人溶菌酶的双水相萃取法分离

采用双水相体系直接从重组巴氏毕赤酵母发酵上清液中分离人溶菌酶,研究了体系中聚乙二醇(PEG)平均分子量,PEG、硫酸钠和氯化钠浓度,pH对人溶菌酶和总蛋白的分配系数、相体积比、萃取率和纯化因子的影响。结果表明:在PEG 4000、N a2SO4和N aC l质量分数分别为0.08、0.13、0.06,pH为5.6时,在室温下的双水相萃取率达96.63%,纯化因子为6.5。     

改性聚苯乙烯微球对蛋白质的吸附与解吸特性

通过蒸馏–沉淀法制备单分散的聚苯乙烯(PS)微球,并用两亲性聚合物聚乙二醇(PEG)对PS进行修饰.以牛血清蛋白(BSA)为模型,研究PS-PEG微球对BSA的吸附与解吸特性.结果表明,聚合物微球对BSA的吸附受pH、微球上PEG含量以及NaCl溶液质量浓度的影响,作用力为疏水吸附.在无盐水体系下解吸,解吸率最高为96.2%,表明微球在蛋白质分离应用中可重复使用.     

用双水相体系分离血红蛋白(HB)

利用聚乙二醇(PEG)/硫酸铵双水相系统分离纯化盐析得到了血红蛋白(HB)样品,考察了PEG相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、pH、温度等因素对HB分离的影响。结果表明PEG双水相系统的最佳分离条件为:wPEG400=20%,w(NH4)2SO4=20%,pH=7,温度为30℃。在此条件下HB分配系数可达到65,回收率可以达到89.5%,纯度达到80.5%。     

双水相体系纯化天冬氨酸酶、纤维素酶和脂肪酶

用聚乙二醇(PEG)/磷酸钾双水相抽提技术分别从天冬氨酸粗酶、商品纤维素酶和脂肪酶中分离纯化出天冬氨酸酶(Aspartase)、纤维素酶(Cellulase)和脂肪酶(Lipase)。研究了PEG分子量及浓度、磷酸钾浓度、蛋白质含量、pH、氯化钠浓度等因素对分配系数,酶活回收率和分离效果等参数的影响,并设计出双水相体系抽提三种酶的相组成系统。     

双水相萃取法富集分离地木耳中的藻蓝蛋白

采用聚乙二醇(PEG4000)/硫酸盐双水相体系,经一次萃取从地木耳细胞破碎液中富集分离藻蓝蛋白.分别考察萃取时间、硫酸盐种类及浓度、PEG4000浓度、溶液pH值和离子强度对双水相萃取分离地木耳中藻蓝蛋白的影响.结果表明:在萃取时间为30 min,Na2SO4的质量分数为15％,PEG4000的质量分数为12％,加入...     

双水相纯化湖南黑茶茶多酚工艺优化

选用PEG-(NH4)2SO4双水相体系对湖南黑茶茶多酚进行分离纯化。通过单因素实验考察PEG的平均分子量与质量分数、硫酸铵质量分数、提取液体积、体系pH值和温度等多种因素对茶多酚纯化的分配系数以及萃取率的影响,并选择正交实验对茶多酚纯化工艺条件进行进一步优化。实验表明,双水相纯化湖南黑茶茶多酚的最佳工艺条件为:10.0g双水相体系中,选用平均分子量为600、质量分数为30%的PEG,质量分数为21%的(NH4)2SO4,体系的提取液体积为2.7 mL,pH=5.5,温度为25℃。在此最优工艺条件下,可得双水相纯化湖南黑茶茶多酚的分配系数为34.50,萃取率可达97.57%。     

双水相萃取法分离纯化月季花色素

采用PEG400/Na2SO4双水相体系分离纯化月季花色素,确定了月季花色素的双水相体系组成为25％PEG400与18％Na2S04,并通过实验探讨了温度、色素粗提液体积、pH值对萃取效果的影响.结果表明,色素粗提液体积对萃取效果影响最大,其次为pH值和温度.最佳萃取条件为:pH2.0;粗提液体积1mL;温度30℃.在此条件下,月季花色素的萃取率为98.45％.双水相萃取法是分离纯化植物色素的有效方法.     

聚乙二醇硫酸铵双水相中苋菜红与蛋白质作用的初步研究

在聚乙二醇-2000(PEG)-硫酸铵-苋菜红(AT)双水相体系中,研究了PEG相中食用色素AT与人血清白蛋白(HSA)、牛血清白蛋白(BSA)、DNA生成复合物光谱行为和溶液酸度,盐浓度,PEG用量,反应时间,共存物质等对体系复合物测定影响.实验结果表明:在pH6的缓冲溶液中,加入HSA、DNA、BSA生成复合物最大吸收波长与AT比较,分别紫移15～3nm,用摩尔比法求得HSA、BSA与AT最大结合数分别是158和210.用加入不同类型表面活性剂的方法,初步探讨了食用色素苋菜红与蛋白质之间的作用机理.     

2种盐与PEG4000组成的双水相体系及其对BSA萃取的影响

通过对PEG4000-NaH2PO4和PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系最佳条件的确定,研究双水相体系对BSA萃取的影响.考察NaH2PO4、(NH4)2SO4、PEG4000的质量分数,BSA的质量浓度对双水相形成以及牛血清白蛋白分配行为的影响.结果表明,PEG4000-NaH2PO4双水相系统中w(PEG4000)=10.50%,w(NaH2PO4)=20%,回收率最大为89.4%;PEG4000-(NH4)2SO4双水相系统中,w(PEG4000)=12%,w((NH4)2SO4)=17.50%,回收率最大为91.5%.PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系比PEG4000-NaH2PO4更易分离纯化得到大量目标蛋白质.     

甲基蓝共振瑞利散射法测定人免疫球蛋白

在pH 4.2的BR缓冲溶液中,甲基蓝本身的共振光散射信号较弱,与人免疫球蛋白(H IgG)作用后引起体系共振光散射信号显著增强,最大散射峰位于410 nm.详细研究了甲基蓝体系测定H IgG的最佳反应条件,包括甲基蓝的浓度、反应时间、pH值等.实验结果表明,在最佳反应条件下,共振散射光强度与HIgG的浓度在0.3~115.3 mg/L范围内呈良好的线性关系.检出限为0.1 mg/L.     

Mica-stabilized polyethylene glycol composite phase change materials for thermal energy storage

Mica was used as a supporting matrix for composite phase change materials(PCMs) in this work because of its distinctive morphology and structure.Composite PCMs were prepared using the vacuum impregnation method,in which mica served as the supporting material and polyethylene glycol(PEG) served as the PCM.Fourier transform infrared and X-ray diffraction analysis confirmed that the addition of PEG had no effect on the crystal structure of mica.Moreover,no chemical reaction occurred between PEG and...     

悬汞电极吸附伏安免疫法测定人体免疫球蛋白IgG、IgA、IgM

本文叙述了测定人体免疫球蛋白IgG,IgA,IgM的一个新方法。灵敏度高于均相伏安免疫法,IgM的检测限可达10~(-12)M。可应用于临床分析。     

用毛细管气相色谱法测定工业2-乙基已醇和有机杂质含量

本文介绍了一种毛细管气相色谱测定工业2-乙基已醇(2EH)中2EH、有机杂质(OIS)含量的新方法.该法以氦气为载气,样品经Hi CAP-CBP20(相当于PEG20M)毛细管柱分离后,直接采用面积归一化法定量,操作简便、快速、灵敏、准确.     

功能化介孔二氧化硅微球的药物输送行为分析

介孔二氧化硅(MSNs)作为一类新型的药物载体在药物缓控释领域的应用方兴未艾。采用模板诱导和自组装方法合成MCM-41型介孔二氧化硅纳米颗粒,并通过聚乙二醇(PEG)的表面修饰,制备出一类具有高亲水性、高孔隙率、高比表面积的MSNs修饰微球。采用氮吸附(BET)、扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、粒径分析等手段表征并对比了聚乙二醇(PEG)修饰前后的MSNs基础理化性能。在此基础上,选用阿霉素作为模型药物,包埋于介孔材料中,对比了PEG修饰前后MSNs中阿霉素的装载量、包封率及释放行为。选用乳腺癌细胞MCF-7为模型癌细胞,选用人血清蛋白(HAS)作为模型蛋白,考察了两种材料对细胞的生物安全性及对蛋白的吸附情况,并将两种材料所对应的载药微球与MCF-7进行共培养,探究两种载药系统对癌细胞的灭杀情况。     

适合杨树叶片蛋白质组学样品制备方法的比较

【目的】为了提高植物叶片中低丰度蛋白质的检测效率,建立有效的杨树叶片蛋白质组学分析的蛋白质提取方法。【方法】利用三氯乙酸-丙酮结合PEG分级提取方法和SDS-酚结合PEG分级提取方法对杨树叶片蛋白质进行提取,并采用SDS-PAGE和双向凝胶电泳(2-DE)对提取结果进行评价。【结果】SDS-PAGE实验结果显示,三氯乙酸-丙酮结合PEG方法优于SDS-酚结合PEG分级方法。三氯乙酸-丙酮结合PEG分级和非结合PEG分级提取蛋白质的双向电泳结果表明,PEG分级能有效地去除高丰度蛋白质Rubisco,提高低丰度蛋白质的检测。三氯乙酸-丙酮结合PEG分级法检测的蛋白质比非结合PEG分级法多90个蛋白质点。【结论】以LTQ-Orbitrap XL分析三氯乙酸-丙酮结合PEG分级分离的一些蛋白质显示,三氯乙酸-丙酮结合PEG分级对于2-DE和MS鉴定低丰度蛋白质是一种有效的分离方法。     

重组大肠杆菌Trx-hPTH蛋白在双水相体系内的初步纯化

用双水相体系萃取技术对重组大肠杆菌表达的人甲状旁腺激素融合蛋白Trx-hPTH进行了初步纯化,考察了盐的种类、PEG的平均分子量及浓度、MgSO4浓度、pH等因素对Trx-hPTH蛋白在PEG-MgSO4体系内分配行为的影响。结果表明:当双水相体系中w(MgSO4)=0.16,w(PEG 1000)=0.20,pH为8.0时,一步萃取后目标蛋白的分配系数为3.4,回收率为88.6%。     

硫氰酸铁铵-氯仿体系光度法测定聚乙二醇

利用聚乙二醇(PEG)存在下,Fe(SCN)3在水相和氯仿相之间进行分配,光度法间接测定聚乙二醇的浓度。不同分子量PEG氯仿相的最大吸收波长为515nm,振摇时间30min,不同聚合度PEG的线性回归方程、精密度、回收率等实验结果均满足实验要求,可用于实际工作。     

甲醇酵母PEG和电转化法

利用电击法和PEG法分别转化甲醇酵母,电击法的转化率达(DNA)400转化子/μg,明显高于PEG法,后者仅为0～20转化予/μg,而且操作更加快捷.     

免疫球蛋白IgG和IgM分离纯化技术现状与展望

抗体是动物有机体在抗原刺激下产生的具有抵抗外源物质侵袭的生物活性物质,是大分子糖蛋白,是免疫学研究和临床应用较多的物质,研究与应用都要求较高的纯度和生物活性,这对此类物质的分离纯化提出了很高要求.文章以IgG和IgM为目标抗体,重点阐述了其纯化技术,比较分析了各种方法的应用范围、优化条件及优缺点,以期为今后分离纯化IgG和IgM提供参考.     

Isothermal Crystallization Kinetics of Microencapsulated Polyethylene Glycol Particles

The microenapsulated polyethylene glycol （PEG） with different molecular weight by a fluidized coating method has been prepared and the crystallization behaviors of PEG particles in three-dimensional confined vohume were investigated by using differential scanning calorimetry （DSC） measurement. The results showed that the width of the crystallization peak of PEG increases and its height gradually diminishes in case that the PEG particles are microencapsulated. Compared with the non-microencapsulated PEG particles, the proportion of the first crystallization peak of microencapsulated PEG particle increases, and that of the second one decreases. The reason for the difference maybe is that the crystallization process of microencapsulated PEG particles is uniform and the crystallization ends when the spherulites touch the wall, thus the opportunity of producing the second crystallization peak was relatively reduced.