电泳方法研究中国根霉(Rhizopus chinesis)产纤溶酶的酶学性质

采用电泳方法测定中国根霉纤溶酶的部分酶学性质。结果显示,中国根霉纤溶酶相对分子质量为30500;等电点为8.5±0.08,能在1h内降解人血纤维蛋白原的α链和β链,9h能够完全降解人血纤维蛋白原的γ链,表现出较为鲜见的溶栓效果。     

产纤溶酶菌株根霉12#的诱变育种

以产纤溶酶的华根霉12＃为出发菌株,对其进行紫外线-氯化锂复合诱变,筛选到74株制霉素抗性突变株。所有抗性突变株经进一步固体发酵筛选,获得了4株稳定高产纤溶酶的正突变株,其纤溶酶产量分别比出发菌株提高32.9%、21.5%、22.3%和18.0%。     

白色链霉菌(Streptomyces albus)HS1产豆豉纤溶酶发酵条件优化

从豆豉中筛选的白色链霉(Streptomyces albus)HS1,产生的豆豉纤溶酶具有较好的体外溶栓效果.利用单因子和正交试验得到该菌株产酶的最佳发酵条件:大豆粉0.3,蔗糖8%,MgSO40.15%,KH2PO40.2%,NaC10.9%,生豆浆6.67%;150 mL三角瓶装量为30 mL;接种量2%;接种龄36h,初始pH 6.5,摇床转速150 r/min,28 oC振荡培养60 h;其发酵上清纤溶活性可达207.92 IU/mL.与优化前99.28 IU/mL相比,提高了1.09倍.该菌株产DFE的模式为滞后合成型.     

丝状真菌原生质体技术的研究——去壁酶对丝状真菌原生质体形成的影响(Ⅱ)

本文研究了几种丝状真菌原生质体形成的最佳酶类和酶浓度(W/V).结果表明:台湾根霉为2％的溶壁酶(Ⅱ);黑曲霉,平菇,草菇,银丝草菇为1.5％的溶壁酶(Ⅰ);放线菌的红霉素链霉菌为0.025％的溶菌酶.     

赤子爱胜蚓纤溶酶的活性及性质

采用纤维蛋白平板法测定赤子受胜蚓的纤溶酶活性,酶溶解纤维蛋白板的溶圈面积为35.0±4.2mm~2。纤溶酶在温度50℃以下,pH值4.0-10.0的范围内酶活性比较稳定。其最适温度为57°-59℃,最适pH值为8.0。也就是说纤溶酶在偏碱的条件下,活性最强。因此,纤溶酶制剂宜采用肠溶衣饭后半小时服用为佳。     

木质素降解菌株产木质素降解酶的研究

采用液体静止培养,通过对分离筛选获得的两株高效木质素降解菌株15 -1和14 -7的发酵产木质素酶条件进行优化,得出结论:两株菌的最佳碳源均为稻草,最佳氮源均为尿素,最佳温度均为30℃.在最佳培养条件下进行发酵产酶,测得14 -7的木素过氧化物酶和锰过氧化物酶活力分别为0.350 U· mL-1和0.080 U· mL...     

利用稻草液体发酵产纤维素酶优化培养基

选用液体发酵产纤维素酶的优良菌株里氏木霉HC-415,在摇瓶阶段,通过正交试验等对稻草培养基中稻草粉与豆粕粉的用量等因素进行了研究,确定了优化的培养基配方和产酶条件.当一级种接种体积分数为15%,一级种培养时间24 h;产酶培养基稻草粉与豆粕粉质量比为6:1,p(KH2PO4)=0.01 g/mL,p(CaCl2)=0.006g/mL,聚醚不加,装瓶量为50 mL/250 mL瓶,培养120 h时,发酵液纤维素酶活性最高.此时,CMC'ase酶活性平均为94.62 U/mL;FPA酶活性平均为16.04 U/mL.     

肌酐测定工具酶产生菌-烟草节杆菌02181的筛选及其产酶条件

肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶是肌酐测定酶学方法的主要工具酶，我们从兰州市郊土壤中筛选到一株能同时高产这3种酶的菌株02181，经中国科学院微生物研究所鉴定为烟草节杆菌，正式定名为烟草节杆菌02181(Arthrobacter nicotianae 02181)．该菌适宜的培养温度为28℃；增加氧溶量有利于细菌细胞生长和产酶；肌酐的存在对产酶至关重要，推测为酶基因开放的诱导剂；蛋白胨是该菌生长和产酶的良好氮、碳源；在有肌酐和蛋白胨存在时，添加葡萄糖能促进细菌细胞生长，但产酶量降低；镁盐、钾盐和磷酸盐为细菌生长和产酶所必需．优化产酶条件后，肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶的最高产酶量分别达145．00U／g湿菌、75．77U／g湿菌和21．30U／g湿菌．该菌不仅具有用于发酵生产的潜力，也为我们进行肌酐测定3种主要工具酶的基因克隆奠定了基础。     

脂肪酶产生菌的筛选及其原生质体的制备

实验采用加有维多利亚蓝或若丹明-B染料指示剂的油脂鉴定平板，在室温条件下从长期接触油脂的土壤中分离挑选产脂酶菌种，经琼脂块平板初筛和摇瓶复筛后获得一酶活较高的白色丝状真菌-地霉(Geotrichum,Sp)GS，为对该菌株进行原生质体诱变育种，将菌丝经DTT溶液预处理后，用混合脱壁酶液处理制备原生质体，并加入0．6mol／L MgSO4溶液离心后收集呈絮状飘浮的原生质体团，从而获得大量不带菌丝的原生质体供诱变使用。     

木聚糖酶产生菌固体发酵条件的初步研究

木聚糖酶产生菌 (Aspergillusniger) 1 - 1 3菌株以白酒丢糟作为碳源进行固体发酵生产木聚糖酶 .采用单因素搜索对其最适产酶的氮源和发酵条件进行优化 ,结果表明 :添加的最适氮源为硫酸铵 ,最适加入量为 1 6% (以白酒糟干质量计 ) ;最适产酶发酵条件 :温度为 30℃ ,初始含水量为 5 5 % ,接种量为 1mL菌悬液 (浓度为 7× 1 0 7个 /mL)接种到 1 0 g固体培养基中 .在此优化条件下培养 72h ,木聚糖酶活力可达最高为 370IU/ g酒糟粉     

盐碱胁迫对不同苜蓿品种过氧化物同工酶的影响

为研究盐碱环境对苜蓿过氧化物同工酶的影响,以14个不同品种的苜蓿为研究对象,对其幼苗进行复合盐碱胁迫,采用聚丙烯凝胶电泳技术对过氧化物同工酶进行电泳分析.结果表明,苜蓿品种间的酶带数有所不同,过氧化物同工酶最多有9条,最少有4条,复合盐碱胁迫后差异性带主要出现在C区,酶活性弱,A区和B区无明显差异带.     

果蝇血液标记基因srp原核表达质粒构建及多克隆抗体制备

果蝇基因srp是血液发育的早期标记基因,为了研究果蝇这一模式动物中血液发育的详尽过程,通过提取野生型成体果蝇的总RNA,反转录获得其cDNA文库,设计引物克隆出srp基因,将所得片段插入原核表达载体pET28a中,经酶切和序列鉴定,成功构建重组质粒,并通过IPTG诱导表达出His-srp融合蛋白,经Ni-IDA凝胶柱纯...     

高活性牛肠碱性磷酸酶的制备

本文叙述一种从小牛肠粘膜制备碱性磷酸酶的方法.主要包括用正丁醇提取,丙酮和硫酸铵分级,DEAE纤维素离子交换层析和Sephadex凝胶过滤.所得制剂比活为845单位/毫克蛋白;活力回收29%;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一性活力区带.     

红树科(Rhizophoraceae)木榄属(Bruguiera)植物3个种的遗传多样性及其亲缘关系

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和水平切片淀粉凝胶电泳,对红树科木榄属3种植物木榄、海莲和尖瓣海莲的遗传变异和种间亲缘关系进行了研究。共检测了5个酶系统7个酶位点。结果表明,木榄属这3个种的遗传变异水平较高,遗传分化很大。进一步明确尖瓣海莲的分类地位,推断尖瓣海莲可能是海莲与木榄的杂交种。     

溶胀温度对魔芋多糖龟苓膏质构及色度特性的影响

本文以龟苓膏粉、魔芋多糖、κ-卡拉胶及大豆分离蛋白为材料制得魔芋多糖龟苓膏,研究不同溶胀温度对龟苓膏凝胶质构及色度特性的影响．结果表明,随着溶胀温度的增加,凝胶强度、咀嚼性和析水率表现为先增大后减小趋势,回弹性变化不大;色差AE＊值先减小后增大,在95℃时达到最小值．溶胀温度为95℃时,龟苓膏的凝胶强度、回弹性及咀嚼性达到最大值,析水率和AE＊值达到最小值,此时龟苓膏的组织状态、色泽及弹性达到最佳,最终确定95℃为最佳的溶胀温度．     

定点突变的掺U模板的制备及其紫外检测

制备掺Ｕ模板是利用大肠杆菌菌株ＣＪ２３６（ｄｕｔ＾－ｕｎｇ＾－Ｆ’）中，缺少一种酶，不能去除ＤＮＡ中的尿嘧啶残基。在含有尿苷的培养液中，在ＣＪ２３６中培养适当的Ｍ１３噬菌体，制备模板ＤＮＡ，时行滴度检测，根据结果可知：掺Ｕ模板制备出来了，然后将ＤＮＡ抽提出来，进行１％琼脂糖凝胶紫外检测根据结果可知：抽提出的掺Ｕ模板纯度很好。     

花生几丁质酶的纯化及酶学性质研究

本课题利用亲和色谱和凝胶过滤色谱法从花生种子中分离得到了几丁质酶.经SDS-PAGE鉴定,该酶蛋白已达电泳纯,分子量约34.4 kD.在还原和非还原状态下均显示单一区带,表明其为单体蛋白.此外,通过等电聚焦法可测得该酶等电点为5.1.而酶学性质的相关研究则表明：该酶最适pH为5.4,最适反应温度为40～50℃.     

抗凝血药物水蛭素的纯化与鉴定

以湖南产日本医蛭嗉囊消化液作为原料，经三氯醋酸沉淀后用ＤＥＡＥ－纤维素柱层析一步纯化，反相ＨＰＬＣ脱盐后即可获得批量的水蛭素。对纯化的水蛭素进行了ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳，质谱，Ｎ端顺序分析及抗凝血酶活性分析。     

超微粒子氧化铁的制备研究

用sol-gel和SCFD技术制备了超微粒子氧化铁,采用TEM、XRD等手段对其物性进行了表征.考察了制备条件对产物粒径、形貌及晶型的影响.研究发现采用SCFD技术制备超微粒子氧化铁可实现干燥、晶化一步完成.     

滇产百日青的化学成分研究

滇产百日青(Podocarpus neriifolius D.Don)叶的甲醇提取物经硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析以及反相柱层析等分离方法反复分离纯化得到5个化合物.根据波谱数据分别鉴定它们的结构为异香草醛(isovanillin)(1)、对羟基苯甲酸(4-hydroxybenzoic acid)(2)、原儿茶酸(protocatechuic acid)(3)、松甾酮A(ponasterone A)(4)、stigmast-5-ene-3β,7α-diol(5).其中化合物(1)、(3)、(4)、(5)为首次从该植物中分离得到.