甜瓜下胚轴极性生根机理的研究 Ⅱ外源吲哚乙酸的效应

甜瓜(Cucumis melon L.)下胚轴在正常情况下因形态学下端的内源IAA含量高于形态学上端的而表现为极性生根.附加外源IAA 2.0mg/L可使倒插于培养基中原来不能生根的形态学上端也能生根.倒插时,生根的下胚轴形态学上端内源IAA含量明显升高.因此甜瓜下胚轴形态学上下端生根与否,决定于两端IAA的含量的相对差异.     

甜瓜下胚轴极性生根机理的研究——Ⅰ 内源吲哚乙酸的效应

去除苗端的甜瓜下胚轴在1/4 MS培养基上表现了极性生根现象,也就是只有甜瓜下胚轴的形态学下端生根。分析下胚轴培养前、后形态学上下两端中内源吲哚乙酸(IAA)的含量表明形态学下部中的内源吲哚乙酸含量高于形态学上部的。造成IAA含量差异的原因并非吲哚乙酸的极性运输,而是两部份的吲哚乙酸氧化酶的活性不同。酶的活性是上部强而下部弱,造成了吲哚乙酸的含量上部少而下部多。因而,出现了甜瓜下胚轴的极性生根。     

-甜瓜下胚轴极性生根机理的研究-Ⅰ内源吲哚乙酸的效应

去除苗端的甜瓜下胚轴在1/4MS培养基上表现了极性生根现象,也就是只有甜瓜下胚轴的形态学下端生根.分析下胚轴培养前、后形态学上下两端中内源吲哚乙酸(IAA)的含量表明形态学下部中的内源吲哚乙酸含量高于形态学上部的.造成IAA含量差异的原因并非吲哚乙酸的极性运输,而是两部份的吲哚乙酸氧化酶的活性不同.酶的活性是上部强而下部弱,造成了吲哚乙酸的含量上部少而下部多.因而,出现了甜瓜下胚轴的极性生根.     

甜瓜下胚轴极性生根机理的研究 Ⅲ腐胺对甜瓜下胚轴生根的效应

将甜瓜下胚轴接种在1/4 MS 固体培养基上能诱导其下端形成不定根。在生根过程中,内源腐胺含量增加了。腐胺合成抑制剂 D-精氨酸抑制下胚轴中腐胺的合成,也抑制生根。在外加 D-精氨酸的同时再添加腐胺提高下胚轴的生根率和根长到对照水平。以上结果表明,腐胺与甜瓜下胚轴生根密切有关。     

甜瓜下胚轴极性生根机理的研究Ⅲ腐胺对甜瓜下胚轴生根的效应

将甜瓜下胚轴接种在1/4MS固体培养基上能诱导其下端形成不定根.在生根过程中,内源腐胺含量增加了.腐胺合成抑制剂D-精氨酸抑制下胚轴中腐胺的合成,也抑制生根.在外加D-精氨酸的同时再添加腐胺提高下胚轴的生根率和根长到对照水平.以上结果表明,腐胺与甜瓜下胚轴生根密切有关.     

甘蓝下胚轴不同切段内源IAA水平与不定根发生能力的研究

对甘蓝下胚轴不同切段的不定根发生能力的研究结果表明,从切段1到切段5都不需要任何激素的诱导,能“自发生根”,且不定根发生能力逐步增强。采用酶联免疫法（ELISA）测定了不同切段的内源IAA含量,进一步又对不同切段的过氧化物酶和IAA氧化酶相对活性以及不定根发生的组织学进行了研究,结果表明,内源IAA水平和不定根发生能力不呈正相关,下胚轴不同切段的根原基原始细胞可能处在不定根发端早期的不同时期。作者认为,在甘蓝下胚轴不同切段”自发生根系统“中,内源IAA水平和不定根发生能力不呈正相关,可能是由于该切段的根原基原始细胞已越过了它们分化不定根所需的IAA峰。     

黑芝麻下胚轴离体培养的研究

以晋芝3号黑芝麻(Sesamum indicumDC)无菌苗的下胚轴作为外植体,诱导培养基以MS为基本培养基,添加2.0mg/L6-BA与(0.1mg/L,0.2 mg/L,0.3 mg/L,0.4 mg/L,0.5 mg/L)以及NAA(0.5 mg/L,1.0 mg/L,1.5 mg/L,2.0 mg/L),共9种组合;生根培养基以1/2MS为基本培养基,添加NAA(0.1 mg/L,0.3 mg/L,0.5 mg/L)以及0.1 mg/LNAA和0.1 mg/LIAA,共4种组合,旨在此培养基上诱导黑芝麻下胚轴产生愈伤组织并分化出再生植株。结果表明:在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA培养基上的再生诱导率最高,可达81.8%,并且可使部分下胚轴切段形态学上端形成芽;在1/2MS+0.1mg/L NAA培养基上,再生苗的生根率达100%。     

番茄高效再生体系的建立

以砧木1号番茄的子叶和下胚轴为外植体进行离体组织培养,研究了IAA和6-BA及NAA和6-BA不同激素配比对外植体诱导不定芽及生根的影响。结果表明:培养基MS+0.2mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导子叶外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基,而MS+0.5mg/L IAA+1.0mg/L 6-BA为诱导下胚轴外植体愈伤组织和不定芽的最适培养基;诱导不定芽生根的最佳培养基为MS+0.1mg/L IAA。     

厚皮甜瓜黄河蜜植株再生研究

利用厚皮甜瓜黄河蜜3号子叶及下胚轴进行植株再生实验研究.结果表明:子叶不定芽分化率高于下胚轴,适合子叶不定芽分化的培养基为MS 6-BA1.5 mg/L NAA0.2 mg/L,分化率为60%,每个外植体平均分化芽数9.4个.适合下胚轴不定芽分化的培养基是MS 6-BA 1.75 mg/L NAA0.1 mg/L,分化率为9%,每个外植体平均分化芽数8.5个.对不定芽黑暗处理2天后用1/2 MS IAA0.2 mg/L诱导生根,生根率达91.12%,平均根数为12条.200 mg/L的NAA对无根苗处理20 min后移入1/2河沙 1/2蛭石基质中,1/2 MS营养液浇灌,试管外生根率为52%.     

芍药种子露地播种和低温贮藏过程中内源激素含量的变化

以芍药种子为试材,通过露地播种和低温(5℃)贮藏,研究芍药种子休眠萌发过程中内源IAA、ABA、GA1 3、ZR含量的变化。结果表明:露地播种条件下,种子下胚轴开始伸长时ABA含量迅速下降,GA1 3含量在上胚轴生长前最高,上胚轴生长后下降。IAA和ZR含量在胚芽生长时均呈上升趋势。芍药种子在5℃低温贮藏条件下不能萌发,低温贮藏过程ABA含量并未降低,GA1 3含量先升后降。冷藏芍药种子中IAA和ZR含量明显低于露地播种的种子。     

NAA对薄壳山核桃扦插生根过程中内源激素含量变化的影响

采用当年生薄壳山核桃休眠枝为插穗,分别进行不同NAA浓度处理的硬枝扦插试验,研究薄壳山核桃硬枝插穗在扦插生根过程中内源激素的变化。结果表明:1500 mg/L NAA处理插穗的生根效果最佳,生根率可达79.6%;2通过外源激素处理,IAA、ZR、GA、ABA 4种内源激素在插穗不定根形成过程中含量发生相应改变,从而影响插穗的生长;3在不定根形成初期,即NAA处理后30 d左右,与对照组相比,各处理组插穗的IAA和ZR含量处于较高水平,GA和ABA含量处于较低水平;4薄壳山核桃插穗愈伤组织的形成、不定根的产生和伸长生长等都主要受IAA/ZR调控。     

激素对甘蓝型油菜(Brassica napus L)矮化突变体幼苗生长及内源GA3含量的影响

以甘蓝型油菜矮化突变体“DDF-1”为材料,研究了赤霉素（GA3）、生长素（IAA）和油菜素内酯（BR）3种激素对突变体幼苗的影响,并用石蜡切片观察其细胞形态,用酶联免疫吸附技术(ELISA) 检测下胚轴内源激素GA3含量.结果表明,外加一定浓度的GA3（7 mg/L）对矮化突变体“DDF-1”的下胚轴伸长作用显著,但不能使之恢复到野生型的长度;萌发早期,BR有明显的促进伸长作用,萌发后期效果不明显;突变体对IAA敏感性较弱.三种激素交互作用对矮秆下胚轴伸长的影响也不显著.施加外源GA3的矮化突变体“DD     

酸浆的组织培养与植株再生

以酸浆的叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根为外植体进行离体培养,结果表明:叶柄为酸浆不定芽分化的最佳外植体类型;IAA为诱导叶柄不定芽分化较适合的生长素类型;不定芽分化的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA;丛生芽增殖的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.05 mg/L IAA,增殖系数达5.0;最优的生根培养基为1/2 MS,生根率达91.7%.     

四倍体刺槐扦插生根及相关的生理生化特征

以3年生四倍体刺槐嫁接苗上采集1年生硬枝和嫩枝为试材,研究了不同时期,四倍体刺槐扦插生根与插穗体内酶活性、内源激素和营养物质含量之间的关系,旨在提高四倍体刺槐扦插成活率。结果表明:四倍体刺槐扦插生根率随着插穗体内IAAO活性、PPO活性、ABA含量、可溶性蛋白和可溶性糖含量的升高而升高;随着IAA含量、IAA/ABA比值的升高而降低;与POD活性、ZR含量、还原糖含量变化关系不密切。IAAO活性和ABA含量的升高有助于插穗体内IAA/ABA比值维持平衡,促进生根。推测PPO活性的升高可催化形成较多的生根辅助因子"IAA-酚酸复合物";可溶性蛋白和可溶性糖为插穗生根提供必要的物质基础。     

观赏羽扇豆生根过程中内源IAA和ABA含量变化

采用酶联免疫方法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,对观赏羽扇豆品种尖塔（Minaretie）和奖品（Russell Prize）组培苗生根过程中内源吲哚乙酸（3-Indolyl-acetic acid,IAA）和脱落酸（Abscisic acid,ABA）含量进行了测定,总结IAA和ABA含量与组培生根的相关性,为其微体快繁和工厂化生产提供理论依据。结果表明：（1）IAA含量变化为单峰曲线,呈现“升高-降低-升高”的变化趋势;（2）ABA含量在不定根形成期呈下降并达到最低;（3）IAA含量与生根指数正相关,ABA含量与生根指数负相关,二者协同影响生根。     

光皮桦离体培养形态建成过程中内源激素含量的变化

通过应用ELISA法测定了光皮桦在芽增殖培养基(改良MS 4.5 mg/L BA 0.01 mg/L NAA)和生根培养基(改良WH 3.0 mg/L IBA 1.5 mg/L NAA)上形态建成过程中内源激素的变化,阐明外源激素和内源激素的影响对离体培养形态建成过程中所起的调控作用。结果表明:在形态建成过程中,外源激素的添加使光皮桦某些内源激素发生了变化,从而对芽和根的形态建成起调控作用;内源激素ZR、ABA、IAA、iPA的增加对芽的形成、发育起到促进作用;内源激素IAA、ABAi、PA的增加对根的形成、发育起到促进作用。     

六种甘蓝下胚轴和子叶无性系建立的研究

对6种甘蓝不同器官进行了组织培养和无性系建立的研究,成功诱导了紫甘蓝、皱叶甘蓝、羽衣甘蓝、抱子甘蓝、紫苤蓝和芥蓝的茎尖、下胚轴或子叶分化丛生不定芽.诱导6种甘蓝下胚轴和子叶分化的理想培养基是MS 6-BA(0.5~1 mg/L);诱导不定芽生根的理想培养基是MS IAA(0.2~0.5 mg/L);试管苗移栽、扦插的理想基质是炉灰渣.移栽的试管苗生长旺盛.     

荣莉直接不定芽途径高效再生体系的建立

以茉莉的下胚轴为外植体,研究了茉莉直接不定芽器官发生途径的再生体系．结果表明：以MS为基本培养基,附加0．5mg／L BAP和0．01mg／L NAA的诱导效果最佳,其不定芽再生率高达92％,外植体平均不定芽数目为4．2．适宜不定芽增殖的最佳培养体系为MS＋1．0mg／L BAP＋0．1mg／L NAA．1／2MS＋0．5mg／LIBA＋0．5mg／L IAA＋100mg／L适于再生幼茎的生根,生根率达91％,生根后经移栽成活．     

杂种鹅掌楸扦插生根过程中内源激素的变化

以杂种鹅掌楸为材料,应用酶联免疫吸附测专法(ELISA),研究杂种鹅掌楸插条在扦插生根过程中内源激素含量的变化。结果表明：在不定根发生过程中．5种内源激素在插穗基部和叶内含量总体呈上升趋势,少数下降。各种内源激素在叶内的含量远远高于插穗基部。外源激素(300mg／kgNAA和100mg／kgIBA)处理提高了iPAs和IAA在插穗基部和叶内的含量．却降低了ZRs和ABA的含量,对GA1/3的作用有些不稳定。杂种鹅掌楸插穗内IAA的含量很低．而插穗和叶内ABA的含量却很高,这对不定根的发生很不利。     

毛酸浆下胚轴组织培养研究

以毛酸浆下胚轴为外植体,研究不同激素配比对其愈伤组织诱导、分化及不定芽生根的影响.结果表明,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 3mg/L+NAA 0.2mg/L,愈伤组织分化最佳培养基为MS+6-BA 2mg/+IAA 0.2mg/L,不定芽生根最佳培养基为MS+NAA 0.1mg/L或MS+IBA 0.1mg/L.研究结果为毛酸浆的规模化生产、种质资源的保存和遗传转化提供了理论依据.