碱性脂肪酶产生菌的筛选与产酶条件及酶学性质研究

作者从泸州油脂厂附近的土壤中,筛选到一株产碱性脂肪酶活性较高的细菌,经初步鉴定为假单胞菌(Pseudomonassp.).经对该菌株进行产酶条件和酶学性质研究发现,该菌株的最适产酶发酵培养基为(%):酵母浸出汁1.5,黄豆粉1,NaCl0.2,K2HPO40.2,NaH2PO40.2,MgSO4·7H2O0.01,初始pH8.5.100mL三角瓶装液10mL,30℃,150r/min摇床培养48h,酶活最高可达19.1U/mL.酶的最适反应温度40℃,最适pH8.5,该酶具有较好的热稳定性.     

耐热纤维素酶产生菌及产酶条件

从西双版纳温泉水样中分离经鉴定为嗜热脂肪芽孢杆菌的ＣＣ２２菌株（ＢａｃｉｌｕｓｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓｓｔｒａｉｎＣＣ２２）在６０℃生长时,培养液中可积累耐热的ＣＭＣａｓｅ（４３ｍＵ／ｍＬ）和ＦＰａｓｅ,（１０６ｍＵ／ｍＬ）．产酶高峰期在培养１６ｈ左右,最适起始ｐＨ为６．５,温度为６０℃．ＣＣ２２能利用某些无机氮形成纤维素酶,一定配比的有机氮和无机氮的混合物是ＣＣ２２形成纤维素酶的最好氮源．ＣＭＣＮａ纤维二糖及一些农作物原料能作为碳源供ＣＣ２２形成纤维素酶,高浓度葡萄糖对ＣＣ２２纤维素酶的形成有抑制作用．１５ｇ／Ｌ的ＮａＣｌ对ＣＣ２２产酶有抑制作用,但体积分数为１％的６号微量矿质营养液无论对菌的生长和产酶均有显著促进作用．     

一株产耐热碱性脂肪酶芽孢杆菌的筛选及其所产酶性质的研究

从武汉市白沙洲沙鸥食用油总厂分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶的产生菌,经鉴定为产邪包的短杆菌、革兰氏阳性、该菌株的最适生长温度为４５℃,所产酶的最适作用温度为６０℃,最适ＰＨ为１０．０,且ＰＨ在８．０－１１．０范围内酶蛋白性质稳定。     

低温碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶培养基的优化

以橄榄油为唯一碳源,从渤海湾盐碱地被油污染的土样中分离筛选出1株产低温碱性脂肪酶菌株34.5,初步酶学性质研究表明,该菌所产脂肪酶的最适温度为25℃,最适pH为9.6.该菌的16S rDNA基因序列与伯克霍尔德氏菌(Burkholderia)的同源性为99%.摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为(g/L):淀粉10,黄豆饼粉20,玉米浆20,K2HPO41,聚乙烯醇大豆油乳化液20.其最高酶活为6.87 U/mL.     

铜绿假单孢菌脂肪酶产生条件

产生优质脂肪酶的铜绿假单孢菌JEP－606菌株的培养成分（质量分数）为大豆1.5％,玉米浸出液3．0％,葡萄糖0．5％,橄榄油0．75％,当菌株液体培养时,细胞直径约0．4μm,长1．5～3．5μm,革兰氏阴性,产生蓝绿色素．提高菌株脂肪酶活性和生物量的培养条件是：初始pH7．0～9.0,28℃,150r／min,培养时间60～140h,装液量25mL（250mL三角瓶）和0.75％橄榄油．     

产碱性纤维素酶真菌产酶条件的研究

研究了碱性纤维素酶生产菌株镰刀霉菌(Fusarum Sp.)的产酶条件.结果表明:该菌株产碱性纤维素酶的适宜碳源为1%麦杆粉+1%可溶性淀粉,最适氮源为O.2%的(NH_4)_2SO_4加0.1%的酵母粉,接种量为5%,培养时间为72 h,培养温度为46℃,培养基初始pH为8.0.在最适宜的条件下,培养液中内切葡聚糖酶活力可达到1.29 IU/mL,而天然纤维素酶活力和滤纸酶活力却很低.具有这种组分结构的碱性纤维素酶系统在棉织品的生物整理及洗涤剂工业中具有良好的应用前景.     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究Ⅲ.诱变株的选育及其产酶条件的研究

以地衣芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｕｓＬｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）５３号菌为出发菌株，在原生质形成和再生的最佳条件下制备原生质体，并对原生质体进行了多次诱变处理，从大量突变株进行筛选最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌株５３－Ｇ３８－６，产酶活力由１１０４Ｕ／ｍｌ提高到２２０８０Ｕ／ｍｌ．该诱变株最适产酶条件为：培养基由质量分数（ｗ／％）为胰蛋白胨１，酵母膏０．５，玉米粉５，Ｎａ２ＨＰＯ４１２Ｈ２Ｏ０．４，ＫＨ２ＰＯ４０．０３，Ｎａ２ＣＯ３０．１组成，ｐＨ自然，培养温度４２℃，培养时间４４～４８ｈ，ｗ／％为０．２的ＣａＣＯ３可提高酶的产量．酶作用的最适条件：６２℃，ｐＨ１０．０，ｐＨ在９～１０之间稳定     

霉菌产脂肪酶发酵条件的研究

从合肥市不同环境的土壤中分离筛选到几株产碱性脂肪酶的霉菌菌株。这些菌株产酶培养基组成 (% )是 :黄豆粉 4 .0 ,玉米浆 1 .0 ,橄榄油 1 .0 ,小麦粉 1 .0 ,(NH4) 2 SO41 .0 ,K2 HPO40 .2 ,pH自然。产酶的最适温度 2 4～ 2 6℃ ,pH稳定范围为 9.4～ 9.5 ,培养周期为 72h .     

米根霉产脂肪酶的条件及酶学性质

对用于全细胞生物催化剂的米根霉菌株产酶条件的优化及脂肪酶的酶学性质进行了研究。结果表明,在250 mL三角瓶液体培养中,米根霉适宜的产酶条件为：氮源为2%胰蛋白胨与0.1%NaNO3复合,碳源为0.3%的大豆油,培养基初始pH=5.5,培养温度28℃,培养时间约58 h。酶学性质研究表明,所产脂肪酶的最适pH=7.5,最适温度为35℃,该酶在pH为7~9、温度低于40℃的范围内表现稳定,Mg2+对酶活力有一定促进作用。     

一株脂肪酶的筛选和产酶条件及其酶性质的研究

从东营油污样中分离获得一株产脂肪酶的菌株BYCM-1,经鉴定为根霉属.研究了该菌株的产酶条件及其酶性质.研究表明该酶最适的产酶条件为:培养基初始pH 6.5,温度40℃,培养时间72 h.酶作用的最适pH值为8.0,最适温度为40℃.Ca2 和K 对酶活性有一定的激活作用,而Mg2 ,Cu2 ,Fe2 对酶活性有不同程度的抑制作用.     

脂肪酶产生菌Serratialiquefaciens的分离及其酶性质的研究

从油污土样中分离到一株高产胞外碱性脂肪酶的细菌，经鉴定为液化沙雷氏菌。发酵上清液经超滤浓缩，ＤＥＡＥ纤维素层析，透析去盐后 冻干得精酶制品。表面活性剂吐温２０对酶反应也有一定激活作用。液化沙雷氏菌脂肪酶的研究，目前国内外均未见报道。     

产酸克雷伯氏杆菌（Klebsiella oxytoca）的分离及其特性研究

从小麦根系分离筛选到产酸克雷伯氏杆菌(klebsiella oxytoca)一株用乙炔还原法测定其固氮酶活性为2708.33nmC_2H_4/管/小时,研究了菌株的培养和形态特征,生长和生理生化特性。砂培试验表明,以灭菌草炭吸附的菌剂,对小麦有明显的回接效果,已经大面积应用。     

一株产脱毛蛋白酶菌株（Bacillus sp.HX—318）的产酶发酵条件与特性研究

从自然界分离得到的产蛋白酶野生型芽孢杆菌菌株HX-318,其适宜的发酵培养基为(g/L)可溶性淀粉20.0,豆粉20.0,麸皮20.0,CaCO     

L-亮氨酸产生菌的选育及其发酵条件优化

以黄色短杆菌TQ9806(Met^- Ile^L 2-TA^r α—AB^r β—HL^r SG^r Rif^r300μg／mL)为出发菌株，经硫酸二乙酯、紫外线分另4与氯化锂复合诱变，选育出一株利福平抗性为800μg／mL的L-亮氨酸产生菌TK0303，通过对其摇瓶发酵条件的研究和优化，产量由出发菌株TQ9806的22．7g／L提高至目的突变株TK0303的28．3g／L。     

一株热纤梭菌的分离及其纤维素分解活性的初步研究

从牛粪中分离到一株能分解纤维素的高温厌氧梭状芽孢杆菌。该菌接触酶阴性,革兰氐染色阴性。细胞杆状或稍弯(5～10×0.6～0.8μm)。芽孢卵圆形,端生,直径为1.0～1.3μm。极生丛鞭毛,运动。老龄时菌体常呈长丝状(15～30×0.4～0.6μm)。以断裂方式繁殖。最适生长温度为60～65℃,最适pH为6.5～7.0。发酵产物有H_2、CO_2,乙酸、甲酸、乳酸和乙醇等。发酵液中无色素。在纤维素琼脂滚管中形成透明、直径为5～l5mm的圆形分解圈。该菌株在以蛋白胨为唯一碳源和氮源时不生长,能迅速利用葡萄糖或纤维二糖生长。在纤维素上生长时产生孢外纤维素酶,在纤维二糖或葡萄糖上生长时不产生纤维素酶。将在纤维二糖或葡萄糖上旺盛生长的菌接入纤维素培养基中时,需经过10天以上的延迟期才能恢复纤维素分解能力,说明该菌株的纤维素酶是诱导酶。酶的最适温度为65℃,pH为7.2。该菌株的形态、生理生化及酶学性质与Clostridium thermocgllum十分相似,鉴定为同一个种。     

生孢噬纤维细菌的分离纯化及鉴定

采用纤维素琼脂糖双层平板的方法,由土壤中分离纯化出一株好氧性纤维素降解菌.通过对形态学特征及生理生化学特征的研究,初步鉴定该菌为生孢噬纤维细菌(Sporocytophaga) .     

嗜热产甲烷杆菌YT—7菌株的分离和特征

采用严格的 Hungate 厌氧技术,从云南省腾冲高温温泉污泥样品中分离一株嗜热自养产甲烷杆菌 YT-7菌株。该菌株细胞呈长杆状,不运动,不形成芽孢,革兰氏染色阳性。在65—70℃下培养时菌体为0.3-0.4×1.5-13μm。分离物仅能利用 H_2/CO_2为能源和碳源,在无机盐液体培养基中生长,细胞最小倍增时间为3.2小时。滚管菌落呈灰白色,半透明,近圆形;落射荧光显微镜检查呈蓝绿色或黄绿色荧光。YT-7菌株的最适生长温度为65—70℃,低于45℃或高于75℃不生长。最适生长 pH 为6.5—7.0。根据形态和生理性状的研究,分离物暂定嗜热自养产甲烷杆菌 YT-7(Methanobacterium thermoautotrophicumYT-7)。     

一株新型乳酸菌素产生菌的分离及其鉴定

从新鲜牛乳中分离得到乳酸菌Ｘ４。该菌株在发酵过程中产生的乳酸菌素有较广的抑菌谱,不仅对芽孢杆菌、葡萄球菌、链球菌等革兰氏阳性细菌的生长具有较强的抑制作用,而且对大肠杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性细菌的生长也具有较强的抑制作用。经鉴定,Ｘ４ 菌株为乳脂链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍ ｏｒｉｓ ｓｐ．Ｘ４）。     

内孢霉酵母糖化酶产酶条件及酶学特性的研究

本研究对Ｅｎｄｏｍｙｃｏｐｓｉｓｆｉｂｕｌｉｇｅｒａ（内孢霉酵母）糖化酶发酵进行培养基的选择，并对产酶时间、接种量、装量和初始ｐＨ值诸因素进行探讨，获得最佳产酶条件．该糖化酶以可溶性淀粉为底物，最适ｐＨ为５．２，最适温度４０℃；在５０℃以下较稳定，有较宽的ｐＨ稳定范围（ｐＨ３．０－７．０）；米氏常数Ｋｍ＝１２．８４ｍｇ·ｍｌ－１．     

肌苷高产菌TSXB29的转化育种及其发酵条件的研究

以枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＴＸ２（遗传标记Ｘａｎ~－）为供体，以枯草杆菌ＴＳＡ１９（遗传标记Ａｄｅ~－＋Ｈｉｓ~－＋８－ＡＧ~ｒ＋６－ＭＰ~ｒ＋ＳＧ~ｒ）为受体，利用转化法成功地获得肌苷产量高、遗传稳定性好的目的转化子ＴＳＸＢ２９。采用均匀设计理论，利用微机对实验数据进行统计处理，找出了该转化子的最佳摇瓶发酵条件，在该条件下，平均产苷为２７．８５ｇ／Ｌ。经连续摇瓶和斜面传代，发现该转化子是稳定的，具有一定应用价值。