肺组织石蜡切片技术的改良

目的探讨提高制作肺组织石蜡切片质量的方法。方法在常规的组织切片制作时,改进普通石蜡切片固定、脱水程序,用AAF液替代甲醛固定,脱水时进行不同程度的减压抽气。结果用AAF液固定标本可以明显缩短固定时间,肺组织的脱水也比常规方法充分,切片质量明显提高。结论用AAF固定液、用抽气减压脱水法,有助于制作出优质肺组织石蜡切片。     

结肠杯状细胞染色的结果比较研究

目的 通过对大鼠结肠切片标本染色对比卡诺液与甲醛固定液处理标本的区别。方法 将正常大鼠与便秘模型大鼠的结肠组织标本分别用卡诺液与甲醛固定液处理,制成石蜡切片标本后,用HE染液和高碘酸希尔法阿尔新蓝染液分别进行染色,统计杯状细胞的数量和着色度对比两种固定液所固定标本的区别。结果 与甲醛固定液相比,同组标本用卡诺液固定的杯状细胞数量无显著性差异(P>0.05,n=10),着色度显著增强(P0.05,n=10)。结论 在杯状细胞的形态学观察中,用卡诺液处理标本明显优于甲醛固定液。在不同实验的标本制备中,固定液的选择应根据实验研究对象的特性而确定。     

不同粘片剂对油茶叶片石蜡切片效果的影响

比较不同粘片剂处理对油茶叶片石蜡切片粘片效果的影响,优化植物石蜡切片粘片方法,笔者在制作油茶叶片石蜡切片过程中,用4种不同的粘片剂(甲醛明胶液、铬矾明胶液、明胶甘油液、蛋清甘油液)处理石蜡切片,比较其粘片效果.结果显示,经蛋清甘油液处理的切片的形态结构完整度最佳,切片完整率高,而且染色效果清晰.不使用粘片剂处理的切片,叶片结构完整度最低,染色效果一般.最终得到结论为蛋清甘油液是制作植物石蜡切片的理想粘片剂.     

饥饿应激对泥鳅3种组织糖原,ACP和ALP的影响

研究了饥饿应激对泥鳅肝、肠和肌肉3种组织细胞糖原、酸性和碱性磷酸酶的细胞化学变化.对泥鳅进行饥饿处理,0~28 d不喂养食物,29~35 d恢复正常喂食.分别于0、7、14、21、28和35 d取材,利用显微石蜡切片、组织化学染色的方法检测其肝、肠和肌肉细胞糖原、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶细胞化学特征.结果表明:随着饥饿程度的加深,糖原的量减少,碱性磷酸酶活性下降,酸性磷酸酶活性则增强.投喂后,糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性都有不同程度的恢复.整个过程中,上述变化存在组织差异性.泥鳅中糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性均与长期饥饿条件下机体的应激反应有关.     

长期饥饿和再投喂对泥鳅不同组织糖原、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的影响

研究长期饥饿和再投喂对泥鳅肝、消化道和肌肉3种组织细胞糖原、酸性和碱性磷酸酶的细胞化学变化.对泥鳅进行饥饿处理,0～28 d不喂养食物,29～35 d恢复正常喂食.分别于0,7,14,21,28和35 d取材,利用显微石蜡切片、组织化学染色的方法检测其肝、消化道和肌肉细胞糖原、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)细胞化学特征.结果表明,随着饥饿程度的加深,糖原的量减少,碱性磷酸酶活性下降,酸性磷酸酶活性则增强,投喂后,糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性都有不同程度的恢复.整个过程中,它们的变化存在组织差异.泥鳅中酸性和碱性磷酸酶均与长期饥饿条件下机体的应激反应有关.     

3种不同方法对标本基因组DNA固定和抽提效果研究

利用常规基因组DNA抽提方法,对分别用甲醛、乙醇、聚乙二醇3种固定液固定的鲫(Carassius auratus)肌肉样品基因组DNA提取进行了比较研究。结果表明:5%甲醛保存的样品很难提取到完整的基因组DNA,乙醇95%和聚乙二醇(分子量为600)保存的样品均能成功提取出基因组DNA,并能成功地进行18S rDNA的扩增。同时探讨了不同固定方法对基因组DNA提取的影响。     

固定液对甲状腺组织冰冻制片的影响

目的寻找甲状腺组织冰冻制片时的理想固定方法,以解决甲状腺冰冻切片时存在的细胞收缩、胶质脱落等现象。方法对30例由本院甲状腺手术送检的甲状腺组织,在冰冻制片过程中选择8种固定液分别进行固定,HE染色后比较镜下观察效果。结果采用甲醇醋酸液固定的组织细胞收缩较小,滤泡上皮舒展,胶质平坦,染色质清晰,核浆色彩鲜明。结论甲醇醋酸液是甲状腺组织快速冰冻切片的最佳固定液之一。     

肉苁蓉对负荷运动小鼠肝脏保护作用的探讨

采用HE染色法、糖原染色法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法,研究肉苁蓉对负荷运动小鼠肝组织、糖原及乳酸脱氢酶同工酶(LDH)活性的影响.结果显示负荷运动小鼠肝组织结构损伤严重,糖原减少、LDH5同工酶活性显著升高;服用肉苁蓉后负荷运动小鼠肝组织结构趋向正常,糖原丰富,LDH5同工酶活性明显下降.研究表明肉苁蓉可增加负荷运动小鼠肝糖原含量,降低LDH5同工酶活性,对肝脏具有保护作用.     

几种淡水养殖鱼胰腺的组织结构

本文选用我国南方淡水养殖的鳙、鲮、鲩和鲢鱼,研究它们胰腺的组织结构和超显微结构.材料和方法(1)选取长约10～15cm 的小鱼,切头、剖腹,将消化道(连同肝和牌)剪下,剥去胆囊,横切成几段,挤出肠道内容物用生理盐水冲洗干净,置于Bouin's 液中固定.常规脱水,石腊包埋,连续切片,H.E.染色.(2)选取成鱼(3一4斤),同上法剪取一小段肝组织和牌,同样固定、脱水、切片和染色.(3)取部份肝组织切成一立方毫米的小块,用4%戊二醛固定,缓冲液冲洗后,再固定于1%锇酸.常规脱水,Epon812包埋,超薄切片,再用醋酸铀和柠檬酸铅染色,电镜观察.     

稀有鮈鲫的组织学切片制作和苏木精-伊红染色

目的目前鲜有专门针对稀有鮈鲫这种新型实验动物进行组织切片制作方法的研究,故我们对此进行了实践、摸索以建立一完整的组织学切片制作流程供参考交流。方法对正常生活状态下的健康稀有鮈鲫采用Bouin`s固定液固定,并用脱钙液软化骨骼后进行修块,组织块经梯度酒精脱水、松油醇透明之后,按照标准流程制成石蜡切片,HE染色后封片用显微镜观察。结果切片主要采取横断面和矢状面作为观察方位,并使用显微拍摄装备摄取了结构分明的各系统组织脏器的组织学照片。结论本文所述的方法经过多次探索和实践,制得的组织切片镜检结果清晰,质量稳定,可作为以稀有鮈鲫等小型硬骨鱼为实验动物的切片制作提供一些可行的建议。     

杨树和杉木茎段组织的冰冻切片技术研究

以木本植物中的模式树种杨树和杉木茎段为试验材料,分别用多聚甲醛、丙酮和卡诺固定液,研究了这两个树种的冰冻切片技术体系。结果表明,液氮冷冻法对幼嫩的组织(如组培苗)有较好的保护作用。多聚甲醛固定液可以较好地保存细胞的形态结构,冰冻切片较完整。丙酮和卡诺固定液加10%蔗糖保护之后效果更好,切片完整且可以进一步用于核酸提取。卡诺氏固定液固定后,杉木和杨树组培苗的蔗糖保护剂适宜质量分数为10%,液氮冷冻时间为50~90 s。脱水步骤可以使冰冻切片更清晰完整。而田间植株木质化程度较高的茎段组织则需要甘油软化辅助处理,即可获得清晰的冰冻切片。     

高压氧对运动性疲劳大鼠肝糖原及肝脏形态结构的影响

目的：通过研究高压氧对肝糖原和肝脏形态结构的影响,探讨高压氧消除运动性疲劳的作用机制.方法：4周龄健康雄性SD大鼠30只,随机分为3组：对照组、疲劳模型组、疲劳高压氧暴露组,每组10只.建立大鼠游泳致力竭疲劳模型并通过高压氧暴露进行恢复;8周实验后取每只大鼠两块肝脏组织,其中一块取每只大鼠的肝脏相同部位,光镜观察肝脏组织的病理变化;另一块取肝右叶5g,制备成10％的肝组织匀浆,采用蒽酮法检测肝糖原含量的变化.结果：（1）疲劳高压氧暴露组大鼠游泳时间明显长于疲劳模型组（P＜0.05）.（2）疲劳模型组与对照组比较,肝糖原含量显著降低（P＜0.01）;高压氧暴露组与疲劳模型组比较,肝糖原含量显著增高（P＜0.05）;疲劳高压氧暴露组与对照组比较,肝糖原含量显著降低（P＜0.05）.（3）光镜观察显示：对照组大鼠肝组织结构正常,疲劳模型组大鼠肝细胞肿胀,核变大,细胞间质模糊,中央静脉扩张淤血,汇管区少量淋巴细胞浸润,胞浆疏松,肝窦内枯否细胞增生肥大.疲劳高压氧暴露组大鼠肝细胞核肿胀有所改善,充血现象消失,肝细胞轮廓较为清晰,细胞间质纹理较疲劳组更清晰,汇管区炎症消退.结论：高压氧消除运动性疲劳的部分作用机制,可能是通过调节肝糖原含量、促进血糖的稳定,并改善肝脏的形态结构、缓解肝组织损伤而实现.     

大鼠全眼球石蜡组织切片制作方法的改进

目的 探索一种制作大鼠全眼球石蜡组织切片的改进方法。方法 18只SD大鼠,随机分为3组,每组6只;取双眼眼球,分别固定于4%多聚甲醛、10%中性福尔马林和混合固定液中;2 h后左眼眼球于角膜中央用注射器扎一小孔,右眼眼球使用刀片在巩膜处剖一长约0.5 cm小开口;继续固定24 h;制作石蜡组织切片,并行苏木精-伊红染色,应用光学显微镜观察全眼球石蜡组织切片制作效果。结果 采用4%多聚甲醛和10%中性福尔马林组眼球皱缩变形,晶状体结构存留少,存在视网膜脱离,细胞层细胞核连续性差。混合固定液组眼球结构较完整,未见明显视网膜脱离,细胞层细胞核连续性较好;相对于左眼,右眼晶状体结构较完整。结论 采用混合固定液结合眼球侧壁纵剖制作大鼠全眼球石蜡组织切片,结构较完整,方法简便,可在一定范围推广适用。     

2011年秋季实验用鼠健康状况的病理学调查和分析

2011年10月本实验室对14家实验动物单位的实验用鼠进行了病理学抽检。主要内容是对实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行取材,通过甲醛固定,石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对实验用鼠的健康状况进行鉴定。结果显示,绝大多数实验用鼠为健康状态,而非健康动物主要以肝脏脂肪变性和轻度肺脏病变为主。这可能与饲养环境和饲料有关,通过加强饲养管理可以使这种情况得到改善。     

基于响应面法优化的苦荞多糖提取工艺及其抗疲劳作用研究

采用水提醇沉法提取苦荞多糖,利用响应面法中的中心组合设计,对提取工艺中的提取时间、提取温度和料液比进行考察.同时,建立小鼠负重游泳模型,给予小鼠不同剂量的苦荞多糖水溶液后,测定小鼠力竭游泳时间以及血乳酸、血尿素氮的浓度和肌糖原、肝糖原的含量.结果显示,利用响应面法得出的苦荞多糖最佳提取工艺条件为,液料比为16、提取温度为100℃、提取时间为120 min,多糖的得率在实测中达到了13.13%;服用苦荞多糖后可使小鼠的力竭游泳时间显著延长、肝糖原和肌糖原含量升高、而血乳酸和血尿素氮的浓度均有不同程度的降低.结果表明,苦荞多糖具有抗疲劳的作用.     

正交试验设计探索小鼠不同组织冰冻切片的优化制备方法

目的 针对小鼠各种常规组织,优化冰冻切片的实验条件.方法 选择固定、脱水方法,切片温度及切片厚度,三因素、三水平设计正交实验,经组织处理、包埋、冰冻切片、HE染色后,按照冰冻切片质量标准评分,经SPSS 21.0软件分析,得到小鼠各常规组织冰冻切片制备的优化条件.结果 不同固定脱水程序的差异有统计学意义,肝脏组织最佳切...     

植物石蜡切片制作（paraffin section）的试验流程探讨

石蜡切片（paraffin section）双重染色法是组织学常规制片技术中广泛应用的方法之一。本试验用常规石蜡包埋法进行植物叶片的石蜡切片制作,并进行一些创新性改动。观察植物叶片结构结果显示,组织经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤后完好保存细胞原有状态,而且能清晰辨认其形态结构。并且看到木质化的表皮细胞、木质部、导管壁细胞被番红染色液染成红色;其韧皮部、栅栏组织、海绵组织及部分皮层细胞被固绿染色液染成绿色。     

一种制作高质量动物组织石蜡切片的方法

石蜡切片是组织学和病理学制片技术中最为常用的方法,广泛应用于临床诊断和科研教学中。石蜡切片制作步骤繁琐,影响因素众多,且不同组织类型具有不同的特点,每个操作环节的失误都将影响切片的最终质量。详细介绍了辽宁师大生科院实验室经过长期实践和改进后的动物组织石蜡切片制作方法。从石蜡的选择与处理、动物组织取材与固定、透明浸蜡与包埋、切片和烤片、HE染色几个方面探讨了石蜡切片制作过程中的经验或改进措施,具有一定的参考价值。     

人体内糖与运动能力

对糖在人体内的贮存,血糖、肝糖原和肌糖原对运动能力的影响等研究状况进行了概述.     

常用实验动物组织标本石蜡切片问题的探讨

<正>近年来由于细胞生物学,免疫学和细胞化学的发展,使病理学的研究超越了传统的实验范畴,在理论上方法上有很大的发展,然而常规的病理学切片技术仍是临床和科研工作中常用的主要方法。由于科研工作的需要,不同种类实验动物的组织石蜡切片应用日益广泛。实验动物组织柔软,含水份多,在制片过程中固定,脱水,透明和浸蜡容易出现组织块变脆,影响切片的成功率。我室通过多年的工作实践,对以上问题进行了研究和改进,报告如下。