化学聚集电融合法在新型酵母构建中的应用

在细胞融合过程中化学聚集电融合法,即用PEG作为聚合剂与电融合法连用,取得明显的效果。其条件是:电压11kV;脉冲宽度5μm;脉冲个数3;脉冲时间59s;温度4℃;PEG浓度35％;处理时间30min;处理温度30℃及pH6.从细胞体积,DNA含量,淀粉糖化能力及葡萄糖发酵能力等方面说明,所获得的新型酵母菌株是两亲本的融合株。     

醋酸中超声波声速及莫温度系数

应用脉冲回波重合法（Ｐｕｌｓｅ－Ｅｃｈｏ－ＯｖｅｒｌａｐＭｅｔｈｏｄ）在３０～７０℃温度范围内，精确地测量了醋酸溶液中赵声传播时间随温度的变化关系，并由此计算了醋酸的超声波声速和一级、二级温度系数．     

磷酸钙法转染哺乳动物非贴壁细胞

对一种哺乳动物的非贴壁细胞———ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株Ｐ８１５进行了Ｇ４１８敏感浓度以及甘油耐受性的测定；并通过磷酸钙法用含ＨＣＶＣ、Ｅ１、Ｅ２基因以及筛选标记基因———ｎｅｏｒ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＥ２进行了转染。经Ｇ４１８筛选，获得了Ｇ４１８抗性细胞：Ｐ８１５－ＣＥ２。目前，Ｐ８１５－ＣＥ２细胞在Ｇ４１８选择压力下，已连续筛选８０余天，成功传代１２次，提示转染获得成功。实验表明：被转染细胞是否贴壁，不是决定磷酸钙法转染成功与否的决定因素；为了制备符合转染要求的合适的磷酸钙———ＤＮＡ混合物，所需各试剂的用量应该被优化。     

香菇和桃红平菇属间原生质体融合及子实体形成

广香（ＬｅｎｔｉｎｕｓｅｄｏｄｅｓｏｆＧｕａｎｄｇｄｏｎｇ）４产桃红平菇（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｒｈｏｄｏｐｈｙｌｌｕｓ）为出发菌株，以它们的突变株为直接亲本，用溶壁酶Ｌｙｗｅｌｌｚｙｍｅ分离原生质体，用ＰＥＧ作融合剂进行生质体融合，获得若干株融合体，其中有些融合体已形成子实体，融合体形成子实体的培养时间长（５－９个月）出菇温度广（１３－３０℃），形成的子实体有的象香菇，有的类似平菇；子实体产生的担孢     

大鼠谷胱甘肽S—转移酶P1基因增强因子及其反式作用因子的研究

探讨大鼠谷胱甘肽Ｓ－转移酶Ｐ１基因上游增强子元件及作用于其上特异性结合蛋白与该基因在癌细胞中高表达的关系，用荧光素酶的报告系统在ＨｅＬａ及ＣＢＲＨ７９１９细胞中增强子元件Ｉ（ＧＰＥ Ｉ）及增强子元件Ⅱ（ＧＰＥⅡ）的活性，并将ＧＰＥⅡ的增强子活性部位定位于其上游８４ｂｐ的ＧＰＥⅡ－１区域内。分析对比不同细胞中结合于ＧＰＥⅠ核心序列（ｃＧＰＥⅠ）、ＧＰＥⅡ－１上特异性核合蛋白，发现ＨｅＬａＣＢＲＨ７９     

真空冷冻干燥设备的先进控制系统

对应用于宇航，军事，医药，营养保健食品等领域的真空冷冻干燥设备ＺＬＧ－３０等，用ＯＭＲＯＮ ＰＬＣ／４０Ｐ及单片机８０３２／ＥＵ８１８Ｐ１５构成手动，自动控制系统进行了硬件配置及软件设计；并针对不同冻干物料的工艺要求，采取ＤＲＡ算法和临界比例法两种自适应，自整定控制方法，解决了被控对象主控参数－温度的滞后等问题，实现稳定，可靠的自动化冻干过程。     

大蒜超氧化物歧化酶活性测定及某些性质研究

采用肾上腺素自氧化法对蒜头ＳＯＤ进行活力测定及某些性质研究。结果表明：蒜头粗提取液富含ＳＯＤ，其比活力为４．６０２×１０４ｕ／ｇ蛋白质；它在３０～６５℃及ｐＨ５～ｐＨ９时活力较强；用ＰＡＧＥ分离出两条酶带；能被高浓度的ＫＣＮ、Ｈ２Ｏ２完全抑制，但对氯仿－乙醇液不敏感，说明此酶为Ｃｕ、Ｚｎ－ＳＯＤ。     

担子菌LMPQ39与CSP的原生质体融合

本文以有抗菌作用的担子菌ＣＳＰ的高温敏感性为标记，将ＣＳＰ的原生质体与经热灭活的ＬＭＰＱ３９原生质体融合．融合条件为３０％的ＰＥＧ－６０００，３０℃温度下处理２０ｍｉｎ．融合后得稳定融合子１株（Ｆ１），融合频率为１．１×１０－４．对融合子的初步生化分析表明：其抗菌试验呈阳性；ＣＭＣ（按甲基纤维素）酶活为０．３０８Ｕ；玉米粒上生长良好；其酯酶同功酶谱异于双亲但在双亲谱带范围内，并偏近于ＬＭＰＱ３９．对其外观形态、显微结构及超显微结构的观察表明：融合子的形态结构异于亲株但遍近ＬＭＰＱ３９．     

外源基因导入部分脱壁的大麦细胞及其转基因植株的再生

采用ＰＥＧ法、电击法以及ＰＥＧ＋电击法将带有ｇｕｓ和ｎｐｔⅡ基因的ｐＢＩ１２１质粒导入部分脱壁的大麦细胞，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＧＵＳ和ＮＰＴⅡ蛋白活性检测，证实了外源报告基因已在大麦基因组中整合并在转化细胞中获得表达。     

BYDVCP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性愈伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病基因的质粒Ｐ＾ｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒Ｐ＾ＢｌＡｅｔＳＮ导入融合细胞中。经抗性筛选获得抗潮霉素的阳性克隆并再生植株。对再生植株作ＰＣＲ检测表明，     

SD—5菌株原生质体形成与再生条件的研究

探讨了培养基成分、培养时间、高渗缓冲液成分和ｐＨ、溶菌酶浓度以及酶解温度和时间对苏云金杆菌ＳＤ－５菌株原生质体形成和再生的影响；结果表明，ＳＤ－５菌株原生质形成和再生的最佳条件组合为：ＰＢＧ培养基、３０℃培养１４ｈ再活化５ｈ，以ＳＭＭｐＨ６．５作酶解缓冲液，溶菌酶浓度０．６ｍｇ／ｍｌ，３４℃处理６０ｍｉｎ。     

人血清白蛋白诱发大鼠肝纤维化模型的建立及形态学观察

用人血清白蛋白诱发ｗｉｓｔａｒ大鼠肝脏纤维化模型。成功率可达８９．２３％。不同温度对成功率有显著影响（Ｐ＜０．０１）。同时证明，，不同日龄大鼠对成功率亦有影响。前列腺素ＥＩ（ＰＧＥＩ）的使用是本模型建立的技术关键，形态学观察，纤维化后细胞损伤轻微，汇管区纤维细胞增生明显。有假小叶形成。电镜观察见枯否氏细胞活跃，Ｄｉｓｓｃ腔间隙增宽，多量胶原纤维形成，肝血窦周围贮脂细胞呈增生状态，并见贮脂细胞内胶原纤维形成的现象。细胞组织化学检查，粗面内质网葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６６Ｐ酶）颗粒阴性，致密体，自噬泡酸性磷酸酶（ＡＣＰ）反应阳性；胞膜及胆小管５－核苷酸酶（５－Ｎ酶）反应阳性。     

用TEOSPECVD氧化硅做掩蔽层选择性生长金刚石薄膜

本文研究了在ＨＦ—ＣＶＤ法中，衬底温度Ｔｓ对ＰＥＴＥＯＳ（等离子体增强正硅酸乙酯）氧化硅—硅衬底上选择性生长金刚石薄膜的影响。结果表明：Ｔｓ变化影响ＰＥＴＥＯＳ氧化硅掩蔽层区域和硅表面金刚石晶粒成核密度。Ｔｓ较低时（７５０—８２０℃），ＰＥＴＥＯＳ氧化硅区域成核密度远小于裸露硅表面；随Ｔｓ升高（＞８２０℃），氧化硅区域成核密度增加很快；当Ｔｓ＞８５０℃时，氧化硅区域成核密度超过硅表面。     

人生长激素基因转化的小鼠胚胎干细胞特性的研究

报道了携带人生长激素基因（ｈＧＨ）的逆转录病毒载体ｐＩＮＳ－ＧＨ导入小鼠胚胎干细胞（ＥＳ细胞）ＣＣＥ后，虽然用放射免疫法未检测到ｈＧＨ基因的表达，但是，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交的结果表明，ｈＧＨ基因的确已经整合到细胞基因组中。对转化的ＥＳ细胞克隆进行了体内外分化能力及嵌合能力的检验，结果表明，经过一系列体外操作的ＥＳ细胞，仍具有分化成多种细胞类型的能力。转化的ＥＳ细胞通过显微注射注入囊胚后，能参与受体     

SD－5菌株原生质体形成与再生条件的研究

探讨了培养基成分、培养时间、高渗缓冲液成分和ｐＨ、溶菌酶浓度以及酶解温度和时间对苏云金杆菌ＳＤ—５菌株原生质体形成和再生的影响；结果表明，ＳＤ—５菌株原生质体形成和再生的最佳条件组合为：ＰＢＧ培养基、３０℃培养１４ｈ再活化５ｈ，以ＳＭＭｐＨ６．５作酶解缓冲液，溶菌酶浓度０．６ｍｇ／ｍｌ，３４℃处理６０ｍｉｎ．     

醋酸中超声波声速及其温度系数

应用脉冲回波重合法，在３０－７０℃温度范围内，精确地测量了醋酸溶液中超声传播时间随温度的变化关系，并由此计算了醋酸的超声波声速和一级、二级温度数。     

固定化细胞合成L—苯丙氨酸的酶活及稳定性

研究了固定化酶ＰＡＬ合成Ｌ－苯丙氨酸过程中的酶活力与酶稳定性情况，找出了维持酶活的最佳保存条件，考察了不同氨基供体、肉桂酸、ｐＨ值及酶的不同固定化量等因素对酶反应过程的影响，确定其适宜反应条件为肉桂酸１．５％～２．０％，醋酸铵２～４ｍｏｌＬ－１，ｐＨ８．５～１０，温度３０℃，细胞固定化量为０．１ｇ湿细胞／ｇ固定化颗粒     

碱性蛋白酶Alcalase水解WGP制备ISWGPH的研究

本文采用ｐＨ－ｓｔａｔ法测定ＷＧＰ的水解度。正交实验确定了Ａｌｃａｌａｓｅ水解ＷＧＰ的最佳工艺条件为：Ｔ＝５０℃；ｐＨ－８．５；「Ｓ」＝１０％；「Ｅ／Ｓ」＝２４ＡＵ／ｋｇ蛋白质；ｔ＝３００ｍｉｎ。将ＷＧＰ水解物的Ｐ 到４．０，离 离后上清液，经活性碳处理处理和干燥后得到了等电点可溶性ＷＧＰ水解－ＩＳＧＰＨ。     

解脂假丝酵母胞外脂肪酶的提纯和性质

通过ＤＥＡＥ－ＣｅｌｌｕｌｏｓｅＤＥ－５２和ＤＥＡＥ－ＳｅＰｈａｄｅｘＡ－５０离子交换层析等提纯步骤，对解脂假丝酵母胞外脂肪酶进行了纯化，得到了层析纯样品，比活提高２７．４倍，得率１１％．该酶反应最适温度为４０℃；最适ＰＨ为７．５；等电点约在ＰＨ４．５～５．０之间；８℃以下存放，酶活力损失较少，３０℃以上存放，酶活力有明显损失．金属离子Ｓｒ２＋，Ｂａ２＋，Ｚｎ２＋和Ｍｇ２＋对该酶的激活作用为Ｓｒ２＋＞Ｂａ２＋＞Ｚｎ２＋＞Ｍｇ２＋．Ｃｕ２＋和Ｎａ＋对酶活性有抑制作用．ＮａＮ３对保持酶活性有重要作用．     

固定化酵母细胞连续发酵生产酒精的研究

在３００Ｌ容量塔式发酵器中进行固定化酵母细胞连续发酵酒精的小型中放实验，固定化酵母细胞可连续使用３个月以上，在温度３０℃左右，ｐＨ＝４～５及糖浓度１８％（Ｗ／Ｖ）（１１°Ｂｘ）时，每升固定化酵母可产酒精２５～３０ｇ．