Au/CaM自组装膜方波伏安法表征

采用方波伏安法,在包含1 mmol/L[Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-的0.15 mol/L的NaCl溶液中,对Au/CaM膜的电化学行为进行了初步表征。由方波伏安电流响应图可知:CaM可以在Au基底自组装成膜,[Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-在Au/CaM膜电极上发生的是电化学不可逆反应过程。     

不同pH值对Au/CaM膜结合Ca2+的电化学行为研究

采用交流阻抗的方法,在包含1 mmol/L Fe(CN)63-/4-的0.15 mol/L的NaCl溶液中,研究了Au/CaM膜在不同的酸碱环境下结合Ca2 的电化学行为.结果表明:在pH为6.5的环境下Au/CaM膜结合Ca2 的能力要比在pH为4.5环境下的强.     

金属离子竞争结合钙调素的电化学行为研究

为了探讨金属离子与Ca~(2+)对钙调素(CaM)的竞争结合作用,在pH值为6.5含2mmol/L[Fe(CN)6]3-/4-的0.15 mol/L的NaCl溶液中,用交流阻抗法研究了金属离子如Ca~(2+),Cd~(2+),Al~(3+),Fe~(3+)结合及竞争结合钙调素的电化学行为。结果表明:金属离子与CaM的结合能力可以通过溶液中[Fe(CN)_6]~(3-/4-)在钙调素自组装膜修饰金电极上的电化学反应电阻的变化来判断,Ca~(2+),Cd~(2+)和Al ~(3+)都能与CaM结合,Fe~(3+)不能与CaM结合,且Ca~(2+)与CaM结合能力要比Al 3+强;Ca~(2+)在CaM上的结合位点与Cd~(2+)相同,与Al~(3+)不同。交流阻抗法为研究金属离子与CaM的竞争结合行为提供了一个新方法。     

L-半胱氨酸自组装膜修饰金电极的制备及应用

利用共价自组装的方法,制得了L-半胱氨酸单分子层修饰金电极(Cys/Au), 并研究了Cys/Au的电化学特征及Zn2 在Cys/Au上的电化学行为.以Cys/Au为工作电极,建立了一种灵敏的、选择性检测水中痕量锌离子的新方法.在Britton-Robinson(B-R,pH=7.54)缓冲液中,Zn2 在0.2 V左右出现一不可逆的还原峰.峰电流与浓度在1.5×10-9 mol/L～1.5×10-6 mol/L范围内具有良好的线性关系,检测限可达3.5×10-10 mol/L.将该法用于水样中微量Zn2 的测定,8次测量结果的相对标准偏差小于2%,回收率为97.7%～105.4%,符合痕量分析要求.     

自组装膜电极上烟酸的电化学行为及其分析应用

报道了烟酸在 2 -巯基苯并噻唑自组装膜修饰金电极 (MBT/SAM/Au)上的电化学行为 ,建立了新的测定烟酸的电分析方法。在 p H1 1 .92 B-R溶液中 ,烟酸在 MBT/SAM/Au上出现了两对氧化还原峰 ,对应的氧化还原峰电位为 Epa,1=-0 .0 40 V、Epa,2 =0 .5 0 9V、Epc,1=-0 .1 87V、Epc,2 =0 .1 66V;Epc,2 处的还原峰电流与烟酸的浓度在 2 .44× 1 0 -2 ～ 2 .44× 1 0 -7mol/L的范围内呈线性 ,检测限达 1 .2 2× 1 0 -7mol/L,方法用于片剂中烟酸含量的测定 ,结果令人满意     

Au/席夫碱自组装单层膜的电化学行为

用交流阻抗技术对Au／席夫碱自组装单层膜的电化学行为进行研究的结果表明，酸性较强时，席夫碱单分子膜的膜电容随酸性的增强而增大；实验还表明，Au／席夫碱自组装单层膜可与Cu^2 发生作用，其速度随Cu^2 浓度的变化而不同，为深入研究膜的结构、席夫碱络合物的生物活性等打下了必要的基础。     

检测色氨酸的免标记生物传感器研制

利用Au-S化学键的作用,在金基底上组装L-半胱氨酸(L-Cys),通过铜离子的配位作用,构建Cu2 /L-Cys/Au自组装膜.考察该自组装膜的组装条件、电化学特征、重现性与稳定性,研究不同浓度的L-色氨酸中膜的识别能力和识别选择性.结果表明,自组装膜具有对L-色氨酸识别的选择性,在不同浓度的L-色氨酸中,膜的电化学阻抗会发生明显变化.因此,利用该膜对L-色氨酸(L-Try)的选择性识别引起电化学阻抗变化的特性,可构建一种新型的免标记电化学阻抗法色氨酸传感器.     

金表面吖啶橙自组装膜制备及其对蛋白质测定

借Au-S的作用,将半胱氨酸组装在金表面上,利用吖啶橙与半胱氨酸之间静电的作用,将荧光试剂吖啶橙间接组装于金表面,构建的AO/L-Cys/Au双层膜具有强的荧光信号.利用吖啶橙与蛋白质间的相互作用,引起膜表面荧光信号灵敏的变化测定蛋白质,对蛋白质检测下限为2.301×10~(-8)g/L.     

钢表面2-巯基苯并噻唑衍生物自组装膜的缓蚀性能研究

运用自组装技术在钢片表面制备了2-巯基苯并噻唑衍生物的分子膜,并用倒置金相显微镜观察了其自组装分子膜的膜形貌;采用电化学测试技术研究了自组装膜在1mol/L HCl中对钢片的缓蚀性能。结果表明,这种2-巯基苯并噻唑衍生物缓蚀剂自组装膜对钢片有良好的缓蚀能力。     

噻吩羧酸在金表面的自组装膜及其电化学性质

研究了具有平面环状共轭体系的硫杂环化合物噻吩羧酸在金表面的自组装单分子膜及其修饰金电极的电化学行为．以Fe(CN)6^4-/3-为“探针”离子，用循环伏安法对自组装膜的形成、电极界面电容及其组装机理进行了研究．结果是噻吩羧酸在Au上的覆盖度约为95％，金电极的界面微分充电电容由修饰前的0．294μF／cm^2下降到0．167μF／cm^2，由此可见噻吩羧酸在金表面形成了致密的单分子膜．     

番茄碱对棉铃虫毒性分析

本文主要研究了番茄碱对棉铃虫的毒性作用．实验结果表明：（1）用不同浓度的番茄碱（tomatine）浸泡的棉花叶饲喂棉铃虫时，随浓度的增加及时间的延长，对棉铃虫的杀伤力增强．结果显示：饲喂第三天时，1mmol／L的浓度引起48％死亡，2mmol／L时60％死亡，4mmol／L时76％死亡，其IC50为1．78mmol／L．（2）用紫外光谱分析测得虫体内钙调蛋白的含量，结果显示：tomatine对其体内钙调蛋白的影响较大，随tomatine浓度的增加，钙调蛋白的含量逐渐降低．（3）紫外光谱图谱显示：番茄碱与钙调蛋白形成了一种新的物质（其特征吸收峰在190nm-220nm）．说明tomatine对棉铃虫的杀伤作用与钙调蛋白有关，此项研究为进一步探讨tomatine的作用分子机制提供了科学参数．     

Structure of the gating domain of a Ca2+-activated K+ channel complexed with Ca2+/calmodulin

Small-conductance Ca2+-activated K+ channels (SK channels) are independent of voltage and gated solely by intracellular Ca2+. These membrane channels are heteromeric complexes that comprise pore-forming alpha-subunits and the Ca2+-binding protein calmodulin (CaM). CaM binds to the SK channel through the CaM-binding domain (CaMBD), which is located in an intracellular region of the alpha-subunit immediately carboxy-terminal to the pore. Channel opening is triggered when Ca2+ binds the EF hands in the N-lobe of CaM. Here we report the 1.60 A crystal structure of the SK channel CaMBD/Ca2+/CaM complex. The CaMBD forms an elongated dimer with a CaM molecule bound at each end; each CaM wraps around three alpha-helices, two from one CaMBD subunit and one from the other. As only the CaM N-lobe has bound Ca2+, the structure provides a view of both calcium-dependent and -independent CaM/protein interactions. Together with biochemical data, the structure suggests a possible gating mechanism for the SK channel.     

豇豆钙调蛋白cDNA的克隆及序列分析

从豇豆成熟叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,根据钙调蛋白结构基因两端保守序列设计引物,PCR扩增豇豆钙调蛋白基因,克隆到T-easy载体上并测定了其全序列.序列分析结果表明,豇豆钙调蛋白基因由450个核苷酸组成,编码150个氨基酸.与已知的多种植物钙调蛋白基因相比有很高的相似性,核苷酸序列相似性在80%以上,编码的氨基酸序列相似性在90%以上.     

Effects of extracellular calmodulin on pollen germination and tube growth

The effects of calmoddin (CaM) antagonist W7-agarose, anti-CaM serum and exogenous purified CaM on pollen germination and tube growth ofForsythia suspensu were studied. The pollen germination and tube growth were inhibited or completely stopped by CaM antagonist W7-agarose. The addition of exogenous purified CaM stimulated pollen germination and tube growth, whereas the same amount of bovine serum albumin (BSA) had no effect. The inhibitory effects caused by W7-agarose and anti-CaM serum could be reversed completely by the addition of exogenous purified CaM. The tube growth of germinated pollen was also inhibited or completely stopped by W7-agarose. The results suggest that endogenous extracellular CaM initiates pollen germination and tube growth, whereas exogenous CaM enhances the above processes.     

蚯蚓钙调素结合蛋白的研究

以赤子爱胜蚓(Eisenia Foetida)为材料,通过DEAE-Fast Flow离子交换层析、CaM-Sepharose亲和层析,分离纯化得到蚯蚓钙调素结合蛋白(CaMBPs)。纯化的CaMBPs对CaM激活的环核苷酸磷酸二酯酶活性有抑制作用,而且这种抑制作用可通过加入过量的CaM达到完全恢复。SDS-PAGE显示CaMBPs有3条明显主带,在EGTA存在时表现分子量分别为62, 49和30kD。紫外扫描测定含量分别为7.17%,7.31%和51.8%。用生物素-CaM覆盖法检测到3种CaM结合蛋白,与SDS-PAGE结果一致。酶活性测定实验表明在蚯蚓CaMBPs中有Ca²⁺-ATPase活性,但无NAD激酶活性。     

强碱溶液中电沉积金属锌粉技术

碱浸-电解法制备金属锌粉技术具有流程简单、环境友好、适应性强等特点.本文通过能斯特方程计算了强碱性溶液中锌沉积的理论分解电动势,并考察碱浓度、锌浓度、极距、电流密度、搅拌等参数对金属锌粉质量和电流密度的影响,得到最佳的电解条件为：碱浓度4 mol/L,锌浓度30 g/L,极距3 cm,电流密度1000 A/m2,不搅拌.在最佳条件下电解得到的金属锌粉,全锌含量为97.38%,金属锌含量为96.79%,基本达到《锌粉的质量技术要求（ GB/T6890-2000）》的一级标准.     

铂微粒修饰固体石蜡碳糊电极对过氧化氢的电催化特征及分析应用

研究铂微粒修饰的固体石蜡碳糊电极(Pt-SCPE)对H2O2的电催化行为。在pH值4.6的柠檬酸盐-0.03 mol/L硝酸钾溶液中,用该电极H2O2在+0.18V(vs．SCE)可产生灵敏的还原电流,线性范围为1.0×10-1 mol/L～3.0×10-7 mol/L,检出限为7.5×10-8 mol/L。Pt-SCPE与液体石蜡碳糊电极比较,在峰电位、线性响应范围、检出限方面有更好的结果。用该电极测定样品中的过氧化氢,获得满意结果。     

钙离子拮抗剂治疗高血压病患者过程中细胞内外钙调素水平的变化

从分子水平研究钙离子拮抗剂治疗高血压病的机制。用反转录聚合酶链反应法测定淋巴细胞内钙调素（ＣａＭ）基因的ｍＲＮＡ转录水平以及用ＲＩＡ法测定细胞外（即血清）ＣａＭ浓度,借以观察在用钙离子拮抗剂治疗高血压的过程中,细胞内外ＣａＭ水平的改变。发现随着正规服用钙拮抗剂治疗时间的延长,高血压患者淋巴细胞内ＣａＭ基因ｍＲＮＡ的转录水平亦受到抑制。服用钙拮抗剂时间长于３个月者,ｍＲＮＡ的转录水平显著降低（Ｐ＜０．０１）,而治疗时间在１个月之内者,ＣａＭ基因的转录水平无明显变化（Ｐ＞０．０５）。对于细胞外ＣａＭ的水平,在服用钙拮抗剂治疗时间＜１个月者,血清ＣａＭ浓度下降,而长期服用钙拮抗剂的患者则相对增高,但均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。在用钙拮抗剂治疗高血压的过程中,细胞内和细胞外ＣａＭ的水平均发生变化。用钙离子拮抗剂治疗高血压病长于３个月者,细胞内ＣａＭ基因的ｍＲＮＡ转录水平明显受到抑制,而细胞外ＣａＭ浓度则无论服用钙离子拮抗剂时间长短,变化均不显著