Ca~(2+)和CaM在IAA诱导小麦芽鞘伸长中的作用

应用 Ca~(2+)抑制剂和 CaM(钙调素)拮抗剂,对 Ca~(2+)和 CaM 在 IAA诱导小麦芽鞘伸长中的作用进行了研究.结果表明,小于0.5 mmol/L Ca~(2+)可明显促进小麦芽鞘切段伸长,并能加强 IAA 对伸长的促进,1mmol/L 以上Ca~(2+)则有抑制伸长的作用.Ca~(2+)通道抑制剂 Co~(2+)和 La~(3+)、CaM 拮抗剂CPZ(氯丙嗪)明显抑制芽鞘切段伸长,也降低 IAA 促进伸长的效应.因而,可以认为 Ca~(2+)介入 IAA 诱导细胞的伸长过程,Ca~(2+)通过 CaM 发挥其生理功能.     

钙——钙调素热激信号转导途径研究进展

植物细胞内存在一条新的热激信号转导途径.热激引起细胞内自由钙离子浓度([Ca2+];)迅速上升,而磷脂酶C/1,3,5-三磷酸肌醇(PLC/IP3)信号系统的参与是热激引起[Ca2+]i升高的因素之一.热激也提高钙调素(CaM)基因表达和CaM蛋白的积累,钙调素基因AtCaM3是Ca2+-CaM热激信号转导途径中的重要成员.钙调素下游信号分子研究表明:AtCaM3通过CaM结合的蛋白激酶AtcBK3或CaM结合的蛋白磷酸酶AtPP7改变热激因子AtHSFAla的磷酸化状态以调节AtHSFAla的活性,进而影响热激蛋白基因的表达,最终影响植株的耐热性.     

SO_2诱导拟南芥保卫细胞凋亡

以拟南芥叶片下表皮为材料,研究了SO_2体内衍生物-亚硫酸钠和亚硫酸氢钠混合液(3:1,mmol·L~(-1)/mmol·L~(-1))对气孔保卫细胞的致死效应.结果表明,浓度1.0～5.0 mmol·L~(-1)的SO_2衍生物处理表皮3 h可引起保卫细胞死亡,死细胞出现核固缩、核断裂、凋亡小体等典型的核凋亡特征,且胁迫组细胞内活性氧和钙离子水平升高.蛋白酶抑制剂Z-Asp-CH_2-DCB和TLCK能减少SO_2衍生物诱导的细胞凋亡;过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸(AsA),及Ca~(2+)螯合剂乙二醇双四乙酸(EGTA)和Ca~(2+)通道抑制剂LaCl_3均可使SO_2衍生物诱发的细胞死亡率降低.0.1 mmol·L~(-1)的AsA或EGTA能降低胁迫组胞内的活性氧和Ca~(2+)水平,与死亡率降低相伴发生.以上结果表明,一定浓度的SO_2可诱导拟南芥保卫细胞凋亡,胁迫可能通过诱导活性氧产生、胞外钙内流,造成胞内Ca~(2+)浓度升高,引发细胞程序性死亡.     

ICBP90介导PI3K/AKT通路阻断剂LY294002抑制Jurkat T细胞增殖

目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路特异性抑制剂LY294002在JurkatT细胞增殖中的作用.方法:以急性T细胞白血病胞(Jurkat T 细胞)为模型,PD98059和阿霉素为阳性对照,在倒置显微镜下观察LY294002对Jurkat T细胞的集落形成的影响,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测LY294002处理后Jurkat T细胞的增殖,流式细胞术检测LY294002处理后Jurkat T细胞周期的变化,Western blotting方法检测Jurkat T细胞中ICBP90蛋白的表达以确定其与LY294002抑制Jurkat T细胞增殖的关系.结果:LY294002能够显著抑制Jurkat T细胞的集落形成和增殖,使Jurkat T细胞停滞于G2/M 期,导致Jurkat T细胞ICBP90蛋白的表达显著降低,LY294002与阿霉素联合用药可产生一定的协同效应. 结论:LY294002通过下调Jur-katT细胞ICBP90蛋白的表达,抑制Jurkat T细胞增殖.     

结核分枝杆菌H37Ra FadD3基因克隆与表达研究

为探索FadD3在结核分枝杆菌胆固醇分解代谢中的作用,从结核分枝杆菌H37Ra的全基因组中克隆了FadD3基因,并在大肠杆菌BL21中表达.根据NCBI公布的结核分枝杆菌全基因组序列设计一对引物,PCR扩增FadD3基因.PCR扩增产物与克隆载体pGEM3Zf(+)进行拼接,得到重组基因FadD3-pGEM3Zf(+),再转化到大肠杆菌DH5ɑ得到克隆.PCR检测阳性克隆,再与表达载体pYUB28b拼接,得到重组质粒FadD3-pYUB28b.阳性重组质粒亚克隆到大肠杆菌BL21宿主菌进行自体诱导表达.经过表型筛选及鉴定分析,已成功构建了重组表达质粒FadD3-pYUB28b.SDS-PAGE和Western blotting证实,重组基因FadD3-pYUB28b在大肠杆菌BL21中有表达产物.实验结果表明,以pYUB28b为表达载体,FadD3重组基因在大肠杆菌表达体系于温度分别为18,28 ℃有包涵体形式的表达蛋白,在37 ℃无表达产物.     

钙-钙调素热激信号转导途径研究进展

植物细胞内存在一条新的热激信号转导途径．热激引起细胞内自由钙离子浓度（[Ca^2＋]i）迅速上升,而磷脂酶C／1,3,5一三磷酸肌醇（PLC／IP3）信号系统的参与是热激引起[Ca^2＋]i升高的因素之一．热激也提高钙调素（CAM）基因表达和CaM蛋白的积累,钙调素基因AtCaM3是Ca2＋-CaM热激信号转导途径中的重要成员．钙调素下游信号分子研究表明：AtCaM3通过CaM结合的蛋白激酶AtCBK3或CaM结合的蛋白磷酸酶AtPP7改变热激因子AtHSFAla的磷酸化状态以调节AtHSFAla的活性,进而影响热激蛋白基因的表达,最终影响植株的耐热性．     

钙离子通道膜蛋白DdMCU的酵母表达

Mitochondrial Ca~(2+)Uniporter(MCU)作为细胞钙离子通道uniporter复合物的重要组分发挥了关键作用.近期研究发现将盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)DdMCU重构于酵母系统进一步证明了MCU是线粒体正常发挥uniporter性的最基本原件.为了深入研究DdMCU结构与功能,本研究通过合成盘基网柄菌的MCU基因,利用PCR得到目的DNA片段,克隆到表达载体pPICZX,构建DdMCU-GFP融合蛋白表达质粒pPICZX-DdMCU.重组质粒转化酵母X33,经博莱霉素梯度筛选,得到8个酵母重组子,且PCR检测目的基因已与酵母基因组整合成功.酵母重组子进行甲醇诱导表达,经激光共聚焦显微镜与western检测,均表明蛋白已成功表达.     

人endostatin基因重组逆转录病毒载体的构建及其在NIH3T3细胞中表达

为探讨转人血管内皮抑制基因（endostatin）在转染细胞中的表达，利用逆转录病毒载体构建人endostatin基因的重组质粒，通过脂质体（lipofectamine）将重组质粒导入包装细胞PA317,制备重组病毒液。用重组病毒液感染NIH3T3细胞，经G418筛选获得转入endostatin基因细胞株NIH3T3-endo。同法制备对照细胞株NIH3T3-pLncx.PCR检测NIH3T3-endo细胞基因组，在扩增产物中一份550bp人endostatin基因特异性片段，对照组为阴性。免疫组化测定示仅NIH3T3-endo细胞中有外源性endostatin蛋白的表达，说明人endostatin基因已被成功导入NIH3T3细胞，并获得稳定表达。     

正常成人外周血全血培养激活T细胞表达活化抗原

目的：研究正常成人外周血T细胞体外活化表达活化抗原CD69，CD25及HLA－DR的规律与蛋白激酶C（PKC）抑制剂对此的影响。方法：健康志愿者（10名）外周血以佛波醇酯（PDB）＋离子霉素（lon)或植物血凝素（PHA）刺激不同时间后，经双荧光染色后获取有核细胞，以流式细胞仪测定CD3^ T细胞活化抗原CD69，CD25及LHA－DR的表达。结果：无论PDB＋Ion还是PHA均可刺激CD3^ T细胞表达CD25,24h后的表达率分别达57．5％和39．8％，以PDB＋Ion刺激4h，T细胞CD69表达已达90％以上，而此时CD25尚未表达，HLA－DR则在72h后表达明显上调，PKC抑制剂H7能完全抑制DB＋Ion引起的CD69及CD25上调，但仅部分抑制LA－DR的表达。结论：正常成人中血CD3^3 T细胞经多克隆活化剂刺激后CD69表达最快，最高，CD25次之，HLA－DR较慢较低；三者的表达均可被PKC抑制剂H7所抑制，表明PKC在3种活化抗原的表达中起重要作用。     

P33INGIb蛋白的结构及其基因分子生物学

生长抑制因子-1(Inhibitor of growth 1,INGI)是最近发现的一种Ⅱ型抑癌基因,其中P33INGIb璐是ING1基因的主要转录产物以及重要的抑癌基因,将P33INGIb基因正义表达载体转染入正常双倍体成纤维细胞,可抑制细胞生长,而P33INGIb的反义表达载体可促进细胞的恶性转化,P33INGIb的这些生物学特性与其特殊结构关系很大,本文就P33INGIb蛋白及其各种结构的基因生物学机制进行综述.     

AUTOCAD,3DMAX和PHOTOSHOP基本教学软件在城镇规划中的应用

近 2 0年 ,中国的城市化已进入快速发展期 ,城市和城镇建设规模空前 ,从事城镇规划工作变得日益重要 ,尤其是计算机技术迅猛发展 ,给全球带来了日新月异的变化。在规划设计行业中 ,应用计算机技术和CAD基础软件从事城镇规划设计图的绘制和数据管理 ,将会得到事半功倍的效率。本文结合作者多年来从事CAD教学和城镇规划的实际工作经验 ,介绍CAD等几种基础教学软件的使用技巧 ,阐述其使用方法和在实际工作的运用     

4－氨基－3－甲基－N，N－二烷基苯胺盐合成新工艺

对合成４－氨基－３－甲基－Ｎ，Ｎ－二烷基苯胺盐系列化合物的工艺进行了改进研究，该工艺操作简便，收率较高．对所合成的部分化合物经元素分析，红外光谱和质谱确证了结构     

铝酸酯偶联剂在碳酸钙填充ABS及PVC中的应用研究

研究了铝酸酯偶联剂对碳酸钙的活化作用，进而探讨了活性碳酸钙分别填充ＡＢＳ及ＰＶＣ的复合体系的流变性，并对其力学性能进行了测定。实验证明，活化处理能够提高ＣａＣＯ３的填充量，改变复合体系的流变性、加工性能和某些机械性能．     

5—HT1,5—HT2,5—HT3受体激动剂对离体蟾蜍心脏活动的影响

在离体蟾蜍心脏灌流标本中加入２．５，５．０，１０μｇ／２０μｌ三种不同剂量的（５－ＨＴ）后，可引起心输出量减少，心肌收缩力减弱，心率下降，并呈一定的量效关系。５－ＨＴ１受体激动剂ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ２．５，５．０，１０ｇ／２０μｌ时，对心率无明显影响，但可使心输出量增加，心肌收缩力加强，亦呈量效关系。     

矢量场(P_3(x,y),Q_3(x,y))在RP~2赤道上的性质

本文研究平面三次多项式矢量场(P_3,Q_3)对应系统的轨线扩充至无穷远时,诱导出的射影平面模型,使赤道是轨线且不含临界点的充要条件。     

用ESR和XRD法研究MoO_3、M_2CO_3、(M=Li、Na、K、Cs)-MO_3焙烧过程中的固相反应

ＥＳＲ研究结果发现ＭｏＯ３在焙烧过程中可以失去晶格氧,生成Ｍｏ５＋,当加入一定量的Ｎａ＋、Ｋ＋时,可促进这一反应的进行,但Ｌｉ＋、Ｃｓ＋的加入则对这一反应有抑制作用。用ＸＲＤ对焙烧后的Ｋ２ＣＯ３－ＭｏＯ３体系测试时,发现有非计量型化合物生成。     

几种1,3-二苯基-4-酰基-5-吡唑酮结构讨论

通过FT－IR谱对四种1，3－二苯基－4－酰基－5－吡唑酮的部分结构问题进行讨论．结果表明，吡唑环4－位酰基上取代基的改变，对羰基影响较为明显，该类化合物以互变异构体形式存在．     

碲及其复合物对BSCCO,V_2O_3和Fe_2O_3的物理性能的影响

在高温超导陶瓷、钒氧化物和铁氧体中加入碲或碲与金属的复合氧化物,在恰当的工艺条件下,可以提高试样的硬度、致密度、钇系高Tc超导陶瓷的电流密度,降低铁氧体的居里点,导致铋系高温超导体出现高温亚稳相,在钒氧化物中引起介电常数峰以及使340K相变时电阻率曲线出现奇异。本文用固态相变的观点和元素碲的特性讨论了这些现象。