在本科微生物实验教学中拓展抑菌实验的探索

抑菌试验作为抗菌药物和抗生素替代物研发与应用中的关键技术,是生物类本科生需要熟练掌握的重要技能,然而目前国内大部分高校的基础微生物学实验课程中所开设的抑菌实验内容单一,教学设计传统,缺乏综合性。该研究新建了适合于本科教学的牛津杯法定量检测大蒜提取液抑菌效果的实验项目,并通过与原有定性实验项目有机整合,增加小组讨论和项目设计报告撰写环节,建立了一个"课上+课下"的综合性抑菌实验。拓展改进后的实验项目不仅能很好地激发学生的实验兴趣,更可以促进对学生综合实验技能和科研创新能力的培养。     

各种洗衣液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果比较

本文介绍了各种洗衣液对金黄色葡萄球菌抑菌能力的差异,指导合理选择洗衣液。通过用牛津杯法研究各种洗衣液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果,显示品牌较好价格较高的洗衣液抑菌效果比较好,是否标识有抑菌成分、"除菌"或"专用"字样的洗衣液在抑菌方面未体现出明显优势。得出的结论是消费者应综合考虑品牌、价格、自我喜好、消费能力等因素来合理选择洗衣液。     

艾草抑菌抗炎作用研究

研究艾草(Artemisia argyi)水煎液的抑菌抗炎作用.用试管二倍稀释法和牛津杯法测定艾草水煎液的最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)、最低杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC)和抑菌直径;用乙酸致小白鼠毛细血...     

复方中药提取物体外抗白色念珠菌的研究

筛选出具有抗白色念珠菌作用的中药复方。采用牛津杯法从10种中药提取物中筛选出3种具有较好抑菌作用的药材,进行复配并测定最低抑菌浓度(MIC)。以花椒和土荆皮的乙醇提取物等量混合制成的中药复方,对白色念珠菌的MIC为2.5mg/g。以花椒和土荆皮为原料的复方中药,体外抑菌效果显著。     

凝结芽孢杆菌CGMCC 9951抑菌特性研究

以凝结芽孢杆菌CGMCC 9951为研究对象,通过牛津杯法和气质联用(GC-MS),研究了凝结芽孢杆菌CGMCC 9951发酵液抑菌特性.研究结果表明:凝结芽孢杆菌CGMCC 9951具有广谱抑菌特性,其对志贺氏菌具有最强的抑菌效果.抑菌物质在-20～100℃ 具有良好的稳定性,当pH<5时抑菌活性良好.在胰蛋白酶和木...     

解淀粉芽孢杆菌发酵液的抑菌活性及抗氧化作用

以尖孢镰刀菌黄瓜专化型病原菌为指示菌,利用平板对峙法、牛津杯法等方法,探究解淀粉芽孢杆菌SJ100001对尖孢镰刀菌的拮抗作用、SJ100001菌株抑菌活性成分的来源、SJ100001菌株发酵液的最佳发酵条件及其理化稳定性;通过DPPH自由基清除能力和还原力的测定,探究SJ100001菌株发酵液的抗氧化活性.结果表明,...     

内蒙古额吉淖尔盐碱湖嗜盐古菌的抗生素抗性及分泌的嗜盐菌素的抑菌性

本实验室从内蒙古额吉淖尔湖盐碱土样分离得到一株属于Natrinema属的嗜盐古菌。本文对其进行了抗生素抗性实验以及对其产生的嗜盐菌素进行了抑菌性研究。结果表明诺氟沙星对该菌具有较强的抑菌作用,头孢氨苄对该菌具有微弱的抑菌作用。通过测定抑菌圈的大小表明该菌株对抗生素具有一定的抗性。该菌株所生产的嗜盐菌素对蛋白酶K 较敏感,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑菌作用。     

具有抑菌活性植物乳杆菌细菌素生物稳定性研究

为了测定具有抑菌活性植物乳杆菌产细菌素的稳定性，利用乙酸乙酯萃取得到细菌素 粗提液，采用牛津杯法测定植物乳杆菌细菌素在温度、pH、酶及紫外线4种不同因素的处理下对大 肠杆菌的抑菌效果。结果表明：排除酸和过氧化氢的干扰后，植物乳杆菌细菌素仍具有抑菌性。 植物乳杆菌细菌素在121 ℃高温处理30 min后仍存有81%的抑菌活性；在pH 3.0～8.0内均有良好 的抑菌效果，在pH为8时仍保存69%的抑菌活性；在经由胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜 蛋白酶、胃蛋白酶及蛋白酶K的处理后，抑菌活性分别保留84%、98%、67%、91%、88%和98%；在经 过紫外照射2 h后，该细菌素依然保留83%的抑菌效果。说明植物乳杆菌细菌素抑菌性较稳定，食 品防腐剂可作为开发和利用。     

红茶菌发酵液抑菌活性的研究

红茶菌发酵液是由茶糖水发酵制成的茶饮料,红茶菌膜为细菌、酵母和真菌组成的共生菌．红茶菌发酵液成分比较复杂,采用纸片法和牛津杯法测试了K-A红茶菌发酵液对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑菌效果,结果显示它对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用．抑菌活性主要由有机酸和某种对热敏感的物质提供．研究还发现不同来源的K-A红茶菌和K-H红茶菌发酵特征差异显著．     

解淀粉芽胞杆菌HN对番茄、黄瓜病原菌的抑制作用

为探究解淀粉芽胞杆菌菌株HN对番茄和黄瓜病原菌的抑制效果,以HN为生防菌作用于番茄早疫病病原菌、黄瓜枯萎病病原菌和黄瓜灰霉病病原菌,采用对峙培养、牛津杯法、平板稀释法等观察分析HN对3种病原菌的生长抑制作用,并初步探究其抑菌机理.结果发现,HN对3种病原菌均有显著的抑制作用.对峙培养中,先接种HN后接种病原菌的抑菌效果好于同时接种HN和病原菌的效果.牛津杯法证实HN的抑菌活性物质为一种胞外产物.HN菌体会破坏病原菌的菌丝生长,菌丝出现畸形、扭曲、断裂,无菌滤液也会显著抑制病原菌孢子的萌发,尤其是对于番茄早疫病病原菌.这些结果均表明,解淀粉芽孢杆菌菌株HN能够产生抗菌代谢产物,抑制3种病原菌的菌丝生长和孢子萌发,从而达到抑菌效果.     

一次性微量血沉测定方法的建立

目的建立一次性微量血沉测定方法.方法采用特制小血沉架,用微量吸管测定红细胞沉降率.结果与经典魏氏法比较,具有良好的相关性r=0.9812,经统计学处理P＞0.05,无显著性差异.结论ROC曲线表明临床准确性好.     

十种中草药对雏沙门氏菌的体外抑菌试验

采用琼脂平板打孔法、牛津杯法和药敏片法,检测鸡矢藤、地骨皮、白头翁、大青叶、蒲公英、五味子、乌梅、艾叶、黄连、丹参10种中草药对雏沙门氏菌的体外抑菌效果,并从中筛选具有较好体外抑菌作用的单味中草药。结果表明,五味子和乌梅对雏沙门氏菌的抑菌效果敏感性较强,丹参和黄连的敏感性一般,其他6种中草药均不敏感。试验结果表明,五味子和乌梅等对雏沙门氏菌具有一定的抗菌作用,且不同的中草药抑菌效果不同。该研究为临床治疗鸡白痢以及开发中草药制剂提供了依据。     

黄芩提取物对金黄色葡萄球菌体内外抑菌作用的实验研究

研究黄芩醇提物和水提物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,及体内抗感染保护作用的实验研究。采用体外牛津杯药敏法;小鼠体内抗感染的保护作用法。黄芩醇提取物在体外牛津杯药敏法中按药物作用量150μg/μL、200μg/μL、250μg/μL、300μg/μL抑菌圈直径分别为17 mm、18 mm、18 mm、18 mm,黄芩水提取物抑菌圈直径为8 mm、8 mm、11 mm、13 mm。在体内实验中腹腔注射金黄色葡萄球菌0.5 mL细菌数为1×109,黄芩醇提取物的小鼠存活率为10%,黄芩水提取物的小鼠存活率为40%。黄芩醇提取物在体外对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好。而黄芩水提取物在体外抑菌实验结果中对金黄色葡萄球菌无明显抑菌作用。在体内的抗感染保护作用中黄芩水提取物的保护作用优于黄芩醇提取物。     

小兴安岭松木醋液的生物活性及抑菌性能研究

为研究木醋液的综合利用技术,采用GC-MS法分析了小兴安岭松木醋液的有机成分,有机相中有机酸类占42.90%,酚类占26.68%。通过化学法分离木醋液分别得到活性组分有机酸类和[有机酸类+酚类],采用牛津杯法研究木醋液及分离活性组分对细菌的抑菌效果。结果表明,在较高浓度下对革兰氏性状不同的细菌均有明显的抑菌效果,活性组分[有机酸类+酚类]的抑菌效果普遍高于有机酸类,木醋液的抑菌活性组分是[有机酸类+酚类],以有机酸为主,酚类为辅,木醋液的抑菌效果优于市售化学品类消毒液,是一种很有应用前景的植物基抑菌剂。     

黄芩提取物对耐药性金葡菌的抑菌效果

目的分析中药黄芩不同提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌效果。方法用黄芩的水提液、醇提液、水煎液,依据NCCLS相关标准,通过牛津杯法、微量稀释法测定其抑菌效果。结果黄芩各提取物均对MRSA有抑菌作用。相比之下,黄芩水提物对MRSA的抑菌作用最强,水煎液次之,醇提液效果最差。结论黄芩水提物抑菌效果明显,对MRSA作用强,为临床治疗MRSA感染提供新思路。     

舍曲林对金黄色葡萄球菌多重耐药性的逆转作用

以多重耐药金黄色葡萄球菌为研究对象,通过测定非抗生素类药物舍曲林与不同抗生素作用的最低抑菌浓度、生长速率、时间-杀菌曲线及实时荧光定量PCR定量检测耐药基因mecA和外排泵基因norA的转录水平,探讨舍曲林对金黄色葡萄球菌多重耐药性的逆转作用及逆转机制.结果显示:当舍曲林质量浓度高于1μg/mL时,对金黄色葡萄球菌有抑制作用;亚抑菌浓度(1/2 MIC)的舍曲林和四环素联用时对金黄色葡萄球菌具有杀菌作用;当舍曲林和四环素、环丙沙星、克林霉素联用时对金黄色葡萄球菌具有协同或相加抑制作用,可使其对3种抗生素的敏感性提高75%以上;低质量浓度的舍曲林可显著降低外排泵基因norA和SCCmec基因盒中mecA基因的表达水平.实验结果表明,舍曲林能通过抑制norA和mecA等耐药基因的表达来调控金黄色葡萄球菌的多重耐药性,通过联合抑菌部分逆转金黄色葡萄球菌对多种抗生素的耐药性.     

川贝母组培物总生物碱的体外抑菌试验

为了研究四川名贵道地药材川贝母及其组培物的有效药用成分总生物碱含量与其体外抑菌作用强弱变化规律,采用酶解法与乙醇回流法结合提取生物碱,通过酸性染料比色法测定总生物碱含量,选取典型ATCC质控菌株和临床分离致病菌株作为供试菌,采用牛津杯法测定生物碱对供试菌株的抑菌圈大小,采用96孔板两倍稀释法,测定生物碱对供试菌株的最低抑菌浓度MIC并同时测定最低杀菌浓度MBC.结果显示:川贝母组培物的总生物碱含量超过川贝母的114.07%;川贝母组培物总生物碱含量的快速增长与其体外抑菌作用强弱呈现正比例关系.     

菌株JZ2-1-12的鉴定及其对马铃薯干腐病的抑制活性

对分离自青稞白酒糟醅的菌株JZ2-1-12进行鉴定,研究其发酵液乙酸乙酯及正丁醇提取物的抑菌活性。运用形态学、生理生化特征及分子生物学方法对菌株JZ2-1-12进行鉴定分析;采用牛津杯法,以马铃薯干腐病病原菌为指示菌,测定菌株JZ2-1-12发酵液提取物的抑菌活性。结果表明:(1)菌株JZ2-1-12为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.subtilis);(2)菌株发酵液乙酸乙酯提取物可使马铃薯干腐病病原菌菌丝出现畸形、分叉、断裂及粗细不均的现象,对马铃薯干腐病病原菌孢子萌发具有强烈的抑制作用。本研究可为微生物来源的马铃薯干腐病生物防治制剂的开发提供理论依据和技术支持。     

牙周炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

从７例牙周炎患者病料中分离到６株专性厌氧菌和若干株兼性厌氧菌。通过形态学观察，微量生化试验以及用气相色谱分析其代谢产物等方法，已将６株厌氧菌鉴定到种。随后用江西中医学院研制的数种治疗牙周炎的药物对其中几株主要病原菌做了体外药敏试验，比较了５种药物成分对牙周炎病原菌的作用；测定了５种药物配方对５株厌氧菌的ＭＩＣ及ＭＬＣ。此外，还探索了药液的牛津杯法在厌氧菌抑菌试验中的应用。     

产广谱细菌素乳酸菌的筛选

利用牛津杯双层平板法从70株乳酸菌中筛选得到2株具有较高抑菌活性的乳酸菌LAB30、LAB211。研究这2株乳酸菌的抑菌物质发现：排除酸性产物乳酸、乙酸以及过氧化氢的干扰,LAB211和LAB30仍具有较高的抑菌活性;对其发酵液进行蛋白酶处理,LAB30的发酵液经胰蛋白酶和蛋白酶K处理后抑菌活性均有降低;而LAB211的发酵液经蛋白酶K处理后有所降低,胰蛋白酶处理没有变化,因此可以判定这两株乳酸菌产生的抑菌物质为细菌素。利用特异性引物PCR分析可知,LAB211和LAB30产生的细菌素并非nisin。抑菌谱实验表明,LAB30和LAB211的发酵液不仅抑制革兰氏阳性菌,而且对部分革兰氏阴性菌也有抑制作用。因此LAB211和LAB30产生的是一类广谱细菌素。