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水稻叶绿体DNA提取和纯化方法优化 总被引:3,自引:0,他引:3
改进了水稻叶绿体DNA的提取和纯化方法,获得的高纯度的水稻叶绿体DNA适于PCR扩增等分子操作.本方法要点为:匀浆液2 300 r.min-1离心去核,上清液4 300 r.min-1离心,沉淀用于DNA提取,提取后的叶绿体DNA用RNase和蛋白酶K纯化. 相似文献
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《湖南师范大学自然科学学报》2015,(6)
为筛选有效提取细菌菌株总DNA的方法,分别采用SDS法、CTAB-SDS法、试剂盒法和改良试剂盒法对苏云金芽胞杆菌、粘细菌和放线菌进行总DNA的提取、电泳检测、NanoDrop 2000测定、PCR扩增.对放线菌和苏云金芽胞杆菌,用改良试剂盒法所提取的总DNA纯度较高,电泳条带清晰,DNA主带位于23 kb,单位体积菌液所提取到的总DNA较SDS法和CTAB-SDS法高,能满足下游的PCR扩增等分子操作.对待测样品所做的质检报告也证实样品合格,可用于后续建库、测序.而粘细菌提取到的总DNA由于它们的OD260/230在2.0以下,没有达到第三代测序样品的要求.改良试剂盒法所提取到的总DNA大多数可以满足第三代测序技术样品制备的要求. 相似文献
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为了解决PAC克隆DNA制备中存在的若干问题,我们探索了几种改进方法,使提取的PAC克隆DNA质量明显改进,能较好地满足我们对儿童急性淋巴细胞白血病6q21缺失区抑癌基因克隆的研究目的。 相似文献
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对石斛兰基因组DNA的提取方法进行了改良,提出一种简便、实用的DNA提取方法,经紫外检测、电泳检测及PCR检测,结果表明所得DNA的产量和纯度能够满足分子生物学研究操作的要求. 相似文献
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SDS、CTAB和PVP法提取香蕉基因组 DNA的比较研究 总被引:7,自引:0,他引:7
文章报道了采用SDS法、CTAB法和PVP法提取的香蕉基因组DNA片段大小比较一致,都可直接用于RAPD分析,SDs法提取的DNA纯度较高,吸芽基因组DNA提取率略高于嫩叶,对相同done不同单株间基因组DNA的RAPD分析结果并不表现出明显的多态性. 相似文献
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一种改进的提取苏云金杆菌质粒DNA的方法 总被引:3,自引:0,他引:3
为了建立一种提取苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)质粒DNA的常规方法,介绍了一种改进的TritonX-100温和裂解法,与碱裂解法和SDS裂解法相比,具有简易、重复性好等优点,对采用该方法提取的质粒DNA进行电泳,取得了较理想的效果,说明这种方法较适用于苏云金杆菌质粒DNA的提取。 相似文献
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刘润芝 《湖南师范大学自然科学学报》1988,(3)
DNA是生物的主要遗传物质,它的结构和功能的研究,已成为分子生物学发展最为迅速的课题。小牛胸腺和鱼类精巢含有丰富的DNA,我们以鲤鱼精巢为材料,利用盐溶液法来提取DNA。获得DNA的纯度为A_(260):A_(280)=1.95,提取率为8~10%。本试验为从淡水鱼精巢中摸索较为简易的提取DNA方法,为综合利用淡水鱼类资源开辟新途径。 相似文献
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玫瑰(Rosa rugosa)组织色素较多,富含酚类物质.为了提取适于SRAP分析的高质量的玫瑰DNA,本实验基于CTAB法,在浓度2%和3%CTAB基础上,设计不同浓度的β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂进行5种组合,研究了β-巯基乙醇和PVP对玫瑰DNA提取质量的影响.结果表明,在3%CTAB提取液中添加适量的β-巯基乙醇和PVP能获得纯度较高的玫瑰DNA,在组合Ⅲ(3%CTAB、2%β-巯基乙醇+10%PVP)中,DNA电泳谱带清晰,无明显拖尾现象,SRAP分子标记效果较好,DNA的质量和纯度均满足于SRAP技术和DNA指纹图谱研究的要求. 相似文献
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花粉管通道法转柱头外露棉DNA及转化体RAPD分析 总被引:6,自引:0,他引:6
提取“异9-3”柱头外露棉总基因组DNA,通过花粉管通道法经微量注射导入抗虫棉707.1的胚囊内,D1代田间筛选到柱头外露的转化植株,遗传分析结果表明转化株柱头外露性状由一对隐性基因控制,50个随机引物进行PCR扩增,33个引物扩增出的DNA在供体、受体和转化体之间呈现出多态性,其中引物S462(TCG GCA CGC A)在供体和转化体之间出现相同产物而受体没有出现扩增产物,该引物有可能作为柱头外露系的分子标记.RAPD分析结果表明转化体与受体有较多相同基因位点,而与供体相同基因位点较少,转化体还有供体和受体都不具有的基因位点,这可能是外源DNA导入时引起碱基突变所致。 相似文献
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采用改良CTAB法和SDS法提取椰子基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、分光光度计进行紫外检测.结果表明使用改良的CTAB法较SDS法抽提椰子属植物中总DNA纯度和含量要高,适合分子生物学操作的要求,为后续椰子遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究奠定基础. 相似文献
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<正>随着分子生物学技术的发展,如限制性酶切片段长度多态性(RFLP),随机扩增多态性DNA(PAPD),扩增片段长度多态性(AFLP)等;分子标记技术已经用于植物种质资源和系统发育的研究。目前,报道的大多从是植物叶片中提取DNA且方法众多,技术较为成熟,但这 相似文献
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DNA甲基化或去甲基化,改变了DNA分子构象,导致某些重要基团的隐蔽或暴露,削弱或增强了DNA与蛋白质因子的结合能力,从而改变了基因表达。 相似文献
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采用改良的CTAB法成功提取龙柚等6种福建省旱熟良种柚叶片的DNA,并对其进行RAPD分析.从初选的100个随机引物中筛选出12个扩增效果较好的引物,对提取的DNA进行PCR扩增,获得清晰可重复的位点107个,平均每条引物产生的位点为8.9个,其中多态性位点93个,占86.9%;在部分样品中检出了特异性RAPD标记24个,占23.4%:样品间遗传相似系数比较和UPGYA聚类分析表明坪山柚和文旦柚的亲缘关系最近,度尾蛮柚和四季柚分别与其它5个柚类的亲缘关系较远. 相似文献
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基因芯片(gene chip)亦称DNA芯片、DNA微阵列,是最近几年才发展起来的一种多学科交叉融合产生的高新技术产品。它是专门用来检测核酸的生物芯片,也是目前应用最广泛的微阵列芯片。基因芯片指的是在固相载体(如硅片、玻片、聚丙烯或尼龙膜等)上按照特定的排列方式,固定上大量已知序列的DNA/RNA片断,形成DNA/RNA微矩阵,将样品基因组DNA/RNA进行体外扩增并掺入标记分子后,与位于微阵列上的已知DNA序列杂交,通过激光共聚荧光检测系统等对芯片进行扫描,检测杂交信号强度,并用计算机软件进行数据的比较和综合分析后,获得样品中大量的基因序列特征或基因表达信息。 相似文献