反胶团萃取分离螺旋藻藻蓝蛋白

研究了CTAB/正戊醇-正辛烷反胶团溶液萃取分离螺旋藻藻蓝蛋白的性能.考察了水相离子强度和种类,有机相中表面活性剂浓度和助溶剂浓度等因素对萃取行为的影响,并从反胶团的微观结构予以解释.结果表明:0.04mol/L CTAB/正戊醇-正辛烷(体积比1:4)的反胶团体系用于萃取pH7.0,包含0.1 m01/L KCl的螺旋藻细胞破碎液,藻蓝蛋白萃取率可达96.3%,分配系数达到26.0;采用pH5.0,包含2 mol/L KBr的反萃液反萃藻蓝蛋白,反萃取率可迭90.6%.     

螺旋藻藻蓝蛋白提取及稳定性试验

藻蓝蛋白可用于配制化妆品及各种天然食品或荧光探针标记．本研究用氯化钾溶菌酶法或冻融法破碎螺旋藻细胞壁,盐析,提取藻蓝蛋白,并对其理化特性进行了测定．表明酶法破壁适应于大量藻蓝蛋白制备,冻融法只适应于小量制备．提取率为１３％左右,提取藻蓝蛋白在４０℃以下及ｐＨ４．０～８．５之间表现稳定,４５℃以上有变色现象,荧光性减弱,糖溶液可提高藻蓝蛋白对热的稳定性,光照对藻蓝蛋白影响较小     

水提分离钝顶螺旋藻藻蓝蛋白及其稳定性研究

应用水提法分离钝顶螺旋藻藻蓝蛋白后,考察了螺旋藻细胞破碎液的藻液比、盐离子浓度、pH和环境温度等对藻蓝蛋白分离的影响,并对藻蓝蛋白的耐热性能及耐酸碱性能进行了研究.结果表明：用藻液比为5 g/L及50%（NH4）2SO4进行盐析沉淀,提取藻蓝蛋白的收率可达62.4 mg/g藻粉;螺旋藻藻蓝蛋白在常温时保持稳定,在较高温度时稳定性下降;在中性溶液环境时,藻蓝蛋白的稳定性良好,偏酸或偏碱环境均改变螺旋藻藻蓝蛋白的性能.     

钝顶螺旋藻藻蓝蛋白的提取工艺优化及其纯化研究

以钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)藻蓝蛋白(Phycocyanin)的纯度和回收率为指标,考察溶胀法和冻融法中不同破壁影响因素及活性炭吸附法中活性炭目数、活性炭加入量和吸附时间对藻蓝蛋白粗提的影响,并结合响应面分析法优化提取工艺参数,得到最优破壁条件和活性炭吸附条件。结果表明,溶胀法最优提取条件为料液比1∶50(g/mL),溶胀时间24h,溶胀次数2次,测得藻蓝蛋白纯度为0.47,得率为2.17%;冻融法最优提取条件为料液比1∶50(g/mL),冷冻时间8h,冻融次数2次,测得藻蓝蛋白纯度为0.34,得率为2.19%。活性炭吸附法最优工艺条件为300目活性炭,活性炭加入量0.7g/20mL,吸附时间10min,藻蓝蛋白纯度为0.80,回收率为73.23%。疏水层析法纯化得到食品级藻蓝蛋白(纯度P≥0.7)和医药级藻蓝蛋白(纯度P≥3.0),总回收率为61.15%。因此,溶胀-活性炭吸附-疏水层析三步提纯藻蓝蛋白工艺合理可行,实现了医药级藻蓝蛋白的分离提纯,降低了工业生产成本,具有实用价值。     

不同来源钝顶螺旋藻藻蓝蛋白特性比较

 为更大程度地开发利用鄂尔多斯螺旋藻藻蓝蛋白资源,获得螺旋藻藻蓝蛋白提取及保存过程中的最佳参数,对2 藻种藻蓝蛋白硫酸铵盐析饱和度、热稳定性、酸碱稳定性进行了比较。结果显示,在硫酸铵饱和度达到40%时,2 藻种藻蓝蛋白纯度和藻蓝蛋白提取率均达到最高,且鄂尔多斯钝顶螺旋藻藻蓝蛋白纯度为引进钝顶螺旋藻的1.67 倍,两者的提取率持平。鄂尔多斯螺旋藻藻蓝蛋白对温度较引进种敏感,除25℃时相差不大外,35、45、55℃等条件下均表现出相比引进种更大的纯度降低率,多数为后者的两倍,但即使鄂尔多斯钝顶螺旋藻纯度降低率较大,降低后的纯度仍然比引进种最高纯度大,显示出鄂尔多斯钝顶螺旋藻在藻蓝蛋白上的优势。在工艺及环境条件允许的情况下,提取鄂尔多斯钝顶螺旋藻藻蓝蛋白时,尽量保持在较低温度下操作,如果兼顾提取率和纯度,宜选择55℃以内操作。2 藻种藻蓝蛋白酸碱稳定性上表现出较一致的反应,pH 值5~6 可以保持藻蓝蛋白的最大纯度。     

混合异养螺旋藻中藻蓝蛋白的分离和纯化

为了从螺旋藻中分离和纯化藻蓝蛋白,研究了一种采用硫铵分步盐析,离子交换层析和凝胶过滤层析的分离纯化方法,在硫酸铵分步盐析中,通过对沉淀物的吸收光谱扫描发现,３００ｇ／Ｌ的硫酸铵溶溶能很好除去杂蛋白,而５００ｇ／Ｌ和６５０ｇ／Ｌ的硫酸铵溶液能较好离ｃ－蓝蓝蛋白和别藻蓝蛋白。     

不同碳源培养螺旋藻的生长及其藻蓝蛋白含量

研究葡萄糖、乙酸盐和碳酸盐等作为不同碳源对钝顶螺旋藻的混合培养生长的影响。与无机碳源对比，葡萄糖和乙酸盐能较好地改善钝顶螺旋藻的生长，葡萄糖使之获得最大的生长速率（P＝0．62／o和产生最多的生物量（干重为2.637g/1）；这三种碳源对藻蓝蛋白含量的影响基本一致，约为13010mg／I干重细胞。研究发现，藻蓝蛋白的含量主要受光强度影响。     

极大螺旋藻藻蓝蛋白性质的研究

用凝胶电泳、吸收光谱、荧光光谱、示差扫描量热计（ＤＳＣ）和循环伏安法研究了极大螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｍａｘｉｍａ）藻蓝蛋白的性质，结果表明：该蛋白由大小两个亚基组成，分子量分别为１９ＫＤ和１７ＫＤ。吸收光谱显示，该蛋白在３４８ｎｍ和６２０ｎｍ有吸收峰。其荧光发射峰位于６４６ｎｍ。该蛋白的热变性温度范围在４０℃～５４℃附近。该蛋白的循环伏安扫描曲线显示，当扫描速度为０．１Ｖ／ｓｅｃ时，有一个明显的氧化峰。当扫描速度大于０．２Ｖ／ｓｅｃ时，呈现两个氧化和两个还原峰     

钝顶螺旋藻中藻蓝蛋白的分离纯化及特性研究

为发展新型海洋药物,采用ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００凝胶层析和羟基磷灰石柱层析对人工养殖钝顶螺旋藻中的藻蓝蛋白进行了分离和纯化,得到了藻蓝蛋白纯品。测定了藻蓝蛋白的氨基酸组成和含量。藻蓝蛋白的紫外、可见吸收光谱表明其最大特征吸收波长为２７８,３６０,６２０ｎｍ。得到的藻蓝蛋白经等电聚焦显示为一条带,其等电点为ｐＨ＝４．３。还测量了藻蓝蛋白红外吸收光谱。研究所获得的藻蓝蛋白为后续开展临床应用提供了可靠的样品。     

螺旋藻藻蓝蛋白和藻多糖对人体外周血淋巴细胞功能的影响

从螺旋藻中提取藻蓝蛋白（ＳＰＣ）和多糖（ＳＰＳ）,研究其对人体外周血淋巴细胞功能的影响。实验结果表明,ＳＰＣ和ＳＰＳ能够促进ＰＨＡ刺激淋巴细胞转化的作用,其中ＳＰＳ的促进作用有剂量依存关系。ＳＰＣ和ＳＰＳ能恢复Ｔ细胞受环磷酰胺损伤后Ｅ玫瑰花环形成能力,特别是对活性Ｅ花环（Ｅａ）的形成能力有较好的恢复作用。     

Se(Ⅳ)与藻蓝蛋白相互作用的谱学研究

用吸收、荧光、红外等谱学方法研究了藻蓝蛋白（PC）与Se（Ⅳ）的相互作用．结果表明,SeO3^2-加入后,藻蓝蛋白在620nm处的特征光吸收减弱,并随Se（Ⅳ）浓度和时间的增加而降低,而278和347nm处的光吸收增强;荧光发射和荧光激发也逐渐减弱,而599和629nm处的2个激发峰的相对强度与对照相反．PC在475和662nm处分别出现共振散射峰．Se（Ⅳ）与PC的作用后,在595nm处出现强的共振散射峰,被指认为液相纳米硒粒子与PC生成的缀合物的共振散射峰．红外光谱图中,PC的酰胺Ⅰ带为1653．2cm^-1,为α螺旋,而PC—Se（0）生物缀合物的酰胺Ⅰ带为1647．0cm^-1,属无规则卷曲。     

Se(IV)与藻蓝蛋白相互作用的谱学研究

用吸收、荧光、红外等谱学方法研究了藻蓝蛋白(PC)与Se(IV)的相互作用.结果表明,SeO2-3加入后,藻蓝蛋白在620nm处的特征光吸收减弱,并随Se(IV)浓度和时间的增加而降低,而278和347nm处的光吸收增强;荧光发射和荧光激发也逐渐减弱,而599和629nm处的2个激发峰的相对强度与对照相反.PC在475和662nm处分别出现共振散射峰.Se(IV)与PC的作用后,在595nm处出现强的共振散射峰,被指认为液相纳米硒粒子与PC生成的缀合物的共振散射峰.红外光谱图中,PC的酰胺I带为1653 2cm-1,为α螺旋,而PC-Se(0)生物缀合物的酰胺I带为1647 0cm-1,属无规则卷曲.     

螺旋藻培养条件响应面法优化的研究

设计了用于螺旋藻培养的新型气升式光生物反应器，并用响应曲面法对其培养条件进行优化。实验选取影响螺旋藻生长的4个关键因子即光照强度、通气量、培养时间和接种量，并对其最佳水平范围进行研究，建立了以藻体干重为响应值的二次多项式方程。实验结果表明，4个因子对藻体生长的影响大小依次为光照强度、培养时间、装液量、通气量；对方程解逆矩阵可知，当光照强度、通气量、培养时闻和接种量分别达最佳水平44001x、212．2L／h、8．8d和7．2L时，DW最大值为1．277g／L。     

螺旋藻藻蓝蛋白对人血癌细胞K562生长的影响

Ｔｈｅｒｅｈａｓｒｅｃｅｎｔｌｙｂｅｅｎａｓｕｒｇｅｏｆｉｎｔｅｒｅｓｔｉｎｍａｒｉｎｅｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓ,ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙｓｅａｗｅｅｄｓ,ａｓｓｏｕｒｃｅｓｏｆｂｉｏａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ.Ａｍｏｎｇｔｈｅｓｅｓｔｕｄｉｅｓ,ｉｔｈａｓｂｅｅｎｓｈｏｗｎｔｈａｔｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｏｆｓｅａｗｅｅｄｓｕｃｈａｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ｐｅｐｔｉｄｅａｎｄｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｃａｎａｆｆｅｃｔｔｈｅｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ.Ｍ…     

羟基磷灰石纯化藻蓝蛋白的优化研究及机理分析

为了对巢湖蓝藻进行更高效地资源化利用,文章以羟基磷灰石为金属螯合亲和色谱填料,以透析脱盐后的藻蓝蛋白初步纯化溶液为样品,考察了洗脱液pH值、离子强度、洗脱速度对藻蓝蛋白纯化的影响.通过响应面确定了最佳工艺参数为洗脱液pH值6.32、离子强度0.08 mol/L、洗脱速度3.56 mL/min.同时对藻蓝蛋白进行紫外-可...     

海生红藻R-藻红蛋白和隐藻藻蓝蛋白光吸收系数测定

选用Bradford法和Lowry法,以牛血清蛋白和γ-球蛋白作为标准蛋白,分别对从海生红藻异管藻（Heterosiphonia japonica）和多管藻（Polysiphonia urceolata）以及蓝隐藻（Chroomonas placoidea）中分离纯化的异管藻R-藻红蛋白（HR-PE）、多管藻R-藻红蛋白（PR-PE）、蓝隐藻藻蓝蛋白（Cr-PC）进行了蛋白浓度及其特征吸收峰的光吸收系数测定.根据2种方法和2种蛋白针对3种藻胆蛋白的测定结果以及影响结果的主要因素进行了细致地分析和比较,Lowry法是进行藻胆蛋白,尤其是六聚体藻红蛋白浓度及光吸收系数测定的更适合、准确的检测方法;在进行同类或相同藻胆蛋白之间相对含量、比例的定量分析时,Bradford法是一种更便捷的测定方法.由于藻胆蛋白光吸收系数值与选用的蛋白定量检测方法及其所用的标准蛋白直接相关,在使用和比较藻胆蛋白光吸收系数值时必须明确检测方法和标准蛋白,否则藻胆蛋白光吸收系数值将不具有可比性.     

钝顶螺旋藻藻胆蛋白的分离纯化及特性研究

钝顶螺旋藻藻胆蛋白的分离纯化及特性研究杜林方，付华龙（生物系）１材料与方法１．１实验材料钝顶螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓ）由武汉水生所购买，生长于修改的Ｚｏｒｒｏｕｋ氏培养基中￣［４］，２～１０Ｌ，３０℃培养。１．２藻胆蛋白粗提物的制...     

螺旋藻藻蓝蛋白对小鼠免疫功能的影响

研究了螺旋藻藻蓝蛋白（Ｃ－ＰＣ）对正常和异常（经氢化可的松处理）的小鼠免疫功能的影响。实验结果表明,腹腔连续注射１５ｄＣ－ＰＣ,剂量为１００和２００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１能促进ＰＨＡ诱导的正常小鼠脾淋巴细胞的增殖,促进空斑形成细胞的溶血能力和血清中溶血素的含量,能显著对抗氢化可的松对机体免疫功能的损伤作用。