾和硼砂溶液,研究其对忍冬花期的影响。结果表明,与对照组相比,磷酸二氢钾溶液处理的忍冬植株花期均延长,且低浓度的磷酸二氢钾溶液处理使始花期推后。就尿素溶液处理组来说,随着施用浓度的提高,花期会缩短,在花发育过程中植株C/N下降;3 ~6 mg/mL的磷酸二氢钾溶液有助于忍冬可溶性糖的积累,C/N随着花的发育而升高,花期较长;低浓度硼砂溶液（低于2 mg/mL）可将初始花期推迟至四月底,当浓度为3 mg/mL时,花期则提前,但总体花期时间延长。喷施3 ~6 mg/mL浓度的磷酸二氢钾溶液以及1 ~ 3 mg/mL的硼砂溶液有利于延长忍冬花期。     

山药基因组DNA的提取和RAPD反应条件的优化

研究了山药基因组DNA的提取方法;对Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶用量进行了优化,建立了最佳的RAPD反应体系:在25μL反应体系中Mg2+浓度为2.0 mmol.L-1,dNTPs浓度为0.25 mmol.L-1,引物浓度为20 pmol.L-1,Taq酶1.5 U,模板DNA为200 ng.扩增程序为:95℃预变性7 min;94℃变性30 s,36℃退火45 s,72℃延伸2 min,共35个循环;72℃终延伸10 min.     

忍冬叶环烯醚萜苷类化学成分研究

利用硅胶、Sephadex LH-20以及制备液相色谱等方法进行分离纯化,从忍冬叶中分离得到3个环烯醚萜苷类化合物,以及β-谷甾醇和胡萝卜苷。通过理化性质、波谱数据分析,分别鉴定为裂环马钱素酸、demethylsecologanol、裂环马钱素、β-谷甾醇和胡萝卜苷,其中化合物demethylsecologanol为首次从该属植物中分离得到。     

不同因子对“金丰一号”金银花生根的影响

研究了基本培养基,IBA,活性炭和蔗糖对“金丰一号”金银花生根的影响,结果表明:基本培养基为1/2 MS时,生根效果较佳;IBA 3 mg·L-1,时,试管苗生长较好,生根也快;从节约成本出发,蔗糖的浓度为15 g·L-1对生根较为有利.即适于生根的培养基为1/2 MS+IBA 3 mg·L-1+0.2 g·L-1活性...     

豫金银花指标成分的HPLC测定分析

采用高效液相色谱法测定豫金银花指标成分,分析密银花与封银花的差异及封银花不同部位的成分差异。结果表明,绿原酸含量:封丘红银花3.10%(对照)>封丘大毛花2.87%(p<0.05)>密县大毛花2.22%(p<0.01),木犀草苷含量:封丘红银花0.181%(对照)>封丘大毛花0.095%(p<0.05)>密县大毛花0.075%(p<0.05);封丘大毛花不同部位绿原酸含量:花蕾2.87%(对照)>叶0.84%(p<0.01)>芽尖0.67%(p<0.01)>枝0.61%(p<0.01),木犀草苷含量:芽尖0.488%(对照)>叶0.397%(p<0.01)>花蕾0.095%(p<0.01)>枝0.066%(p<0.01);封丘红银花不同部位绿原酸含量:花蕾3.10%(对照)>叶1.34%(p<0.01)>芽尖1.29%(p<0.01)>枝0.92%(p<0.01),木犀草苷含量:芽尖0.329%(对照)>叶0.299%(p<0.01)>花蕾0.181%(p<0.01)>枝0.063%(p<0.01)。豫金银花花蕾的指标性成分含量均高于药典规定的最低标准且质量较好,相较而言封银花的品质优于密银花,叶和芽尖可为金银花综合开发提供新原料。