Gi蛋白介导MrgC受体对CFA炎症痛的抗痛觉过敏作用

通过观察完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)炎症痛大鼠对伤害性热刺激的缩足反射潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)变化,探讨Gi蛋白是否介导MrgC受体(Mas-related gene C receptors,MrgC)对炎症痛的抗痛觉过敏作用.结果显示,椎管内给予MrgC受体激动剂BAM8-22(bovine adrenal medulla 8-22,BAM8-22)能明显延长CFA炎症鼠在24 h和48 h时的缩足反射潜伏期基础值,并显著增强24h时的抗伤害作用.椎管内预先给予百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)能抑制Gi蛋白的功能.在给予PTX7 d后,初次给予BAM8-22并不能延长CFA炎症鼠24 h时的缩足潜伏期基础值,但在24 h时再次注射BAM8-22时,能显著增强其抗伤害作用和48 h时的缩足潜伏期基础值.以上结果说明在CFA炎症痛模型中,预先给予PTX能抑制BAM8-22的抗痛觉过敏作用,但重复再次给予BAM8-22能恢复Gi蛋白的功能.表明Gi蛋白及其相关信号通路介导MrgC受体在炎症痛中的抗痛觉过敏作用.     

大承气汤抗高热动物模型体温变化实验观察分析

目的:研究大承气汤对高热症SD大鼠模型的退热作用。方法:大鼠尾静脉注射浓度不一样的脂多糖(5、10、20、40、60、80μg/kg),对各组的体温变化进行观察记录,采用LPS最适宜的剂量建立脂多糖(LPS)大鼠发热模型。将40只SD大鼠随机分配为空白对照组、LPS模型组及大承气汤5、2.5、1.25 mL/kg组。对大鼠药物处理后每隔30 min测量一次体温,连续记录6 h,观察各组用药后体温变化,记录各自变化温度值,对退热效果进行对比与评价。结果:与模型组比较,大承气汤各剂量组退热作用均明显提升(P0.05),对LPS作用下的大鼠发热有很好的抑制作用。结论:大承气汤对LPS作用下的发热有良好的解热作用,而且呈现出剂量依赖型。     

nNOS参与阻断5-HT_(2A)受体导致的炎症大鼠痛觉低敏

通过建立大鼠足底角叉菜胶炎症模型,在致炎1 h于炎症部位注射酮色林或其溶剂DMSO,或在18 h于炎症局部注射5-HT或其溶剂生理盐水,致炎24 h灌流取脊髓和DRG,免疫组化法显示脊髓背角和DRG中nNOS的表达.结果显示酮色林组DRG中的中、小nNOS阳性神经元百分数显著少于DMSO组,脊髓中阳性神经元数也显著少于DMSO组;而5-HT组脊髓中nNOS阳性神经元数显著高于生理盐水组,说明nNOS参与了阻断5-HT2A受体导致的炎症大鼠痛觉低敏.     

贯叶连翘提取物联合美沙酮对海洛因成瘾大鼠行为及脑单胺递质的影响

目的:观察贯叶连翘提取物(hypericum perforatum linn extract,HPLE)联合美沙酮对海洛因依赖大鼠行为及脑单胺递质的影响.方法:将24只健康大鼠随机分成正常组、模型组、HPLE+美沙酮处理组、美沙酮处理组.按递增法采用皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,造模后药物处理30d,观察大鼠的行为变化,利用荧光分光光度法检测脑单胺类递质含量.结果:与正常组相比,模型组海洛因依赖大鼠跳跃、站立、扭体等行为指标值显著升高,潜伏期显著缩短、错误次数增加,脑单胺类递质含量明显增高.与模型组相比,HPLE+美沙酮处理组和美沙酮处理组大鼠跳跃、站立、扭体等行为指标值显著降低,潜伏期明显延长、错误次数减少,脑单胺递质的含量显著降低.结论:HPLE联合美沙酮明显改善了海洛因依赖大鼠的戒断症状,保护了脑组织,其作用机制可能与脑内单胺递质的改变有关.     

GABA引起正常和病理性疼痛大鼠DRG神经元去极化反应的比较

为探究GABA在痛觉信息传递中的作用,观察分析了γ-氨基丁酸(GABA)在神经病理性疼痛中的作用。制备神经病理性疼痛大鼠模型,取其L4-L5背根神经节(dorsal root ganglion,DRG),运用细胞内微电极记录技术观察在灌流GABA及其受体阻断剂的情况下,引起DRG神经元膜电位的变化。结果表明,病理性疼痛模型组大鼠的DRG神经元对不同浓度GABA引起的去极化反应均明显小于正常对照组大鼠(P0.05),这说明神经病理性疼痛可通过减弱GABA介导的突触前抑制易化痛觉信息的传递。     

体温过低对大鼠脑干听觉诱发电位快慢成分的影响

目的：探讨体温过低对大鼠脑干听觉诱发电位快慢成分的影响。方法：计算机平均叠加技术颅表记录大鼠脑干听觉诱发电位（BAEP）快慢成分，体表物理降温法逐渐降低大鼠体温，传感探头式数字体温计监测大鼠直肠温度，体温每降低1℃测试1次BAEP快慢成分，观察波峰潜伏期（PL）、波峰间潜伏期（IPL）和波幅的变化。结果：随体温逐渐降低（36－25℃），BAEP快慢成分PL逐渐延长，快成分I－Ⅲ、Ⅱ-Ⅳ和I－Ⅳ IPL也逐渐延长，但两者波幅未随体温降低而发生规律性显著变化。结论：体温过低对大鼠BAEP的快慢成分均有显著影响。     

重组人硫氧还蛋白对大鼠内毒素肺损伤保护作用

目的:探讨重组人硫氧还蛋白1(rh Trx-1)对新生SD大鼠急性内毒素肺损伤的保护作用.方法:制备、鉴定rh Trx-1;将新生SD大鼠分为对照组、脂多糖(LPS)实验组和LPS+rh Trx-1干预组.腹腔注射LPS(质量分数为5 mg/kg),制备急性内毒素肺损伤模型,干预组于LPS注射前30 min腹腔注射rh Trx-1(质量分数为10 mg/kg),观察注射后24 h各组新生SD大鼠的一般情况以及死亡率;重复实验,每组分别于实验后的2、8 h随机处死大鼠,提取肺组织用于病理切片观察.结果:(1)成功制备rh Trx-1;(2)LPS组大鼠表现出活动少,反应差,精神萎靡,毛发无光泽,口周发绀等全身炎症反应症状,濒死状态时表现为毛色青灰,呼吸浅表;LPS+h Trx-1干预组动物症状明显减轻;阴性对照组、LPS实验组和LPS+rh Trx-1干预组大鼠24 h死亡率分别为0%,67%、17%(2=14.400,P=0.001);(3)LPS组肺组织损伤严重,可见肺组织结构不完整,肺泡间隔明显增宽,肺泡腔内有红细胞、炎症细胞及浆液渗出,血管周围组织可见白细胞浸润,毛细血管有明显充血及扩张表现,随时间延长有加重趋势,LPS+rh Trx-1干预组病理改变较内毒素组明显减轻,肺泡结构尚正常,轻度肺水肿,肺泡间隔稍增宽,红细胞渗出明显减少,肺泡及肺间质中白细胞浸润减少.结论:重组人硫氧还蛋白1对急性内毒素肺损伤的新生大鼠具有保护作用.     

尼氟灭酸对CCI模型鼠DRG神经元GABA介导膜电流的影响

为观察尼氟灭酸(NFA)对坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)所导致的神经病理性痛大鼠的背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元上GABAA受体激活电流的影响,探讨尼氟灭酸在神经病理性疼痛时在脊髓水平的作用及可能机制。采用如下方法:(1)制作CCI模型。(2)运用热板实验检测CCI组、假手术组术侧下肢热缩足反射潜伏期的变化。(3)运用全细胞膜片钳技术记录CCI模型组术侧、假手术组术侧、正常组DRG神经元上GABAA受体激活电流的幅度。(4)记录尼氟灭酸对正常组和CCI组术侧DRG神经元上GABAA受体激活电流的调节作用。结果显示,(1)CCI组术侧下肢热缩足反射潜伏期明显缩短。(2)GABA(1~1000μmol/L)可以使DRG神经元产生浓度依赖的内向电流(P0.05,n=10)。(3)CCI组1~100μmol/L GABA激活电流幅值显著小于假手术组和正常对照组(P0.01,n=6)。假手术组和正常对照组GABA电流差异无统计学意义。(4)NFA(1~100μmol/L)对正常组、CCI组的DRG神经元上GABA激活的电流均有抑制作用,该抑制作用具有浓度依赖性,且正常组的抑制作用更明显(P0.01,n=5)。由此可知,NFA对CCI模型大鼠DRG神经元GABA激活电流的抑制作用相比较正常组有所减弱,这可能是由于CCI模型的DRG神经元上钙激活氯通道的数量增加。     

油橄榄叶提取物联合美沙酮对海洛因成瘾大鼠消化酶活性及十二指肠组织结构的影响

目的:探讨油橄榄叶提取物(olive leaf extract,OLE)联合美沙酮对海洛因依赖大鼠胃肠道消化酶活性及十二指肠组织结构的影响.方法:将40只健康大鼠随机分成正常组、模型组、美沙酮组、OLE+美沙酮组.按递增法采用皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,造模后药物处理30 d,用比色法检测血清脂肪酶(LPS)、淀粉酶(AMS)和胰蛋白酶(TRS)活性,用生物显微技术观察十二指肠组织结构的变化.结果:与正常组相比,模型组海洛因依赖大鼠血清LPS、AMS、TRS活性显著降低,十二指肠粘膜上皮掉落、溶解,隐窝空泡化甚至消失;与模型组相比,OLE+美沙酮组和美沙酮组大鼠血清LPS、AMS、TRS活性明显升高,十二指肠组织病理损害程度明显减轻.OLE联合美沙酮对海洛因依赖大鼠消化功能的治疗效果比美沙酮组更明显.结论:OLE和美沙酮联合治疗海洛因造成的胃肠道损害疗效优于单一的用药,两药合用具有很好的协同作用.     

高胆红素血症新生大鼠听觉诱发电位的研究

目的: 探讨高胆红素血症新生大鼠脑干听觉诱发电位快成分(FC-BAEP)、脑干听觉诱发电位慢成分(SC-BAEP)和听觉中潜伏期反应(MLR)的异常变化.方法: 7日龄SD大鼠随机分为对照组(C组,17只)和两个实验组(T1和T2组,各17只).T1组和T2组大鼠于7和10日龄腹腔注射胆红素溶液建模,累积剂量分别为90和120 mg/kg,C组大鼠于7日龄和10日龄腹腔注射生理盐水0.5 mL.对照组和实验组10日龄大鼠腹腔注射6 h后随机抽出7只断头取血检测血清胆红素;其余大鼠分别于12、14、17和20日龄检测FC-BAEP、SC-BAEP和MLR.结果:T1和T2组10日龄大鼠腹腔注射6h后,血清胆红素浓度明显升高;T1组和T2组大鼠FC-BAEP和SC-BAEP延迟出现;T1和T2组17、20日龄大鼠FC-BAEP除Ⅱ-Ⅳ IPL外,各波PL和IPL均显著延长,且T2组17日龄大鼠FC-BAEP各波PL均较T1组显著延长;T1和T2组17、20日龄大鼠SC-BAEP的PL显著延长,且T2组17日龄大鼠SC-BAEP的PL较T1组显著延长;T1和T2组17、20日龄大鼠MLR各波PL和IPL显著延长,除Pa-Pb IPL外,T2组大鼠MLR各波PL和IPL较T1组显著延长.结论:高胆红素血症新生大鼠FC-BAEP、SC-BAEP和MLR基本呈同步一致的异常变化,SC-BAEP和MLR也是早期监测胆红素诱发的听力和脑损伤的客观灵敏指标.     

迷走复合体和迷走神经在炎症反应中的可塑性

为了探究炎症反应过程中孤束核-迷走神经背核-迷走神经的可塑性变化,实验分内毒素脂多糖(LPS)组和对照组2组,LPS组大鼠股静脉注射LPS,对照组大鼠股静脉注射同体积的生理盐水,测定迷走神经放电频率、血压、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及孤束核和迷走神经背核内Fos阳性神经元表达情况。结果表明:LPS注射后,迷走神经放电频率明显增大,血压虽有降低但不明显;与对照组相比,LPS组神经放电频率明显增大,血清TNF-α水平显著升高,孤束核和迷走神经背核的Fos表达均显著增强,说明迷走神经和孤束核、迷走神经背核参与了炎症反应。     

石膏粳米汤对干酵母致热大鼠解热抗炎及核因子-κBp65、环氧合酶-2表达的影响

为观察石膏粳米汤对干酵母致热大鼠炎症因子、核因子(NF)-κBp65、环氧合酶-2(COX-2)表达的影响,50只SPF级SD雄性大鼠被随机分正常对照组10只,余40只采用20%干酵母混悬液皮下注射建立大鼠发热模型。4 h后随机分4组:模型组、阿司匹林组(0.1 g·kg~(-1))、石膏粳米汤组(7.83 g·kg~(-1))、石膏组(17.62 g·kg~(-1))。造模后每1 h测量1次大鼠肛温,共10次;计算各组大鼠不同时间点体温变化、最大体温上升高度(ΔTmax)、6 h体温反应指数(TRI6);检测各组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量;采用免疫组化法、实时荧光定量PCR法检测各组大鼠下丘脑NF-κBp65、COX-2的表达情况。结果是给药后4～6 h内,阿司匹林、石膏粳米汤、石膏水煎液均能抑制发热大鼠体温升高,石膏粳米汤和石膏水煎液之间无明显差异(P0.05)。给药后6 h,阿司匹林组、石膏粳米汤组、石膏组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度均显著低于模型组(P0.01、P0.01、P0.01);三组下丘脑NF-κBp65蛋白、COX-2基因表达均显著低于模型组(P0.01、P0.01、P0.01)。说明石膏粳米汤可改善发热大鼠炎症,其发挥解热抗炎机制可能涉及抑制下丘脑NF-κBp65蛋白、COX-2 mRNA表达相关。     

白藜芦醇在蛛网膜下腔出血后缓解氧化应激性损伤

本研究将探寻白藜芦醇(resveratrol,RSV)在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后的抗氧化作用及相关机制.实验一,60只大鼠随机分配到sham组和SAH各时间点组,检测SIRT1、PGC-1α在各组中蛋白水平的变化.实验二,100只大鼠随机分配到sham组、SAH组、SAH+vehicle组、SAH+RSV组和SAH+RSV+EX527组,给予RSV或同时给予RSV和抑制剂EX527,检测SIRT1和PGC-1α的变化以及对应的氧化应激指标、脑水肿和神经功能评分的变化.结果显示,实验一,SIRT1和PGC-1α在SAH后升高并在24 h达到高峰,较sham组明显升高(p0.05).实验二,经RSV治疗,SAH后SIRT1和PGC-1α明显升高,且对应的氧化应激性损伤和脑水肿较SAH+vehicle组明显缓解、神经功能评分明显降低(p0.05);经EX527处理后,RSV在SAH后的保护作用明显下调(p0.05).结论 RSV在SAH后具有抗氧化作用,且这种抗氧化效果主要通过激活SIRT1/PGC-1α通路实现.     

感冒双解颗粒解热作用研究

目的 研究感冒双解颗粒解热作用.方法 采用大鼠干酵母和家兔细菌内毒素解热模型,给予高、中、低剂量的感冒双解颗粒浸膏粉,观察感冒双解颗粒对发热模型动物体温的影响,考察解热作用强度及时程.结果 感冒双解颗粒浸膏粉高剂量组(1.7g浸膏粉/kg)在给药后1.5～4 h能明显抑制干酵母模型大鼠体温升高,降温幅度约为0.7℃,而...     

天灸对哮喘大鼠血清IgE及肺组织IL-6表达的影响

目的:观察哮喘大鼠血清中IgE的变化及肺组织中IL-6表达并研究天灸、电针对它们的影响,探讨天灸、电针治疗哮喘的作用机理。方法:健康SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、天灸潜伏期组、电针潜伏期组、天灸发作期组、电针发作期组。以卵蛋白致敏激发制作大鼠哮喘模型,采用ELISA方法测定血清IgE,用放免法测定肺组织IL-6含量。结果:模型组血清IgE较正常组明显增高,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);天灸潜伏期组血清IgE检测较模型组明显减低(P<0.01),较天灸发作期组降低明显(P<0.05),较电针潜伏期组、电针发作期组降低显著(P<0.01)。模型组IL-6较正常组显著升高(P<0.01)。天灸潜伏期组IL-6较模型组显著降低(P<0.01);较电针潜伏期组、电针发作期治疗组、天灸发作期组降低显著(P<0.01)。结论:在哮喘潜伏期及发作期IgE及IL-6显著升高,而天灸能够明显降低两者的含量,尤其以降低潜伏期中的IgE和IL-6更为明显。说明天灸对哮喘具有防治性的治疗作用,其效果优于其他治疗组。     

福尔马林致痛对大鼠DRG神经元CCK表达的影响

胆囊收缩素(CCK)是一种脑肠肽,在中枢和外周神经系统广泛分布.CCK参与许多重要生理和病理生理过程,包括行为学、焦虑、学习、记忆过程、疼痛等,为探讨CCK是否参与初级感觉信息的调制,本实验运用免疫组织化学技术,观察了福尔马林致痛后对大鼠背根神经节(DRG)神经元CCK表达的影响.研究结果表明,大鼠足底注射福尔马林1h后,注射侧DRG小神经元和大、中神经元CCK表达阳性率分别为60.37%±6.92%和26.96%±4.01%,注射侧CCK表达阳性细胞的半定量光密度均值是0.236±0.012,与生理盐水组相比均显著增加,差异均有显著性.非注射侧DRG小神经元和大、中神经元CCK表达阳性率分别为25.22%±5.08%和11.73%±2.73%,非注射侧CCK表达阳性细胞的半定量光密度均值是0.173±0.002,与生理盐水组相比均无明显改变.福尔马林致痛后大鼠DRG神经元CCK表达阳性率和半定量光密度均值均增加,表明CCK在DRG和脊髓水平参与了痛觉信息传递的调制.     

褪黑素通过抑制P-选择素表达减轻内毒素致大鼠急性肺损伤

为探讨P-选择素(Ps)在内毒素(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)时肺组织中的表达及褪黑素(MT)对其表达的影响,将SD大鼠随机分为3组,对照(Control)组、模型(LPS)组、褪黑素干预(MT+LPS)组,采用气管内滴注脂多糖(LPS)的方法建立大鼠ALI模型,光镜下观察大鼠肺组织形态学改变,采用免疫组织化学染色技术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术观察肺组织中P-选择素的表达变化.结果显示:模型组较对照组肺组织损伤严重,P-选择素的阳性表达明显增多(P0.05);应用褪黑素干预后显著缓解上述变化(P0.05).这说明褪黑素可能通过抑制P-选择素的表达发挥对急性肺损伤的保护作用.     

多粘菌素B对内毒素血症大鼠血流动力学作用

观察多粘菌素B（PMX－B）对内毒素血症大鼠血流动力学的影响，并进行了实验，实验分为：内毒素（LPS）＋多粘菌素B组、LPS＋生理盐水组、LPS模型组，给大鼠一次性静脉注射内毒素（0.5mg/kg），前2组分别注入内毒素后0.5h静脉给予多粘菌素B（0.2mg/kg）和1mL生理盐水（NS）、LPS模型组大鼠注入内毒素后不作其它处理，给多粘菌素B后0.5、1、2、4h抽血液，检测血浆中LPS、肿瘤坏死因子（TNF－α）、全血粘度（WBV）、血球压积（HRC）的变化。结果表明：LPS＋多粘菌素B组，在给内毒素1h，全血粘度、红细胞压积明显低于LPS＋生理盐水组。因此多粘菌素B治疗能改善内毒素血症早期的血液流变性。     

桔梗抗MP有效部位对TGF-β1 mRNA表达的影响

探讨桔梗抗肺炎支原体(MP)有效部位对感染大鼠肺组织中TGF-β1 m RNA表达的影响.采用滴鼻法构建肺炎支原体肺炎大鼠模型,用光学显微镜观察大鼠肺组织形态学的变化,运用RTPCR法检测TGF-β1在空白对照组、模型对照组、阿奇霉素组、桔梗有效部位高、中、低剂量组的表达情况.结果表明,空白组大鼠的肺组织结构正常,模型组大鼠的肺组织呈重度或中度炎症病变,造模成功,给药各组大鼠的肺组织病变均有所改善.模型组大鼠肺组织中TGF-β1 m RNA的表达量明显增多,桔梗抗肺炎支原体有效部位高、中、低剂量组和阳性药组均能下调感染MP大鼠肺组织中TGF-β1的表达,其中阿奇霉素组和桔梗有效部位高剂量组效果最佳.桔梗有效部位对MP感染致大鼠肺损伤的修复作用机制可能是通过下调TGF-β1,抑制了上皮间质转化的过程.     

腹水Walker256乳腺癌细胞接种建立SD大鼠胫骨骨癌痛模型

探讨应用腹水传代培养的Walker256大鼠乳腺癌细胞系建立SD大鼠胫骨癌痛模型,为骨癌痛的研究和镇痛药物开发创造有利条件.结果显示,在骨癌模型组,接种后体质量呈缓慢下降,从第15天起与接种前相比存在极显著差异,到第21天时,体质量下降了12. 5%(P 0. 001);热缩足潜伏期也逐渐下降,从第6天开始,与接种前相比存在显著性差异,至第21天时,缩足潜伏期下降了34. 1%,接种的对侧后足也出现类似现象; X-影像观察显示骨癌痛模型大鼠的胫骨结构受到破坏,骨密度不均一.以上结果表明,应用腹水传代的Walker256乳腺癌细胞接种后能产生较为稳定的痛觉过敏等骨癌痛行为,SD大鼠胫骨癌痛模型建立成功.