大白鼠肝中氨基酸活化酶活性与饲料的关系

Miller,Williams,Mcquarrie等曾研究过动物的饲料除去蛋白质后,或除去某几种主要的氨基酸后,对酶活性的影响。许多种酶的活性随着饲料中蛋白质的缺乏而降低,也有的酶仍维持着一定水平的活性。对于主要氨基酸的缺少,个别的酶所受的影响也各不相同,如肝内的精氨酸酶(arginase),乌头酸酶(aconitase),和肾内的D-氨基     

COPD患者肺组织中活化转录因子对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶的影响

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织中活化转录因子(Klf2)对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)的影响及作用机制.方法收集行肺癌根治术30例患者的无癌细胞浸润外周肺组织标本,根据是否伴COPD分为COPD组和对照组,采用原位杂交和免疫组化检测两组肺组织标本中Klf2,γ-GCS mRNA和蛋白表达情况,并分析其与吸烟指数和肺功能的相关性.使用终浓度为10%的烟草烟雾提取物体外诱导人支气管上皮细胞氧化应激模型,Elisa法检测其中谷胱甘肽含量;使用Klf2特异性抑制剂anti-92a转染支气管上皮细胞,RTPCR和Western blot检测各组细胞中Klf2,γ-GCS mRNA和蛋白表达变化.结果 COPD组患者肺组织中Klf2,γ-GCS mRNA和蛋白的相对表达量均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05).相关性分析显示:Klf2mRNA和蛋白表达与γ-GCS呈正相关;Klf2,γ-GCS mRNA和蛋白表达水平均与吸烟指数、FEV1%、FEV1/FVC呈正相关.模型组支气管上皮细胞中谷胱甘肽含量明显高于空白对照组,差异具有显著统计学意义(P0.01);支气管上皮细胞中Klf2,γ-GCS mRNA和蛋白相对表达量模型组明显高于空白对照组;NC+模型组明显高于NC组;Klf2抑制剂组明显低于空白对照组、NC组;Klf2抑制剂+模型组明显低于Klf2抑制剂组、NC组、模型组,上述各组间差异均具有统计学意义(P0.05).结论 Klf2通过调控COPD支气管上皮细胞中γ-GCS的表达而发挥抗氧化作用.     

蕨菜采集加工过程中过氧化物酶活性的变化

采用愈创木酚法对蕨菜鲜样及加工过程中各阶段的蕨莱样品过氧化物酶(POD)活性进行测定.结果显示,蕨莱由鲜样王成品的POD活性分别是:U1=6 889.796 U/g·min.U2=946.938 8 U/g·min,U3=653·061 2 U/g·min,即鲜样POD活性>盐渍前期样品POD活性>盐清后期样品POD活性.     

煤矸石废弃物的活化及其活性分析

研究徐州煤矸石的活化过程和活化后煤矸石的活性以及活化机理，为煤矸石废弃物的资源化提供理论基础。采用热处理方法活化煤矸石废弃物，并采用在碱溶液中的离子溶出和测定其石英结晶度的方法研究活化煤矸石的活性。研究结果表明，煤矸石废弃物受热后能够由稳定态向介稳态转变的物相成分是高岭石；经热处理活化后可激发产生活性，活性组分是活性SiO2和Al2O3；采用测定石英结晶度的方法判断材料的活性具有一定的准确性；700℃下煅烧是徐州煤矸石热活化的最佳工艺参数。     

混合氨基酸铜络合物的杀菌活性

针对各种单一氨基酸铜络合物，混合氨基酸铜络合物及一些重金属混合氨基酸络合物，分别测定了它们对白粉病原菌、稻瘟病原菌和小麦根腐病原菌的毒性，实验结果表明，在混合氨基酸铜络合物中起主要杀菌作用的是谷氨酸铜、甘氨酸铜、丙氨酸铜和苏氨酸铜。     

重组人组织激肽释放酶结合蛋白抗氧化活性及抗凝活性分析

探究Kallistatin蛋白在体外3种细胞模型中的抗氧化活性及其体外抗凝、溶栓活性.首先,在体外构建HBZY-1,HaCaT,HTR8-s/Vneo细胞的H2O2,Fe-HQ氧化应激模型,并将Kallistatin蛋白应用于构建的氧化应激模型中.然后,采用多浓度梯度法筛选最佳氧化剂浓度,利用细胞活性实验检测以上3种细胞的活性,并进行体外抗凝、溶栓实验考察.结果表明:在H2O2模型中,当Kallistatin蛋白浓度为0.6μmol·L-1时,3种细胞活力与对照组(LD-Hanks缓冲液)相近,低剂量蛋白组(0.06μmol·L-1)的细胞活力明显低于高剂量蛋白组细胞;在Fe-HQ模型中,不同细胞中Kallistatin蛋白剂量的作用不同,Kallistatin蛋白具有体外抗氧化活性,不同应激条件下不同细胞对蛋白剂量的依赖性不同;体外抗凝、溶栓实验表明此蛋白具有相关活性.     

ESB高效氨基酸活性饲料酵母

ESB高量氨基酸活性饲料酵母(简称ESB酵母)是应用生物技术研制开发的饲料酵母新产品。与国内外同类产品相比,在发酵原料相同的情况下,其菌体蛋白提高33.85％,蛋氨酸、赖氨酸和色氨酸分别提高127.69％、76.61％、168.5％,氨基酸总量提高35.79％,并含有丰富的B族维生素、免疫因子和多种消化酶。它的活细胞比     

非天然D-型氨基酸生物转化中酶的纯化及其基因序列

D-海因酶 (D- Hydantoinase,HDTase )和 N -氨甲酰基 - D-氨基酸酰胺水解酶 (D- Carbam oylase,DCase )是医药和食品工业上用于生物转化 D-型氨基酸的酶。为了用人工酶替代现用的天然酶转化工艺 ,我们用热变性、硫酸铵分级及 Q - Sepharose、Phenyl- Sepharose、Superose12等多步柱层析 ,从现用菌株 No.2 2 6 2中纯化了 HDTase和 DCase,二酶均达到 SDS- PAGE纯 ,经 N -端序列分析 ,HDTase和 DCase的 N -末端氨基酸序列分别为 :MDKL IKNGTI和 MTRQKIL AF。首先 ,根据酶的 N -末端氨基酸顺序推论并合成了正向多核苷酸简并引物 ,然后按蛋白质数据库资料 ,在比较不同菌株氨基酸残基同源性基础上 ,化学合成了数对反向多核苷酸引物 ,以菌株 No. 2 2 6 2基因组 DNA为模板 ,经 PCR扩增获得了 HDTase的部分基因序列 (～ 70 0 bp )和 DCase的全部基因序列 (912 bp ) ,为使人工酶用于非天然 D-型氨基酸的生物转化奠定了基础。     

黑大豆中过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性的初步研究

分析了黑大豆的干种子及萌发种子各器官的过氧化物酶和超氧物歧化酶的活性，并与黄大豆进行了比较。结果表明；黑大豆干种子及萌发种子的种皮中ＰＯＤ和ＳＯＤ活性均显著高于黄大豆；而子叶为绿色的药用黑豆又显著高于一般黑大豆；萌发的三天的子叶中ＰＯＤ活性在黑大豆与黄大豆之间相差不大，     

超高压处理对橙汁中过氧化物酶活性的影响

为了推进超高压钝酶技术的工业化进程,以橙汁中的过氧化物酶(POD)为研究对象,通过实验对影响超高压钝酶效果的处理条件(压力、保压时间、pH、温度)进行了考察与评价.在处理温度为室温、保压时间分别为5和20min的条件下,200MPa以下压力范围内POD被激活,其活性随压力的增加出现上升趋势,当压力大于200MPa,随着处理压力增加酶活性下降;压力较高时(500MPa)酶的活性随着保压时间的增加而降低,而在较低的压力(200MPa),其活性随着保压时间的增加而升高;酶活性随pH的增大先上升后下降;随着温度的上升,酶活性降低.实验结果表明,压力、保压时间、pH值、温度是影响超高压钝酶效果的重要因素.     

SDS溶液中核糖核酸酶A的结构及活性研究

用紫外可见分光光度法研究了室温条件下,RNase A在SDS溶液中紫外特征吸收峰的变化和这一变化过程的△G,分析了SDS对RNase A结构的影响,同时研究了在SDS溶液中RNaseA催化2’,3’-环腺甘酸单磷酸水解反应,得到了不同SDS浓度的kcst和Km,分析了SDS对RNaseA活性的影响．结果表明,随着SDS的浓度的增加,RNase A的结构逐渐瓦解,直至完全失活．这主要是SDS与RNase A之间的静电和疏水相互作用的协同效应的结果,     

芽孢杆菌代谢过程中孢外酶的活性测定

用分光光度法测定了芽孢杆菌代谢过程中孢外酶的活性，得出酶活力随时间变化的曲线，并计算了活力增长常数，３７℃时ｋ＇为０．０１３４／ｍｉｎ，此结果与前人用ＬＫＢ－２２７７生物活性仪测出的热谱曲线，生长速率常数ｋ＋分相近。     

酵母中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的分析

分解H2O2和有机过氧化物的含硒谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GSH-Px)活性和只分解有机过氧化物的不含硒谷胱甘肽过氧化物酶(non-Se-GSH-Px)活性都存在于酵母中.酵母在无氧的条件下培养,Se-GSH-Px活性减弱,non-Se-GSH-Px活性增强;在含有H2O2或CuSO4的培养基中生长,两种形式的谷胱甘肽过氧化物酶的活性均增加;在含硒的培养基中生长,只有Se-GSH-Px活性增加.实验结果表明,GSH-Px在酵母抗氧化作用中起着重要的作用.     

家鸽延髓呼吸中枢的初步研究

在39只家鸽用横切脑干、电刺激、电损毁和记录神经细胞放电的方法研究了延髓各部与呼吸调控的关系。实验发现刺激延髓前部(A1.0-P1.0)主要引起程度不同的呼吸抑制作用,刺激延髓中后部(P1.5-P2.5)两侧可引起显著的呼吸加强或抑制反应;在P1.5-P2.5脑段两侧区域进行损毁或在此范围内(而不在此范围之前)进行横切,可使动物呼吸停止而死亡;在P1.6-P2.5两侧网状结构中记录到了呼吸相关性神经元的放电活动。实验结果表明家鸽延髓呼吸中枢位于中后部(P1.5-P2.5)两侧网状结构中。     

家鸽红细胞血型的初步研究

采用2种方法对家鸽的红细胞血型进行了初步研究．方法一：血清平板凝集试验．取家鸽的红细胞分别与家兔以及其它家鸽的血清进行混合,结果有些家鸽的红细胞与有些家兔的血清发生了凝集反应,而另一些则不发生;家鸽的不同个体之间也存在红细胞凝集现象．这表明家鸽的红细胞表面存在凝集原．方法二：异种动物免疫．将家鸽的红细胞注射到家兔体内,然后取家兔产生的免疫血清与该家鸽的红细胞混合,结果发生了凝集反应．这进一步表明家鸽的红细胞表面存在凝集原,即家鸽具有红细胞血型．     

内切酶xhoI部分氨基酸残基的化学修饰

限制性核酸内切酶xho I能够被巯基试试剂和修饰赖氨酸、精氨酸残基的试剂抑制,酶的抑制作用遵守假一级动力学,底物λ-DNA对酶的抑制作用有强烈地保护作用,这些资料表明xho Ⅰ含有对酶活性至关重要的必须的赖氨酸残基、精氨酸残基和巯基。     

多元有机载体固定化酶水解氨基酸研究

选用反应性单体丙烯酰胺(AM)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHM),以N,N’-亚甲基(双丙烯酰胺)(GM)为交联剂,以甲酰胺为制孔剂条件下进行反相悬浮聚合,得到珠状共聚物载体,该载体是一种新的载体形式,在国内外的相关文献中均未见报道.将载体分别用吸附和包埋两种方法固定化中性蛋白酶,测得吸附和包埋两种载体固定化酶量分别为0.328 0和0.026 4 mg/g,固定化酶的活性分别于175.63~484.72μ/g和50.95~82.25μ/g之间变化,比较吸附法和游离态酶水解蚯蚓体蛋白的氨基酸含量,将中性蛋白酶用吸附法固定在所合成的载体上可得到高活性的生物催化剂.     

在鹰嘴豆的果实组织中光合~(14)CO_2固定产物与有关酶的活性

尽管许多豆科植物,包括鹰嘴豆的果实组织进行光合CO_2的同化是众所周知的,但是,对于在这些组织中CO_2固定的途径,特别是对磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(EC4、1、1、31)的作用还不够清楚。我们己从鹰嘴豆(Cicer arictinum L)的荚果壳、种皮(果实组织)及其苞叶中测定到一些卡尔文循珠和C_4代谢的主要酶的活性,光照和黑暗中~(14)CO_2固定速率和光合CO_2固定的最初产物。对1,5——二磷酸核酮糖羧化酶(EC4、1、1、39)和其它卡尔文循环的酶,即NADP~+——甘油醛—3—磷酸脱氢酶(EC1、2、1、13),NAD~+——甘油醛—3—磷酸脱氢酶(EC1、2、1、12)和5——磷酸核酮糖激酶(EC2、7、1、19)的活性和磷酸烯醇式丙酮羧化酶以及其他C_4代谢的酶,也就是说,对NADP~+—苹果酸脱氢酶(EC_1、1、1、82)、NAD~+—苹果酸脱氢酶(EC1、1、1、37)NADP~+—苹果酸酶(EC1、1、1、40)、NAD~+—苹果酸酶(EC1、1、1、39)、谷氨酸草酰乙酸转氨酶(EC2、6、1、2)和谷氨酸丙酮酸转氨酶(EC2、6、1、2)的活性进行了比较。一般说来,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶和其他C_4代谢的酶,在荚果壳和种皮中的含量比在叶片中的含量为高。荚果壳和种皮在光照和黑暗中~(14)CO_2固定的速率高于叶子。说明在果实组织短期的~(140CO_2同化,象主要标记产物一样产生苹果酸,标记的3—磷酸甘油酸却较少,而在叶片中主要产物合成为3—磷酸甘油酸。显然,鹰嘴豆在果实组织中是利用磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶再固定呼吸放出的CO_2。     

机械活化对铁尾矿火山灰活性的影响

为了提高铁尾矿的火山灰活性,通过PSD,XRD,SEM等分析手段研究不同活化时间和球料比对铁尾矿砂浆活性指数的影响.实验结果表明:机械活化后的铁尾矿具有潜在的胶凝性能,其活性指数受活化时间及球料比(质量比)的影响较大,机械活化40min,球料比(质量比)9∶4和机械活化30min,球料比2∶1 的铁尾矿活性指数可满足火山灰混合材料的使用要求.机械活化后铁尾矿的强度受胶凝性能影响大于微填充作用,活化后的铁尾矿颗粒微级配均匀程度均小于未活化的铁尾矿.铁尾矿的掺入改变了水泥体系的碱度及水化产物的孔结构并使更多的CO₂进入砂浆内部,导致生成了更多的碳酸盐类产物.