啤酒废酵母的综合利用研究进展

分析了啤酒废酵母中的有效成分及研究利用现状,同时对啤酒废酵母的破壁问题进行了讨论.     

利用啤酒废酵母进行营养型酵母调味品的研究

研究利用啤酒废酵母为原料生产营养型酵母调味品的方法和条件。原料经洗涤、脱苦、自溶、真空浓缩等工序得到含多种营养成分的 ,具有增鲜、增香赋予食品肉香味等功能的、符合国家理化、卫生指标的调味品。该工艺的最佳条件为 :用 0 .5 % (w/w)NaHCO3溶液脱苦0 .5h ,自溶加水量为 2倍 ,自溶剂为 1.0 % (w/w)的食盐并在 (45± 1)℃条件下自溶 4 8h .     

用啤酒废酵母生产营养酱油

在啤酒的酿造过程中,将会产生大量的酵母副产物,这对于一个年产5万t生产规模的中型啤酒企业来说,其废酵母浆可达750t～1000t。现在我国有不少啤酒企业,都是将废酵母直接排放到环境中去,这就造成了严重的环境污染。而实际上干燥的啤酒废酵母含有48％～55％的蛋白质、23％～28％的碳水化合物、6％～8％的核糖核酸、1.5％～2.5％的B族维生素、0.8％～1.2％的谷胱甘肽,以及丰富的氨基酸和众多的矿质元素,可以用来生产风味独特的营养酱油,变废为宝。     

利用大孔树脂从啤酒废酵母中分离谷胱甘肽

利用大孔树脂D001分离纯化还原型谷胱甘肽,其最佳试验条件为：pH值4.5、浓度为0.02 mol/L的磷酸缓冲液平衡,pH值7.5、浓度为0.02 mol/L的磷酸缓冲液洗脱,洗脱流速为2.0 mL/min.此法所得到的粗品颜色为白色,经高效液相色谱分析,其GSH质量分数为28.47%,平均收率为71.6%.     

微波辅助法提取啤酒废酵母多糖的工艺研究

运用微波辅助技术,优选啤酒废酵母多糖的最佳提取工艺,以多糖提取率作为考察指标,采用单因素分析和正交试验对啤酒废酵母多糖的提取工艺条件进行优化。啤酒废酵母多糖最佳提取工艺条件为:微波时间为10min,微波功率为540W,浸润时间为1h,多糖得率为13.27%。与常规水提取法相比,微波辅助提取法具有提取时间短、效率高、节约能源的优点。     

从啤酒废酵母中提取谷胱甘肽的条件优化

采用热水抽提法,综合考察提取条件对谷胱甘肽和杂质蛋白质溶出率的影响,对从啤酒废酵母中提取谷胱甘肽的工艺条件进行了优化．研究了pH、温度、时间和料水比对产品谷胱甘肽和杂质蛋白质提取量的影响,进行了单因素和正交实验设计,得到了最佳的热水抽提条件：温度70℃,pH2．25,时间15min,料水比1：4．     

芦荟超氧化物歧化酶(SOD)的分离纯化研究

采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100凝胶层析和DEAE-52柱层析,分离纯化了芦荟(A.vera L.)超氧化物歧化酶,纯化倍数为56倍,回收率为54%,比活力为643(U/mgpro),酶的最适pH值为8.2,最适温度在40~55℃,KCN和H2O2能抑制酶活性。实验表明:芦荟中的SOD属Cu、Zn-SOD。     

玉米超氧化物歧化酶(SOD)的分离及纯化

用硫酸铵分级沉淀、葡萄糖凝胶过滤及离子交换柱层析从玉米中分离纯化SOD,并采用考马斯亮蓝G-250法测蛋白含量,NBT光还原法测定SOD酶活性,得到酶比活力为115.522U/mg.Pr,回收率为1.02%,提纯倍数7.77的SOD.同时进行了蛋白染色、SOD酶活性染色及非变性凝胶电泳(PAGE)研究,得到了电泳均一的SOD酶.     

双孢蘑菇子实体超氧化物歧化酶(SOD)的分离纯化及部分性质

采用硫酸铵分级盐析、DEAE-Cellulose-52离子交换柱层析、Sephadex G-150分子筛柱层析分离纯化了双孢蘑菇(Agaricus bisporus)子实体超氧化物歧化酶.纯化了31倍,回收率为10.51%,纯酶比活力为5 512.6 u/mg,酶的最适作用温度为25 ℃,最适pH值为8.0,酶在25 ℃以下比较稳定,亚基分子质量为21 kD,全酶分子质量为43 kD, 该酶由2个相同的亚基组成.     

酵母降胆固醇药物筛选模型的建立与应用

根据酵母和人类在固醇代谢机制方面的高度保守性,通过构建不同的麦角固醇合成相关基凼缺失菌株建立了一种新的基于酵母菌的降胆固醇药物筛选模型,并以作用机理明确的药物洛伐他汀和吉非罗其作为对照标准,探索了本模型对降胆固醇药物的筛选条件．进而利用本模型对临床报道有降胆固醇作用的传统中药：丹参、山楂以及成分明确、疗效显著的复方亚油酸胶囊和月见草油胶丸进行了筛选试验．结果验证了利用本模型筛选药物的可行性,并初步分析了上述药物可能的作用机理．     

人类超氧化物歧化酶在酿酒酵母系统中的高效表达

超氧化物歧化酶(SOD)是一种在生物界广泛存在的抗氧化酶,在抗衰老、抗肿瘤、抗免疫疾病和电磁辐射上都起着重要的作用．对一从人类胎肝cDNA文库中筛到的SOD基因片段进行重组、克隆,并得到带有启动子PADHZ—GAPDH和终止子TADHI的高效稳定的酿酒酵母表达载体pHC11-hSOD．转化酿酒酵母DCO4后获得工程菌DCO4／pHC11-hSOD．表达产物经破壁后SDS-PAGE电泳检测为20ku的条带;酶活性测定结果表明发酵液有40万U／L的hSOD活性．此外,还研究了工程菌的发酵条件和hSOD产物的纯化方法．纯化产物在SDS-PAGE上和Superdex分子筛检测显示,所得产物的纯度已达95％以上．     

芦荟超氧化物歧化酶的纯化与部分性质

芦荟粗提取液经丙酮沉淀、热处理、DEAE-琼脂糖柱层析和Sephacryl S-200凝胶过滤纯化后得到3种电泳纯的SOD组分,即SOD-Ⅰ、SOD-Ⅱ、SOD-Ⅲ.分子量分别为46000D,35000D,40000D;亚基分子量分别为23000D,17000D,20 000D,说明芦荟SOD三种组分均为二具体,其等电点分别为8.90,7.60,7.35。抑制剂敏感性实验和元素分析结果表明3种芦荟SOD组分均为Fe-SOD.     

饭豆铜锌超氧物歧化酶的纯化及性质

饭豆种子粗提液中有６条Ｃｕ·Ｚｎ—ＳＯＤ活性谱带，经氯仿－乙醇混合液处理，硫酸铵盐析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析被分离，获得了两组ＳＯＤ同工酶组分（ＳＯＤ—１，ＳＯＤ—２）．它们在酶分子结构上可能存在一定差异．ＳＯＤ－１含与粗提液相对的、电泳迁移率较小的活性谱带，它在聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）图谱上的活性染色带和蛋白染色带相互对在；在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳图谱上均呈现单一区带，说明该酶已纯化到均一程度．该酶分子量为３１３００，亚基分子量为１６５００，等电点为４．２，在紫外区的吸收值为２６４．０ｎｍ．该必在０—７５℃范围内稳定．纯化的ＳＯＤ—１比活性为１７８９Ｕ／ｍｇ，ＳＯＤ—２比活性为２８４Ｕ／ｍｇ，ＳＯＤ活力回收率为３２％．     

牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶的纯化及性质

牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶经氯仿－乙醇混合液处理，丙酮沉淀，凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等步骤提取和纯化．纯化酶在聚丙烯酰胺凝胶电脉（ＰＡＧＥ）图谱上的两条蛋白染色带和活性染色带相互对应，在ＳＤＳ—ＰＡＧＥ聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈现单一区单一区带，说明该酶已纯化到均一程度．此酶分子量为３４０００，亚基分予量为１７０００，在紫外区最大吸收值为２５８ｎｍ．该酶对ＫＣＮ和Ｈ２Ｏ２均敏感，在０～７５℃温度范围内对热稳定．纯化酶的比活性为７４６３Ｕ／ｍｇ，纯化１００９倍，酶的回收率为７９％．     

啤酒酵母菌对汞离子(Ⅱ)的生物吸附

对啤酒酵母菌与水相中重金属离子Hg2+的生物吸附情况进行了研究·主要研究了溶液的pH值、吸附时间、菌体用量、Hg2+离子的初始质量浓度、温度等因素对生物吸附效果的影响·试验结果表明:啤酒酵母对水相中的Hg2+具有良好的吸附效果,在pH=3、吸附时间为15min时,对质量浓度为2 6g/L的Hg2+溶液进行吸附,去除率可达96%·啤酒酵母菌对Hg2+的吸附是一个快速过程,在15min时吸附效果最佳,之后有解吸现象的存在·pH值对Hg2+的吸附影响很大,在pH=3～5时吸附效果较好·温度对该吸附效果影响不大,室温下操作即可·     

东方弧菌SOD的分离纯化和特性研究

从东方弧菌５１８菌株的细胞中提取超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）。先以硫酸铵分级沉淀取得粗酶，再经ＤＥ－５２，ＤＥＡＥ－纤维素柱层析，并以５－５００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钾缓冲液作线性梯度洗脱，再次分级沉淀而获纯化的ＳＯＤ，呈棕黄色，其分子量为３８０００道尔顿，为二聚体，亚基分子量为１８５００道尔顿，原子吸收光谱测定其金属辅基为Ｆｅ＾＋＋＋。该酶反应最适温度为２５℃，室温下溶液中很易失活。紫外及可见光吸收光谱测     

微量超氧化物歧化酶邻苯三酚/Vc测活法

在Vc终止剂法的基础上 ,邻苯三酚的加入量由终浓度2mmol/L降低为0.05mmol/L ,并提高反应溶液的 pH值至8.6 ,从而提高了SOD活力测定的灵敏度。使用本方法在SOD样品最大加入量1mL时 ,最低可检测到3.3×10-8 mol/(s·mL)SOD ,比Vc终止剂法灵敏度提高4倍。     

水果超氧物歧化酶活性及性质

采用ＮＢＴ光化还原法对２２种水果进行ＳＯＤ活性测定，结果表明，新鲜水果富含ＳＯＤ，其中菠萝和山楂ＳＯＤ活性最高，克鲜重酶活性超过３００单位，其次是葡萄、枣、桑椹，克鲜重酶活性在２８８—２２４单位之间．酶的比活以山楂最高，毫克蛋白质达２２９．５单位．８种供试水果果皮中ＳＯＤ活性均明显高于果肉．这２２种水果中至少有９种不同的ＳＯＤ同工酶，其中４种同工酶在多数水果中出现．试验表明，水果ＳＯＤ活性在贮存期内均呈下降趋势．菠萝ＳＯＤ的热稳定性、酸碱稳定性高于西瓜ＳＯＤ．水果普遍具有Ｃｕ·Ｚｎ—ＳＯＤ和Ｍｎ—ＳＯＤ，本研究还发现菠萝、蕉柑和枣具有Ｆｅ—ＳＯＤ．