单克隆抗体连接表阿霉素导向治疗乳腺癌的体外基础研究

本文报道了抗人乳腺癌单克隆抗体Ｍ４Ｇ３与表阿霉素结合物的制备及其体外免疫活性，首先用高碘酸钠氧化葡聚糖，使其成为多醛基葡聚糖，并以此为中间载体将表阿霉素与单抗连接，经测定，每一抗体分子能携带３１个药物分子，且结合物仍具有良好的免疫活性，为单抗导向药物治疗乳腺癌提供了理论基础和实验依据。     

抗人乳腺癌糖蛋白单克隆抗体的研究

以人乳腺癌组织提取的糖蛋白免疫后的BALB/C小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0细胞融合,经筛选及克隆化培养,建立了1株稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株GP-1D_8。 McAb GP-1D_8与乳腺癌组织产生强阳性反应;与正常乳腺及一些其它肿瘤组织为阴性反应;与甲状腺癌及正常结肠组织出现弱交叉反应。 经Sepharcyl-S200 HR分子筛分离的抗原分子,分子量为66kd,与Western blot测出的分子量相符。抗原分子含糖量为16％。其抗原决定簇为一段耐70℃温度的多肽。与前人报导的乳癌相关抗原有区别,可能是一种新的乳腺癌相关抗原。     

载表阿霉素聚乳酸微球的制备及性质研究

表阿霉素是广谱的抗肿瘤药物,为了减少给药量,降低药物的毒副作用,并达到缓慢释放的目的,本研究以Span-80和Tween-80复合乳化剂为初乳乳化剂,以聚乙烯醇水溶液为复乳乳化剂,采用复乳-溶剂挥发法制备了聚乳酸载药微球,并分别用激光粒度分析仪,光学显微镜,透射电子显微镜,扫描电子显微镜以及激光共聚焦显微镜对微球微观形态进行了表征.通过优化实验,所得载表阿霉素聚乳酸微球粒径2-5μm,载药率最高可达到4.39%,包封率达37.2%,72h体外累积释放量为34.9%,具有明显的缓释效果.本研究制备了表阿霉素缓释新剂型,为进一步的动物实验、临床实验和临床应用提供了有价值的参考数据,有很好的应用前景.     

辣根过氧化物酶标记单克隆抗体的初步研究

采用经改良的过碘酸盐氧化法,以国产辣根过氧化物酶(HRP)标记经纯化的三种抗bFSH和抗bLH的单克隆抗体,所获得的酶—抗体结合物的效价用ELISA法测定为10~(-3)—8×10~(-5),文中讨论了标记高效价酶—抗体结合物的若干事项。     

阿霉素与肺癌单克隆抗体交联物的制备及其生物活性

以氧化葡聚糖法制备阿霉素（ＡＤＭ）与肺癌单克隆抗体＿３Ｄ＿３（ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３）的交联物ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３，ＡＤＭ与ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３克分子比为４６：１．经ＩＦＡ测定，交联物的抗体活性大部分保持．体外细胞毒试验显示，ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３对肺癌细胞Ｌ＿（３４２）的杀伤作用比游离ＡＤＭ增强，其５０％的杀伤浓度分别为１．１２μｍｏｌ／Ｌ和２．２３μｍｏｌ／Ｌ；对非靶细胞ＭＧ＿（ｃ－８０３）和ＢＥＬ＿（－７４０２）的毒性很弱，５０％杀伤浓度分别为１７．４５μｍｏｌ／Ｌ和２３．８１μｍｏｌ／Ｌ结果提示ＭｃＡｂ＿３Ｄ＿３具有导向作用，可以携带结合的ＡＤＭ特异地杀伤肿瘤细胞。     

表阿霉素在硅胶柱上不可逆吸附行为的研究

亲水作用色谱分离表阿霉素时，在中性及弱酸性条件下，样品在硅胶柱上呈现不可逆吸附平衡过程．对影响不可逆吸附的因素如缓冲液的pH值、离子强度、有机溶剂的类型及流动相中水的含量进行了探讨，推断这种现象是由于溶质离子与固定相表面极少数的强活性硅羟基作用所致．不可逆吸附是在一定条件下产生的，可通过改变洗脱条件减小。     

1例表阿霉素静外渗漏致组织损伤的护理

化疗是治疗恶性肿瘤的重要手段。而抗肿癌药物均有较强的毒性。一旦化疗药物外渗漏损伤的发生，既给病人造成痛苦，又影响了化疗方案的顺利实施。据资料估计，化疗渗漏率为0.1％-6％，实际的发生率可能更高。表阿霉素是一种抗癌药物，对恶性淋巴瘤疗效显著．广泛应用于临床。药理学表明表阿霉素毒系能直     

不同途径给药及联合应用血液灌流对表阿霉素血浆,组织 …

目的：探讨不同途径给表阿霉素（ＥＰＩ）的优少和血液灌流（ＤＨＰ）对ＥＰＩ的吸附能力。方法：观察肝癌病人肝动脉和外周静脉持续输ＥＰＩ后外周血浆ＥＰＩ浓度的的改变，并应用ＤＡＣ－ｒｅｓｉｎＤＨＰ吸附ＥＰＩ的临床研究。结果：肝动脉给药痛降低外周血浆ＥＰＩ浓度（Ｐ〈０．０５）及血浆高峰浓度（Ｐ〈０．０５）及血浆高峰浓度（Ｐ〈０．００５），而两组ＡＵＣ的差别不明显（１：１．０５）。ＤＡＣ－ｒｅｓｉｎＤＨＰ对     

CSB1-Lipo-DOX-miR101靶向治疗乳腺癌及抗耐药效应的体外研究

通过薄膜超声分散技术、硫酸铵主动载药技术构建了靶向乳腺癌(breast cancer, BC)细胞的具有抑制化疗药物多药耐药性(multidrug resistance, MDR)特征的阿霉素(doxorubicin, DOX)脂质体载药体系CSB1-Lipo-DOX-miR101。应用MTT法、损伤修复法、Transwell、细胞核染色、扫描电镜等技术对药物疗效和细胞行为变化进行研究。利用网络数据库分析miRNA101潜在靶向的MDR相关靶基因及BC恶性表征相关基因,以Western blot验证分析miRNA101靶基因的表达及潜在的抗MDR机制。结果表明,CSB1-Lipo-DOX-miR101对BC细胞MCF-7靶向性良好,特别是对耐药性BC细胞MCF-7/ADR具有明显杀伤力,同时对药物的MDR形成具有显著抑制作用,使药物可以持续发挥杀伤作用。结果提示CSB1-Lipo-DOX-miR101可以提高DOX对BC的临床治疗效应、降低毒副作用及复发率,其对BC的治疗效应及对MDR的抑制机理可能是通过抑制ABCC5、EZH2、APEX1、ITGB1、Snail1、MMP2基因表达实...     

辛酸沉淀纯化单克隆抗体的研究

采用一种经修改的辛酸沉淀法进行纯化小鼠腹水或血清中单克隆抗体(McAbs)的试验,全部八种抗促卵泡激素(FSH)单抗腹水的纯化结果都很好。该方法大致做法为将经稀释的腹水调pH至4.5后加入辛酸,离心弃沉淀,取上清液加等体积饱和硫酸铵,所得沉淀物用磷酸盐缓冲液(PBS)溶解后对相同PBS作广泛透析。以聚丙稀酰胺凝胶电泳(PAGE)检查经纯化抗体的纯度,并在600nm波长上扫描PAGE图谱,对抗体纯度作定量分析。结果抗体纯化物的平均纯度达93％(范围:83.5—98.6％)。通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测得知,纯化后抗体活性无明显丢失。     

~(211)At标记单克隆抗体对移植于裸小鼠体内人胃癌实体瘤导向治疗的初步研究

~(211)At标记的抗人胃癌单克隆抗体3H_(11)对裸小鼠人胃癌移植瘤的生长在短期内有明显抑制作用。治疗后第9天药物对人胃癌生长的抑制作用最为明显~(211)At—3H_(11)(5μCi/只)对人胃癌的抑制率:尾静脉给药为80％,胃癌移植瘤内给药为93％,相同剂量的离子型~(211)At尾静脉给药对胃癌的抑制率为48％.第20天处死动物时~(211)At—3H_(11)尾静脉和肿瘤内给药的抑制率分别是66％和81％,离子型~(211)At尾静脉给药的抑制率为6％,抑制作用明显下降。     

^99mTc直接标记单克隆抗体3H11及其在小鼠体内分布的研究

对二硫苏糖醇（ＤＴＴ）为抗体还原剂，亚锡ＭＤＰ药盒为弱交换配体，进行了＾９９ｍＴｃ直接标记ＭｃＡｂ３Ｈ１１的研究。用ＨＰＬＣ分析鉴定标记物，标记率大于９５％，标记后不需纯化。体外竞争实验和在小鼠体内分布的研究表明，由标记得到的＾９９ｍＴｃ－３Ｈ１１和＾９９ｍＴｃ－ＩｇＧ，在体内和体外均是稳定的。     

~(131)I标记抗人结肠癌单克隆抗体MC_3对裸鼠载人肠癌的放射免疫显像和导向治疗研究

用~(131)I标记的抗人结肠癌单克隆抗体(McAbMC_3)对裸鼠载人肠癌进行放射免疫显像诊断和实验性治疗研究。结果显示:体外标记抗体特异性结合率分别为37.5％和32.1％。裸鼠体内在48~120h的ECT照相可见在肿瘤部位均有放射性的特异性浓聚,其摄取量随时间延长逐渐增加,肿瘤显影清晰,显像的合适时间为96～120h。而给予非特异性的~(131)I-NMIgG后肿瘤部位来见放射性浓聚,而呈全身均匀性分布。120h肿瘤组织与肝脏及正常肠组织的比值分别为3.61和9.81,肿瘤定位指数为4.26。实验治疗显示与对照相比~(131)I-MC_3对肿瘤有明显的抑制生长作用,治疗后第14天肿瘤抑制率为90.14％,与~(131)I-NMIgG对照组比较差异极显著(P<0.01)。治疗后第32天裸鼠血清CEA含量与~(131)I-NMIgG组比较差异显著(P<0.05)。病理组织学检查结果显示治疗后8天注射~(131)I-MC_3裸鼠肿瘤呈大片坏死,仅局部肿瘤边缘尚存少数完整的肿瘤细胞,而其它正常组织、器官未见明显辐射损伤。提示McAbMC_3用于肠癌的诊断和导向治疗可能有良好的前景。     

~1I-抗膀胱癌单克隆抗体在荷瘤裸鼠的体内分布与放射免疫显像

用氯胺T法际记鼠抗人膀胱癌单克隆抗体(抗BIU-87McAb),标记率及标记抗体免疫活性满意。抗体注射于荷瘤裸鼠,靶与非靶放射性比值随肘间延长而增高,尾静脉注射后72h:肿瘤/血液=0.99、肿瘤/肌肉=8.43、肿瘤/膀胱壁=4.04;注射后120h:肿瘤/血液=1.38、肿瘤/肌肉=12.31、肿瘤/膀胱壁=5.24。于注射后72h行Y照相,肿瘤影像明显可见,5—7天影像更为清晰。与非特异性对照放免显像对比,表明抗BIU-87McAb具有高度特异牲,有可能进一步应用于人体膀胱癌及其转移灶的导向诊断与治疗。     

^211At—单抗（3H11）对裸鼠载人胃癌肿瘤模型的治疗作用

通过纯α放射性核素~(211)At与抗人胃癌鼠源单抗3H11的结合物对载人胃癌肿瘤裸鼠进行实验性治疗.实验结果表明,与PBS溶液相比,~(211)At—3H11显著抑制了移植瘤的生长;具靶特异性的3H11主要起导向作用,而~(211)At衰变放射的α粒子可引起靶组织细胞核变性、线粒体肿胀甚至破裂、溶酶体透性改变、瘤内毛细血管损伤,毛细血管损伤使靶组织缺氧,可加剧一系列酶组化特性改变,进而影响细胞的结构和功能状态。     

小型乙苯脱氢装置操作条件的考察

在自行设计的小型乙苯脱氢装置上，对过程的适宜操作条件及苯乙烯的分析方法进行了考察。结果表明，在反应温度田０～６００℃；液空速０．８ｈ￣（－１）及Ｈ＿２Ｏ／乙苯为１．５（质量比）的条件下，乙苯单程转化率为４７％～６１％，选择性达到９２％～９３％，这一结果与工业装置的实际生产数据相当吻合。因此，可利用该小型装置对工业生产的操作条件进行模拟。苯乙烯含量的色谱分析与折光指数分析对比显示。两者相当接近，故可采用相对较为简单的折光指数法测定乙苯脱氢反应液相产物中苯乙烯的含量。     

中成药中甘草成份的免疫学检测方法的研究

通过 ELISA和免疫印迹法分析确定了甘草蛋白 ( GRP)的特异性 ,并建立 GRP的竞争型含量分析 ELISA法 .该 ELISA法显示了良好的特异性、再现性 ( c.v.=3.9% )和检测限 ( 4 μg· L- 1 ) ,证明 GRP为甘草的特异性成分 .用该法测定 GRP同 HPLC法测定甘草甜素在三种中成药中的含量相比呈现良好的相关性 .该法简便精确快速并可同时进行大样本分析 ,为中成药中甘草成份的分析提供一种新方法 .     

水中放射性氡测定条件探索及其测定方法

射气闪烁法是测氧的主要方法。本文从理论和实践方面总结概括了怎样确定氧的测定条件和测定方法,具有一定的实用和研究意义。