天然抗癌药物-紫杉醇

紫杉醇是目前最新的具有很好疗效的抗癌药物，本文对自紫杉醇发现以来的研究进展进行了比较详尽的综述。包括以下几个部分：1．紫杉醇的发现和历史：2．紫杉醇的药效；3．紫杉醇的来源；4．紫杉醇的生物合成途径及其相关酶基因的研究。     

细胞培养生产紫杉醇研究进展

紫杉醇是红豆杉植物所含有的最为有效的抗癌药物．介绍了对当前国内外利用红豆杉细胞培养生产紫杉醇的最新研究进展,其中着重介绍了提高紫杉醇含量的各种研究方法和研究技术,同时对细胞培养生产紫杉醇的规模化生产做出展望．     

陕西省秦巴山区红豆杉中紫杉醇含量研究

采用高效液相色谱法测定了陕西省秦巴山区14个县采集的红豆杉样品中的紫杉醇含量.结果表明:树皮中紫杉醇含量为63～142 mg/kg;叶中紫杉醇含量为13～135 mg/kg;幼枝和木质部中几乎不含紫杉醇.相同年龄枝和叶中紫杉醇含量差异较大;一、二年和三年生枝上叶中紫杉醇含量以三年生最高,一年生最低.不同县生长的红豆杉叶中紫杉醇含量以柞水县最高,树皮中紫杉醇含量以镇安县最高.     

紫杉醇生物合成与营养物质消耗的相关性

为利用现代生物技术生产紫杉醇,研究细胞悬浮培养过程中紫杉醇的生物合成,研究了细胞生长与培养液中主要营养物质的消耗情况。在Gamborg'sB5培养液中加入诱导子,对本实验室诱导筛选出的东北红豆杉B10细胞进行悬浮培养。结果发现,在诱导子的作用下,细胞内紫杉醇的含量在4d内大幅度提高,其中主要是促进了紫杉醇的两种前体化合物向紫杉醇的转化;细胞内高含量紫杉醇影响细胞的生长,可以采用两段培养法来提高紫杉醇的产量;同时,培养液中蔗糖、氮、磷、钾、镁等主要营养物质的消耗与紫杉醇的生物合成也存在密切的联系。     

紫杉醇产生菌的筛选与发酵条件的调控

采用稀释倒平板法分别从云南红豆杉和南方红豆杉中分离出230余株内生真菌,经薄层层析、紫外及HPLC分析初步筛选,确定有5株表现出产紫杉醇的特性,其中1株真菌产率较高,约为1 mg/L.产紫杉醇的内生真菌菌丝体生长和紫杉醇积累之间存在相反的关系.低浓度乙酸铵(＜0.01 mmol/L)有利于菌丝体生长,不利于紫杉醇积累;较高浓度的乙酸铵不利于菌丝体生长而有利于紫杉醇积累.较高浓度的苯丙氨酸和酒石酸铵(＞0.05 mmol/L)有利于菌丝体生长,不利于紫杉醇积累;较低浓度的苯丙氨酸和酒石酸铵不利于菌丝体生长而有利于紫杉醇积累.亮氨酸对菌丝体生长和紫杉醇积累的影响很小;苯甲酸钠抑制菌丝体的生长和紫杉醇的积累.     

非小细胞肺癌细胞A549对紫杉醇耐药机理研究

目的利用非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol,研究其对紫杉醇耐药性的分子机理.方法通过长时间低浓度的紫杉醇处理A549细胞的方法获得其耐药细胞株A549/taxol,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR观察其凋亡基因的表达情况,并通过不同siRNA处理细胞进行基因沉默,研究其在不同遗传背景下对紫杉醇的耐受情况.结果发现非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol的基因表达紊乱,表现为ING5的高表达抑制了凋亡基因Bcl-2的表达水平,而Bcl-2是紫杉醇诱导细胞凋亡所必需的.结论以上结果初探了A549对紫杉醇耐药性的机制,为探寻紫杉醇化疗新策略提供了新的思路.     

微生物发酵法生产紫杉醇研究进展

紫杉醇是目前最新的具有很好疗效的抗癌药物,其化学结构新颖,作用机理独特。生产制备它的方法很多,微生物发酵生产紫杉醇是最好的方法＾〖１〗。本文对国内外期刊有关微生物发酵生产紫杉醇的研究作了综述,并提出了几种有可能提高其表达率的方法。     

紫杉醇对体外大鼠肝细胞影响的实验研究

目的:在通过观察紫杉醇对体外培养大鼠肝细胞的影响来探讨紫杉醇自身毒副作用.方法:采用四唑盐(MTT)比色法及形态学方法观察紫杉醇在不同质量浓度下作用不同时间对肝细胞的影响;采用Hoechst 33258荧光染色法观察紫杉醇作用后,肝细胞的形态变化.结果:质量浓度分别为5、10、20、40、80μg/L的紫杉醇分别作用24、48、72 h后,随着质量浓度的增加、作用时间的延长对体外培养的肝细胞损伤加大、抑制率增加;相同质量浓度的紫杉醇不同作用时间的抑制率无时间效应关系;24 h的IC50质量浓度为28.5μg/L,并能诱导肝细胞发生凋亡.结论:紫杉醇在一定的质量浓度和长时间作用下对肝细胞有细胞毒作用.     

云南红豆杉细胞培养和紫杉醇生产

研究了在固体和液体培养条件下云南红豆杉 (Taxusyunnanensis)细胞系TY6生长和紫杉醇积累的动态及培养基中无机氮源形式对其生长的紫杉醇形成的影响 .结果表明 ,在固体和液体培养条件下 ,云南红豆杉细胞的生长和紫杉醇积累动态相似 ,但液体培养时细胞生长周期缩短了 7d,紫杉醇含量降低了 1倍 ;新形成的细胞需要经过一段时间生长后才有较高的紫杉醇合成能力 ;培养基中硝态氮浓度高有利于细胞生长 ,铵态氮浓度高有利于紫杉醇形成 ;在培养第 1 2d时用铵态氮培养基更换硝态氮培养基可使悬浮细胞的紫杉醇产量达到 8.5mg·L- 1 ,比对照高 1 .6倍     

紫杉醇治疗非小细胞肺癌的护理

目的:对非小细胞肺癌患者以紫杉醇化疗方案进行观察和护理。方法:应用紫杉醇化疗方案治疗非小细胞肺癌12例,选用最新方法和剂量,使用有效畅通的静脉通道,及时进行临床观察及护理。结果:通过相关护理,减轻了毒副反应及其他不适,提高了疗效。结论:应用紫杉醇化疗方案治疗非小细胞肺癌,经过相应护理,毒副反应明显减轻,护理效果好,延长了患者生命质量。     

Effect of Methyl Jasmonic Acid on Baccatin Ⅲ Biosynthesis

Introduction Taxol exhibits a unique mode of action on microtuble proteins which is responsible for the spindle formation during cell division.In contrast to other spindle forma-tion inhibitors such as vinblastine or colchicine,both of which prevent the t…     

TAIL-PCR技术获取树状多节孢融合子的FSTs序列

采用TAIL-PCR技术,对随机选取的 6 个HDF-68阳性T-DNA转化子进行扩增,只利用1 d的时间,即获取了T-DNA标签侧翼序列（FSTs）,对其序列进行分析后,分析了影响TAIL-PCR扩增的主要因素.该项研究,为从T-DNA的突变子中分离紫杉醇产生菌产紫杉醇的相关基因提供了一条可行途径,也为阐明紫杉醇产生菌的代谢途径以及最终构建高产基因工程菌株奠定了基础.     

红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展

综述了近年来红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展, 包括红豆杉细胞培养生产紫杉醇的代谢调节、无机盐、植物生长调节因子、糖分及其它因素对红豆杉细胞生长和紫杉醇生产的影响等.着重介绍了前体饲喂、添加抑制剂和添加诱导子对红豆杉细胞生长及紫杉醇生产的影响.     

利用生物技术生产紫杉醇研究进展

紫杉醇是红豆杉属植物中含有的一种二萜类拟生物碱复化合物,具有独物的抗癌作用机理。     

紫杉醇与褪黑素联合使用对HeLa细胞的生长影响研究

目的：研究紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响。方法：通过生长曲线、集落形成试验观察二者联合应用对HeLa的影响作用。结果：单独应用紫杉醇和褪黑素与二者联合应用其生长曲线、集落形成试验的结果无明显差别。结论：紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响与单独应用二者无明显差别。     

不同培养方式的红豆杉细胞悬浮培养比较研究

进行了批式培养与补料批式培养下的细胞生长及紫杉醇合成动力学比较研究，并优化了红豆杉细胞补料批式培养条件。在批式培养过程中紫杉醇合成在24d达到最大，为4.3mg/L。补料批式培养延长了细胞的生长时间，大幅度提高了细胞干重及紫杉醇的含量。培养条件优化后，最高紫杉醇含量达至11.3mg/L。     

同工酶技术在树状多节孢研究中的应用

通过对紫杉醇产生茵树状多节孢HQD33和从此茵出发经LiCl和紫外线诱变产生的紫杉醇产量正变菌株的过氧化物酶同功酶、脂酶同功酶、淀粉酶同功酶、过氧化氢酶同功酶以及可溶性蛋白和游离组蛋白电泳图谱的分析，得到以下结论：除过氧化氢酶同功酶以外其它酶的同功酶谱都有不同程度的改变，可初步认为，紫杉醇的产生可能与本试验所选的同功酶有关．     

红豆杉细胞在反应器中培养动力学的研究

应用气升式生物反应器及搅拌式生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,得到细胞生长和紫杉醇合成动力学曲线.经过反应器动力学的比较,结果表明红豆杉细胞较适于在机械搅拌式反应器中培养.