嗜酸乳杆菌表面疏水性对其亚油酸异构酶酶活的影响

研究碳源、氮源、生长时间以及生长温度对嗜酸乳杆菌细胞表面疏水性及其亚油酸异构酶酶活力的影响.通过Minitab15软件进行嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶酶活力对其表面疏水性的回归分析,结果表明,嗜酸乳杆菌菌体表面疏水性与其亚油酸异构酶酶活成正相关关系,回归方程为:y=1.5500x+78.163.R2=0.7507说明模型有较高的拟合度,显著性分析P(0.003)P(0.05),结果显著,可作为响应预测.     

痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶的克隆表达 及酶学性质研究

为了研究使用生物酶法制备共轭亚油酸的可行性,笔者对痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶进行了异源表达和理化性质研究。根据大肠杆菌偏好密码子,优化了来源于痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶(PAI)的基因(pai),将克隆的基因在BL21(DE3)中进行表达,纯化目的蛋白,获得重组PAI蛋白。SDS-PAGE结果显示,重组PAI分子质量为48 ku,重组蛋白主要以包涵体沉淀的形式存在。经测定重组PAI在35 ℃、pH 7.0时酶活最高,比酶活为752.3 μmol/(min·mg)。经35 ℃保温2 h,酶活保持90%以上,pH 为6.5～7.0时,PAI具有较好的稳定性,Mn²⁺和Zn²⁺对酶活力分别有22.4%和15.8%的抑制作用,以亚油酸为底物时该酶的K_m值为1.13 mmol/L, k_cat为4.67 s^-1。相关分析表明,痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶性质优良,适合以亚油酸为底物生物催化制备共轭亚油酸。     

亚油酸异构酶高产菌株的选育及产酶条件的优化

共轭亚油酸是一种具有多种生理活性的天然脂肪酸.以嗜酸乳杆菌为出发菌株,经紫外诱变选育,获得1株共轭亚油酸高产菌株并对其发酵条件进行优化.紫外照射选择30 s为适宜的照射处理时间,诱变菌株酶活比原始菌株提高了1.51倍.对培养基的产酶条件进行优化,结果酶活是未优化前的1.1倍.     

人体嗜酸乳杆菌的分离与筛选

从昆明地区初生婴儿粪便中分离到１２株嗜酸乳杆菌,从中筛选出一株生长繁殖快、产酸能力强、凝乳状况及风味较好的优良菌株Ｌ３６,该菌株在牛乳中培养８ｈ活菌数可达１２×１０９个／ｍＬ,并能耐受质量分数为１０％的胆酸盐和０５％的酚．经过二年在牛乳中的连续培养及多次移殖,产酸能力显著提高,在牛乳中培养４８ｈ酸度从初分离时的８７５°Ｔ提高到１１３７°Ｔ,耐氧能力也有提高．     

对平菇浸汁促进嗜酸乳杆菌生长的研究

就平菇浸计可促进嗜酸乳杆菌的生长进行了初步研究．研究结果表明，平菇浸汁对嗜酸乳杆菌在还原脱脂乳中的生长具有明显的促进作用，添加５％～１０％的平菇浸汁，可大大缩短嗜酸乳杆菌生长的世代时间，提高其产酸速率；在３７℃下１０ｈ的培养，其中的活菌数含量较对照组大大提高，可达１０８个／ｍＬ．     

嗜酸乳杆菌生长状况及抑菌特性的研究

用MRS培养基培养嗜酸乳杆菌,测定其生长曲线,并以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为指示菌株,利用杯碟法检测嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果发现在37℃的恒温箱中培养24h后,通过测量抑菌圈大小,可得知嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有明显的抑菌作用。     

影响嗜酸乳杆菌在牛奶中生长因素的研究

对嗜酸乳杆菌（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）在脱脂乳中生长促进剂和脱脂乳中的产酸及总菌数的影响因素进行了研究．结果表明，５％葫萝卜汁、啤酒对嗜酸乳杆菌在脱脂牛乳中的生长有明显作用；另采用嗜热性球菌与嗜酸乳杆菌单独培养，混菌发酵工艺时，增加Ｌ．ａ的比例，发酵产酸加快Ｓ．ｔ与Ｌ．ａ的菌种比例关系发生交化。当Ｌ．ａ：Ｓ．ｔ＝２：１时，Ｌ．ａ的菌数水平起过Ｓ．ｔ。     

嗜酸乳杆菌有氧驯化和糖发酵特性的研究

采用逐渐驯化法对Lactobacillus.acidophilus Ind-1、L.acidophilus Bulqaria和L.acidophilus Lak-cid进行了有氧驯化,获得了L.acidophilus La-XH1和L.acidophilus La-XH3两耐氧菌株.形态学观察,两株菌落呈圆形,隆起,乳白色,光滑,直径1~2 mm.显微镜观察,该菌为革兰氏阳性菌,杆状,两端钝圆,以单个、成双和短链出现,不运动,无鞭毛,无分支.可以发酵单糖和双糖,而对多糖、醇类无发酵性.     

嗜酸乳杆菌对宫颈上皮细胞SiHa细胞的黏附性研究

目的:通过对嗜酸乳杆菌与SiHa细胞(宫颈癌鳞状上皮细胞癌)黏附性能的研究,为开发嗜酸乳杆菌相关微生态制剂提供实验室数据.方法:运用光镜分析嗜酸乳杆菌对传代培养的宫颈上皮细胞SiHa细胞的黏附指数.结果:嗜酸乳杆菌在黏附1 h和2 h后进行效果观察,随着黏附时间的延长,黏附效果在2 h较佳.结论:嗜酸乳杆菌对SiHa细胞的黏附能力强.     

共轭亚油酸异构化技术研究进展

介绍共轭亚油酸(CLA)异构化技术的研究进展,评述异构CLA的碱性催化法、金属催化法和生物酶异构法.认为金属催化法效率高、成本低、经济环保,将成为今后工业化生产CLA的主要方法之一.构建高活性LA异构酶的基因工程菌是实现生物酶异构法产业化的重要前提.     

辛烯基琥珀酸淀粉酯包埋共轭亚油酸工艺的研究

以辛烯基琥珀酸淀粉酯为壁材包埋共轭亚油酸,通过响应面法优化包埋条件,得到共轭亚油酸微胶囊化的最佳条件为芯壁比1∶2.87,包埋时间1.56h,包埋温度42℃,包埋率为93.22％.通过喷雾干燥得到共轭亚油酸微囊粉,在电子扫描显微镜下观察,粉末颗粒饱满紧密,排列整齐,颗粒表面出现无规则凹陷.     

羊腰部脂肪中共轭亚油酸提取及热稳定性

通过以羊腰部脂肪为原料,对比不同有机溶剂对油脂的提取效果,对比并确定油脂较佳提取条件及共轭亚油酸较佳提取效果,同时研究了温度对动物油脂中共轭亚油酸质量分数的影响.结果表明正己烷的油脂提取效果相比于石油醚、环己烷和无水乙醇较好,通过正交试验确定了较佳提取条件为提取温度为60℃,提取时间为4 h,V(溶剂)∶m(油脂)为8 L/kg.在较佳提取条件下,油脂提取率为88.72%,共轭亚油酸质量分数为6.31 mg/g.油脂中共轭亚油酸随温度升高有下降趋势,在130℃时质量分数略有增加.     

乳酸菌发酵产生共轭亚油酸条件的研究

分别用嗜酸乳酸杆菌Lactobacillus acidophilus 1.1854、干酪乳杆菌（L.casei)Bs5、Bs7及乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）L318进行发酵,培养液中添加一定量的亚油酸,发酵物用正己烷萃取纯化,测定其紫外吸收发现,菌株1.1854、Bs5、Bs7均在234nm处得到共轭亚油酸的特征吸收峰,共中菌株1.1854的吸收值最大,在MRSF培养基中加入0.1%亚油酸,接种菌株1.1854,37℃静置培养24h,为产生共轭亚油酸的最佳条件,用脱脂牛奶作培养基,获得了与上述相同的结果,以纯品共圈亚油酸为标准,在234nm处作标准吸收曲线,可计算出发酵物中共轭亚油酸的含量。     

共轭亚油酸的氧化稳定性研究

共轭亚油酸（CLA）是亚油酸衍生的共轭二烯酸的所有异构体的总称,它是具有许多重要生理功能,如抗癌作用,抗粥状态动脉硬化,参与脂肪分解,调节新陈代谢等。本实验采用恒温洪箱法对碱碳化共轭,非内化共轭两种方法合成的CLA产品进行了氧化稳定性检测,结果表明CLA产品的氧化稳定性比其原料红花油要好地多,加入0．02％TBHQ则更进一步提高了产品的氧化稳定性。     

磷酸甘露糖异构酶基因的克隆与表达载体的构建

根据genebank中公布的pmi基因序列通过PCR的方法从大肠杆菌中得到目的片断,并与pGM-T easy载体连接.将鉴定为阳性重组子中的目的基因进一步与植物表达载体pBI121的不同区域连接,成功构建了载体NPTII-pmi-121和pmi-121^△NPTII.     

2株耐酸及耐胆盐嗜酸乳杆菌的分离筛选及其发酵特性研究

从乌克兰发酵食品中分离出2 200株乳杆菌,采用含0.3%胆盐和pH为4.0的MRS平板筛选出2株耐酸及耐胆盐能力强的嗜酸乳杆菌,并命名为La-W2和La-W3.对2株菌在脱脂乳中37℃培养48 h的pH值、滴定酸度和活菌数等发酵特性进行了研究,结果表明:La-W2和La-W3有较强的耐酸性和耐胆盐能力,其发酵特性适于乳酸发酵食品要求.     

菜豆DnaJ-like基因组DNA片段的克隆及其表达分析

以PvSR6 cDNA编码一种菜豆DnaJ-like蛋白，并利用PCR的方法克隆出基因组部分序列。核苷酸列分析表明PvSR6基因在这段编码区无内含子；Southern blot分析表明菜豆基因组中存在多个PvSR6基因拷贝；Northern blot分析结果表明PvSR6是组成型表达蛋白，重金属Hg,Cd,和As，过量的Cu和Zn及受伤，高温，病毒侵袭和水杨酸等均能强烈地诱导其基因在叶片中的表达，表明DnaJ-like蛋白与植物的抗逆性有关。