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相似文献
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1.
杜晓光 《科技信息》2007,(15):336-337
设计、比较了3种直接提取土壤微生物DNA的方法。实验结果表明,3种方法都可以从土壤中提取到一定的微生物DNA片段,但是使用不同的方法对于DNA提取的产量存在着很大的差异;初提的土壤DNA经进一步提纯后均可用于PCR扩增。其中方法III提取的DNA产量最高,且效果明显,是一种从小量土壤样品中直接提取微生物DNA的理想方法,在土壤微生研究中具有重要的应用价值。  相似文献   

2.
绵羊全血中DNA的微量提纯   总被引:31,自引:12,他引:31  
介绍一种快速,简便地从绵羊冰冻全血中提取高纯度,大分子量DNA,并适合边远地区实际室操作的DNA提取方法。  相似文献   

3.
用4种土壤微生物DNA提取方法提取了3种类型土壤的微生物总DNA,利用分光光度法测定4种DNA的OD260、OD280,并计算和分析DNA提取物的产率和纯度.研究发现:方法4即改良的DNA提取方法,无论是提取DNA的产率,还是提取DNA的纯度,都较其他3种方法高,说明改良的DNA提取方法能够准确有效地提取3种类型土壤的...  相似文献   

4.
土壤DNA提取方法的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
土壤中微生物的数量和种类十分庞大,其中90%以上的微生物利用传统微生物研究方法研究土壤微生物群落的数量和组成几乎不可能.因此,应用物理或化学方法从土壤中提取具有代表性的微生物的DNA,对于揭示生物群落分布的多样性具有重要意义.  相似文献   

5.
4种提取水稻基因级DNA方法的比较   总被引:8,自引:2,他引:8  
对于含有大量硅质及多糖如酚、酯、萜等其它次生代谢产物的水稻,要从其组织中提取高质量的基因组DNA,一般比较困难,作者以水稻叶片为材料,分别采取了简易提取法,CTAB法,QIAGEN公司Dneasy Plant Mini Kits法,Shanghai Sangon公司Genomic DNA Isolation Kits法4种方法提取水稻基因组DNA;并通过质量分数为0.8%琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增的方法所提取的DNA样品进行检测,将它们在DNA的产量、质量和耗费等方面进行简要比较,并根据分子生物学研究工作的实际特点,确定了CTAB沉淀法为最佳方法。  相似文献   

6.
从土壤中快速提取纯化DNA方法的建立   总被引:3,自引:0,他引:3  
比较了从土壤中提取及纯化DNA的不同方法,确立了TENS-乙酸铵提取方法和PVPP柱层析的纯化方法.结果显示:TENS-乙酸铵提取方法对不同土壤均有较好的提取效果,DNA片段长度在23.1 kb以上,且无明显降解;PVPP柱层析的纯化方法比胶回收纯化方法的DNA回收效率高、质量好,可用于PCR扩增.  相似文献   

7.
土壤微生物多样性反映土壤生态系统健康程度,对土壤养分循环发挥决定作用,并在很大程度上影响林地生产力.为研究人工林长期经营对土壤微生物多样性的影响,本研究以杨树人工林为研究对象,取连作林地根际和非根际土壤,采用MOBIO PowerSoil DNA Isolation kit试剂盒提取土壤中微生物基因组DNA,并进行16S rDNA V3区扩增.结果表明:6种杨树人工林土壤中均能提取出微生物基因组DNA,基因组DNA片段大于2 000 bp,且DNA带型清晰完整,无明显降解,为后续土壤细菌的PCR扩增提供了良好模板;6种土壤基因组DNA在电泳图中的亮度不一,其中Ⅰ代林根际土壤(B3)微生物DNA条带最亮,Ⅲ代林非根际土壤(FB18)微生物DNA条带亮度最弱,经检测,B3样品DNA含量约为6.9 ng·cm-3,而FB18仅有2.0 ng·cm-3左右;选用27F/1492R和F338-GC/R518两对引物,采用巢式PCR策略,成功扩增出杨树人工林土壤细菌16S rDNA V3区DNA,片段大小为220 bp左右.  相似文献   

8.
DNA提取是生物学领域最基础的操作,是科研和生产中常用的方法。但是液氮的使用、操作过程的繁琐限制了该技术乃至其他生命科学技术的推广和发展。本文研究了不同方法提取细菌DNA的效果,简少了DNA提取步骤,为核酸提取方法的简化提供了思路。  相似文献   

9.
一种高效的树木总DNA提取方法   总被引:30,自引:6,他引:30  
高质量的DNA是林木分子生物学研究的关键因素之一。在高浓度离液剂异硫氰酸胍(GuSCN)存在的条件下,核酸具有与硅珠(SiO2)颗粒结合、并能在较高温度下被低盐浓度溶液洗脱的特性。基于这一原理建立了一种新的树木叶片总DNA提取方法。此方法操作简单、快速,经过浓度、纯度测定,以及PCR扩增和限制性内切酶消化证明,从不同树木叶片中均得到了高质量的DNA样品。  相似文献   

10.
土壤微生物DNA提取方法的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 研究土壤微生物DNA的提取方法.方法 选用3种常见有效的土壤微生物DNA提取方法与本实验设计的土壤微生物DNA提取方法对麦田土壤微生物DNA进行提取比较.结果 4种方法均能从麦田土壤中提取到片段长度大于22kb的DNA片段,不同方法提取的DNA浓度有一定的差异.提取得到的总DNA不需要纯化就可以用于PCR扩增,使用细菌16S rDNA的通用引物可以扩增得到相应的片段.结论 该法操作简便、提取快速、DNA纯度和得率较高.  相似文献   

11.
采用2种不同的土壤DNA直接提取方法,提取了4种不同类型红壤的微生物总DNA,并对提取的DNA用Sephadex G-200离心层析法进行了纯化。结果表明:2种方法都可以从红壤中提取到分子量大于10kb的DNA的片段,不同提取方法获得的DNA的产量存在较大差异。方法二用冻融进行预处理再结合SDS和溶菌酶的化学裂解方法,是效果较好的DNA抽提方法。其提取DNA产量高,重复性好,适合于土壤少量样品的DNA提取。Sephadex G-200离心层析法能较好地去除土壤中的有机物杂质,DNA溶液由原来的黄褐色变得澄清透明,且不会使提取的DNA断裂或损失,是一种较好的土壤微生物总DNA纯化方法。  相似文献   

12.
The archaeological site of Sampula cemetery was located about 14 km to the southwest of the Luo County in Xinjiang Khotan, China, belonging to the ancient Yutian kingdom. 14C analysis showed that this cemetery was used from 217 B.C. to 283 A.D. Ancient DNA was analyzed by 364 bp of the mitochondrial DNA hypervariable region I (mtDNA HVR-I), and by six restriction fragment length polymorphism (RFLP) sites of mtDNA coding region. We successfully extracted and sequenced intact stretches of maternally inherited mtDNA from 13 out of 16 ancient Sampula samples. The analysis of mtDNA haplogroup distribution showed that the ancient Sampula was a complex population with both European and Asian characteristics. Median joining network of U3 sub-haplogroup and multi-dimensional scaling analysis all showed that the ancient Sampula had maternal relationship with Ossetian and Iranian.  相似文献   

13.
The archaeological site of Sampula cemetery was located about 14 km to the southwest of the Luo County in Xinjiang Khotan,China,belonging to the ancient Yutian kingdom.~14C analysis showed that this cemetery was used from 217 B.C.to 283 A.D. Ancient DNA was analyzed by 364 bp of the mitochondrial DNA hypervariable region I (mtDNA HVR-I),and by six restriction fragment length polymorphism (RFLP) sites of mtDNA coding region.We successfully extracted and sequenced intact stretches of maternally inher- ited mtDNA from 13 out of 16 ancient Sampula samples.The analysis of mtDNA haplogroup distribution showed that the ancient Sampula was a complex population with both European and Asian characteristics.Median joining network of U3 sub-haplogroup and multi-dimen- sional scaling analysis all showed that the ancient Sampula had maternal relationship with Ossetian and Iranian.  相似文献   

14.
运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术测定天麻DNA指纹图谱,从中选择需要的特异DNA片段.经过DNA回收、克隆与鉴定,获得目的DNA阳性克隆.通过DNA测序和生物信息学分析确定目的DNA的新颖性及其所含的生物信息.应用PCR技术研究了该DNA序列在天麻种群中的分布.结果表明,该DNA序列是新发现的,而且含有丰富的生物学信息,值得进一步研究.本研究成果为天麻基因组DNA的开发与利用提供了科学依据,可应用于天麻种群的遗传分类,对其他经济植物包括药用植物的相关研究具有借鉴意义.  相似文献   

15.
16.
采用先水提,后醇提,再酸浸的方法对竹叶进行了综合提取。对竹叶的综合提取中测得:多糖的提取率为1.27%,叶绿素的提取率为3.94%,黄酮的提取率为0.24%,硫酸浸取液的缓蚀效率为89.55%,与0.001 mol/L KI复配后,达97.71%。  相似文献   

17.
VHA273毒株原为MNPV型,经纯系中国棉铃虫扩增而得出约10%的SNPV.高度纯化两型多用体,温和碱解后,酚法抽提SNPVDNA和MNPVDNA.限制性内切酶BglⅡ,BamHI,EcoRI和HindⅢ分别平行酶切两种DNA,依次均得出11,8,14和13条电泳带.比较分析DNA的酶切电泳图谱发现,经同一种限制性内切酶酶切,SNPVDNA与MNPVDNA不仅电泳片段数相同,电泳带位也-一对应.讨论提出:该SNPVDNA与MNPVDNA在分子、亚分子水平上是一致的.  相似文献   

18.
DNA 计算机是当前研究的热点问题,我国的研究刚刚起步,本文详细论述了DNA序列的概念及性质,DNA计算的原理,同时介绍了DNA计算的研究进展概况。  相似文献   

19.
为了研究内蒙古元上都遗址砧子山墓地古代人群的遗传结构及其可能来源,对该墓地古人的DNA进行了抽提、扩增和测序,获得了10个个体的线粒体DNA高可变一区序列.结合现代东亚、北亚、中亚和欧洲人的线粒体DNA数据进行了系统发育分析和多维尺度分析.研究结果表明:埋藏在砧子山墓地的元代居民为汉族人,主要是来自中国北方地区的汉族.本研究为揭示元代的复杂社会结构和人群历史动态提供了新的方法.  相似文献   

20.
概述了DNA计算的基本原理、DNA计算的应用和DNA计算机的研究进展及存在问题,基于DNA生化反应的计算机称为DNA计算机,由于其采用一种完全不同于传统计算机的运算逻辑与存贮方式,DNA计算机在解决某些复杂问题时具有传统计算机无法比拟的优势,目前国际上关于DNA计算和DNA分子生物计算机的研究方兴未艾,极大地推进了DNA计算机的研究过程。  相似文献   

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