影响体细胞核移植重构胚发育的因素

目前已有多种动物被成功克隆,但存在着诸多未知因素,使体细胞核移植重构胚发育至囊胚阶段的比例过低,克隆动物存在早衰等异常现象.该文围绕这产生这些现象的根本原因、高度分化的体细胞核移入卵质后所发生的分子事件以及其影响因素如体细胞的来源和培养代数、细胞周期、核质相互作用、细胞核再程序化、线粒体等方面对体细胞核移植重构胚发育的影响等进行综述.     

植物人工种子制作技术与应用前景

近年来，植物人工种子在生物技术领域发展迅速。它在快速繁殖优良品种与株系，固定杂种优势，简化育种程序，以及与基因工程、脱病毒技术等其它生物技术相结合等方面，具有广阔的前景。现结合自己的研究工作，介绍人工种子的基本结构，制作技术，生产意义和应用前景。     

欧洲七叶树体细胞次生胚重复发生研究

取欧洲七叶树体细胞胚的子叶诱导次生胚发生,表明:MS ZT(0.5~2.0 mg/L) BA 1.0 mg/L IAA 0.2 mg/L培养基可直接诱导次生胚发生,诱导率超过80%;同一子叶的不同部位分化能力不同,靠近胚轴部位分化能力最强,其他部位比较弱。     

大叶相思体细胞胚胎发生的初步研究

以种子萌发的无菌苗下胚轴为外植体，在Ｂ５＋２，４－Ｄ（１０－４ｍｏｌ／Ｌ）＋ＢＡ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）＋ＣＨ０．５ｇ／Ｌ的固体培养基上培养４周，获得了胚性愈伤组织．该愈伤组织经Ｂ５＋２．４－Ｄ（１０－４ｍｏｌ／Ｌ）的液体培养基７ｄ的诱导在Ｂ５＋Ｌ－谷氨酰胺（２００ｍｇ／Ｌ）＋ＣＨ（０．５ｇ／Ｌ）的液体培养基上培养１４ｄ产生了球形胚．球形胚具有明显的两极，但只是根端发育，苗端并没有发育     

影响玻璃化法冷冻保存胚胎的一些因素

探讨了用玻璃化法冷冻保存小鼠桑椹胚的一些影响因素。冷冻胚胎的保护剂采用性质较温和的甘油和1,2-丙二醇组成的玻璃化液,以37℃,体积分数5％CO2条件下能发育到囊胚期为保持正常生命力的指标。结果表明,玻璃化液中的甘油和丙二醇的浓度是冷冻保存胚胎的关键因素,而甘油和丙二醇比例对保存效果也有影响。在所用的不同组合的玻璃化液中,含2．5mol／L甘油和3．5mol／L1,2-丙二醇效果最好。0．25mL的冷冻管比0．5mL的效果更好。     

Somatic cell bovine cloning: Effect of donor cell and recipients

Nuclear transfer (NT) is an efficient technique for assessing the developmental potential of a nucleus and for analyzing the interactions between the donor nucleus and the recipient cytoplasm. In amphibians, thought nuclei of adult kerationocytes support development to the juvenile, tadpole stage, no development to the adult stage was re- ported[1], leaving open the question of whether a different- tiated adult nucleus can be fully reprogrammed. The first cloned offspring developed from differ…     

花生体细胞胚发生发育过程中淀粉代谢的动态变化

将花生实生苗的幼对接种于MS固体诱导培养基上诱导体细胞胚发生 ,用PAS染色法观察了体细胞胚发生发育过程中的淀粉代谢的动态变化 .结果表明 ,在体细胞胚的发育过程中 ,淀粉表现出两次积累高峰 ,第一次在胚性细胞团中 ,淀粉粒大而密集 ;随着胚性细胞的分裂 ,淀粉逐渐被消耗 ,到多细胞原胚期胚体内淀粉趋于消失 .球形胚期 ,淀粉粒又开始积累 ,出现第二次积累高峰 ;到成熟胚期 ,淀粉积累只限于生长点区域淀粉的两次积累高峰为体细胞胚的发育提供了物质和能量基础     

Cloning of lea cDNA fragment of carrot (Daucus carota L.) and analysis of its expression features

Addition of concentrated sucrose to MS culture arrests the development of carrot somatic embryo at the stage of cotyledon embryo and, with the sucrose concentration restored to normal level, the embryo thus arrested is reactivated into post-embryonic development. Using the method of RT-PCR, the cDNA fragment of a new member of the Dc3 family of lea has been obtained from carrot somatic embryo under regulated state. As revealed by Northern blotting, strong expression has been observed in carrot somatic embryo under regulated state but the expression was much reduced 12 h after deregulation, and nearly disappeared 24 h after. Based on this finding as well as results of related studies, it is surmised that changing the sucrose concentration in culture enabled carrot somatic embryo under suspension culture to undergo a specific course of development which is comparable to the dormancy-germination process of seeds.     

天然胡萝卜色素的提取及性能研究

对胡萝卜中提取天然胡萝卜色素的方法和条件进行研究,并且在各种不同条件及环境下,对它的性能和稳定性进行测试,结果表明,该色素易溶于有机溶剂,在可见光区最大吸收波长为450nm,降解反应级数为一级反应,对光、热的稳定性较好.在弱碱性条件下其性能比较稳定,酸性条件下不稳定.Al3+,Fe3+,Mg2+对其有影响;Na+、Ca2+、K+对其无影响,其性能稳定,耐氧化性较差,易被H2O2氧化,抗还原性较好.     

花卉体细胞胚胎发生研究进展

综述花卉体细胞胚胎发生途径、体细胞胚胎发生过程的生理生化变化及其影响因素、体细胞胚胎发生与胚性基因的表达和花卉体细胞无性系变异等方面的研究进展,植物体细胞胚胎发生研究在基因工程体细胞融合、细胞突变体诱导、人工种子、杂种合子胚的挽救、种质保存、苗木快速繁殖等诸多方面有着广阔的应用前景,也是遗传学、转基因工程体系、生理生化、植物发育过程的基因表达和调控、功能基因组研究等方面一个必不可少的新兴研究系统.     

Cloning and expression of DnaJ homolog in carrot somatic embryo

As the co-chaperone of DnaK/Hsp70 protein, DnaJ/Hsp40 protein influences the synthesis and assembly of the protein complex by regulating ATPase activity of DnaK/Hsp70 protein. By employing the modified method of cDNA representational difference analysis, a homologous fragment of DnaJ was isolated from the deregulated carrot somatic embryos, and it was further used as the probe to screen the cDNA library of carrot somatic embryo deregulated for 12 h. As the result, DcJ1 gene, the homologous gene of DnaJ, was isolated from carrot. Sequence analysis showed that its coding region is 1257 bp, which codes 418 amino acids and comprises 3 highly-conserved characteristic domains. Southern blot analysis suggested that the DcJ1 gene seems to be a single copy in the genome, while Northern blot result indicated that DcJ1 expresses only in roots and its degree of expression changes obviously with the regulation-deregulation process. These results suggest that DcJ1 is correlated with the early development of carrot somatic embryo radicle.     

可可茶子叶培养中体细胞胚状体形成及植株再生

用含有０．５ｍｇＬ－１２,４－Ｄ或０．５ｍｇＬ－１２,４－Ｄ加２ｍｇＬ－１ＰＣＰＡ的ＳＨ培养基（含ρ（蔗糖）＝３％）培养可可茶的未成熟子叶,２周后即可从合子胚的下胚轴诱导出胚状体,５～７周后可以从子叶表皮直接诱导出胚状体．在含０．２ｍｇＬ－１２,４－Ｄ的培养基中,子叶外植体在培养４周内即能分化出胚状体且分化频率较高．培养１５周后把培养物转接至含２ｍｇＬ－１ＢＡ加上０．２ｍｇＬ－１ＩＢＡ的培养基中（含ρ（葡萄糖）＝２．５％）可以诱导出“种子状胚”、“芽状胚”和“杯状胚”,并可使“种子状胚”和“芽状胚”转化成苗．另外,还可诱导出丛芽并使丛芽转化成无根苗．若把“芽状胚”转移到含５ｍｇＬ－１ＧＡ－３和１ｍｇＬ－１ＩＡＡ的培养基中,“芽状胚”转化成无根苗的频率较高．     

外源基因导入贡柑体胚及其人工种子构建的初步研究

用小细胞团和分散细胞混合物与两种带不同质粒的农杆菌共培养的方法,将质粒PGV3850:1103neo T-DNA上的km抗性基因和Nos/Npt基因、质粒PGV517的Km抗性基因、NPTⅡ基因和毒蛋白基因转入贡柑细胞,在含有卡那霉素的选择培养基上选择出抗性愈伤组织和幼胚。通过Nopalim和NPTⅡ酶性检测、DNA/DNA分子杂交鉴定,证明了Nos基因、NPTⅡ基因已整合到贡柑体胚的细胞基因组中并表达,苏云金杆菌的毒蛋白基因整合到贡柑细胞基因组中,第一次在柑桔类果树实现了外源基因转移。用3％海藻酸钠包埋转化体胚制备人工种子,2粒转基因人工种子已萌发。     

花生体细胞胚和丛生芽的诱导及扩繁培养

以花生成熟胚培养成的无菌苗叶节为外植体 ,在高浓度 6-BA ( 3 0 mg/ L) MS培养基中 ,光强 2 0 0 0Lx,( 2 5± 3 )℃和 1 4 / 1 0光暗比条件下培养 ,50天后全部诱导分化出整齐一致的丛生芽 ,每个外植体平均产生 8.2 5个丛生芽 ;切下带少许丛生芽的组织块转入含 6-BA ( 3 0 mg/ L) ,LH ( 40 0 mg/ L)和 YE ( 0 .0 1 % )的 MS培养基中 ,可诱导出新的丛生芽 ,诱导率达 98.70 % ,平均出芽 1 3 .86个 .将花生成熟胚轴转接于含NAA ( 1 mg/ L)和 6-BA ( 3 mg/ L) MS培养基中 ,2 0～ 3 0天后 ,诱导出大量正常的体细胞胚 ,诱导率达 95.7% ,将胚切成小块转入含 2 ,4 -D ( 2 0 mg/ L) ,6-BA ( 3 mg/ L )和 LH ( 2 0 0 m g/ L) MS培养基中 ,经 1 5天培养 ,诱导出白色致密的胚性愈伤组织 .     

旱芹直播土壤人工种子及胚状体分化过程中的POD、PAL活性变化

旱芹（Apiumgraveolens）无菌苗子叶为外植体，在MS＋1．0mg／L2．4－D＋0．5mg／LKT上诱导产生愈伤组织，然后转入MS＋1．0mg／LABA诱导产生胚状体后用于人工种子包埋，在有菌土壤中获得7％左右的转株＄．当人工种子外面包裹一层酯类共聚物作外膜，并在人工胚乳中加入6％的麦芽糖和1％的活性炭后，使人工种子在有菌蛭石土中的转株率提高到51％．还测定了芹菜胚状体分化过程中的苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性、过氧化物酶（POD）活性、以及木质素和可溶性蛋白质含量的变化．POD及PAL的第二个活性峰在第八天前后出现，似可作为组织启动分化的标志酶．结果表明：PAL、POD活性，木质素合成和管状分子之间有紧密的相关性．     

脱水对番木瓜体细胞胚贮藏和萌发的影响

由悬浮培养获得的番木瓜体细胞胚含水量高达90％以上，成苗率低，不能贮藏。经脱水，含水量为50％－70％的干燥体细胞胚在MSO培养基上的成苗率为82％，在室温（25℃）下贮藏60天后存活率为83％。贮藏期间体细胞胚无一萌, 但含水量小于30％的干燥体细胞胚存活率低。扫描电镜观察表明，新鲜细胞胚表面存在很多突出细胞，当体细胞胚萌发时，这些细胞进一步分裂，形成愈伤组织或次级体细胞胚，妨碍体细胞胚的正常萌发。而含水量50％－70％的干燥体细胞胚表面细胞枯死，但生长点却完成无损。     

胡萝卜豆奶生产工艺的研究

报道了胡萝卜豆奶的生产工艺及产品特性。该饮料以黄豆和胡萝卜为主要原料，经浸豆、胡萝卜除臭、磨浆、调配、均质、杀菌而制成。     

基因型及生长调节物质对玉米成熟胚培养的影响

对30个基因型的玉米成熟胚进行离体培养,研究不同基因型对培养的反应和培养基对成熟胚愈伤组织诱导和生长的影响.结果表明,成熟胚的愈伤可诱导能力较为普遍,但诱导频率因基因型的不同有很大差异,不同基因型所诱导出的愈伤质量也有所不同;MS、N6两种基本培养基对成熟胚出愈率的高低影响不大;不同的生长调节物质对成熟胚愈伤组织生长状况有明显的影响,脯氨酸的添加对愈伤组织质量有促进作用;细胞分裂素对愈伤组织的质量和长势均有一定的负面影响.