青稞叶片原生质体制备体系优化

青稞是青藏高原的主要农作物,研究其原生质体制备的最优体系具有重要意义.以甘露醇浓度、酶解时间、离心速度和不同苗龄为主要影响因素,采用正交试验法,对青稞原生质体制备进行优化.结果 表明:最优条件为以培养7d的青稞幼叶为材料,3％纤维素酶+1％果胶酶+0.5 mol/L甘露醇+0.1％ MES+1 mmol/L CaCl2...     

笋玉米原生质体培养及遗传转化的研究

以自花受粉的笋玉米幼胚为外植体建立了胚性细胞悬浮系,酶解游离原生质体通过液体浅层培养得到了再生植株;通过PEG法和电激法对原生质体进行了遗传转化,转化用外源基因是潮霉素抗性基因和BT基因,原生质体再生愈伤组织经潮霉素筛选后,PEG法和电激法获得抗性愈伤组织的频率分别为9 3%和8.9%,Southem-blotting证明外源基因已整合到玉米抗性愈伤组织细胞基因组中,转基因工程植株的分化工作在正在进行中.     

四季樱草叶片原生质体植株再生的研究

以四季樱草叶片为材料进行原生质体培养。使其形成再生植株．结果发现，不同的植物生长调节剂对原生质体培养和植株再生有很大的关系，其中B5培养基附加KT0．5(mg／L) 2．4-D2 甘露醇0．65有利于细胞旺盛分裂，MS培养基附加ZT3 6BA0．5有利于芽的分化．     

HMC毒素对同核异质玉米叶肉细胞原生质体的影响

制备并纯化了玉米小斑病菌C小种致病毒素(HMC),利用根冠细胞进行毒素活性检测,结果表明其对玉米C型不育细胞质具有专化活性.同时提取了同核异质玉米C103叶肉细胞原生质体,并用纯化后不同质量浓度的HMC毒素对同核异质C103叶肉细胞原生质体进行处理,光学显微镜下观察并统计HMC毒素对同核异质玉米叶肉细胞原生质体的影响,从而对玉米小斑病菌C小种的致病性进行研究.研究结果表明,HMC毒素可以导致C103玉米C型不育细胞质叶肉细胞原生质体质膜破裂,细胞内容物泄漏.     

猴头菌原生质体制备条件的研究

比较了不同酶液、酸碱度，渗透压稳定剂，菌龄和菌丝培养基成分等因素对猴头菌菌丝释放原生质体作用的影响。结果表明：在土豆培养基（ＰＤＰ）上静止浅层培养９６小时的菌丝，用２％的溶壁酶液，以０．６ｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４为渗透压稳定剂，在ＰＨ５．５的条件下酶解，获得的原生质体数最大。     

紫外线对玉米(Zea mays L.)原生质体影响的初步研究

酶解墨西哥黑甜玉米的愈伤组织产生的原生质体,经380μW/cm~2紫外线分别照射30 s,60 s,180 s,300 s,发现原生质体的活力及生长与紫外线的剂量有密切关系,随着紫外线剂量的增大,生长及活性趋于降低.辐照30 s的玉米原生质体与对照都可以恢复分裂并长成愈伤组织;辐照60 s的原生质体可以形成小细胞团,未见形成愈伤组织;而辐照180 s和300 s的原生质体都未见细胞分裂.     

高产春玉米叶片物质生产能力研究

以金山27为试材,当地普通农户栽培模式为对照,研究超高产春玉米叶片物质生产能力,结果表明:高产春玉米较普通农户LAI大,尤以棒三叶以下叶片的LAI差异最大.净光合速率拔节期小于普通农户,吐丝期和乳熟期均大于普通农户,群体光合势全生育期都大于普通农户,吐丝到乳熟期差异最大.高产春玉米产量极显著高于普通农户,产量构成因素中,有效穗数极显著大于普通农户,穗粒数和千粒重略低于普通农户.     

SO2对玉米叶片组织过氧化物同功酶的影响

用动态熏气方法，将室内培养三叶期玉米（丹育六）幼苗进行ＳＯ２熏气，然后用取丙烯酰胺凝胶电泳法，分析熏气后玉米叶片过氧化物同功酶酶带活性和酶谱带数的变化。结果表明，玉米叶片过氧化物同功酶酶带活性，酶谱带数，可见伤害程度在一定接触范围内，与熏气时间和作用浓度成正相关。可以看出，过氧化物同功酶的出现，是ＳＯ２污染的结果，它的呈现程度，可作为植物受ＳＯ２污染的伤害指标。     

蔬菜原生质体制备的实验方法研究

原生质体融合是细胞工程课程实验不可或缺的内容,融合材料的选择以原生质体制备为基础.蔬菜种类丰富,价廉易得,使用安全,是原生质体制备和融合实验的良好材料.以八种蔬菜为原料,采用酶解法制备原生质体.经过初选和再选,确定以青椒和油菜作为融合观察实验的材料;并进一步对其原生质体制备过程中酶解液的种类和处理方法进行研究,确定青椒...     

草菇原生质体的制备与融合研究

项目对低温草菇和高温草菇菌株进行了酶解制备原生质体及原生质体的融合进行了研究.研究结果表明:以融壁酶Novozym234对低温草菇和高温草菇酶解效果较好,酶解浓度为2.5%,稳渗剂以0.5Mol/L蔗糖为佳,pH值保持在8.5左右,以30%的助溶剂(PEG4000-6000)作为融合诱导剂进行草菇原生质体融合,并获得融...     

光对黄化玉米叶片PEP羧化酶活性和特性的调节

以玉米为材料，研究了光对其ＰＥＰ羧化酶活性和特定的调节．发现绿苗远比黄化苗中ＰＥＰ羧化酶活性高，光处理后黄化苗中ＰＥＰ羧化酶活性明显增高，这种增高能被环已酰亚胺所抑制，表明是酶蛋白合成致使酶活性增高的过程。绿苗和黄化苗ＰＥＰ羧化酶在Ｋｍ（ＰＥＰ）、Ｋｍ（Ｇ－６－Ｐ）、Ｖｍａｘ和Ｈｉｌｌ系数等动力学常数上存在差异；前者Ｋｍ（ＰＥＰ）、Ｋｍ（Ｇ－６－Ｐ）和Ｖｍａｘ比后者对应的三个动力学常数大，但Ｈｉｌｌ系数比后者小，说明绿苗和黄化营中的ＰＥＰ羧化酶不完全为同一种酶，而是互为同工酶．黄化苗经照光处理后，其ＰＥＰ羧化酶的动力学常数与绿苗．ＰＥＰ羧化酶的动力学常数趋于相同．这进一步证实光诱导黄化苗中合成了ＰＥＰ羧化酶。     

雨生红球藻原生质体制备与再生育种

研究了高渗溶液组成及浓度、酶的组成与质量分数、预处理方法、温度和pH等因素对雨生红球藻原生质体制备与再生的影响.结果表明:选用细胞数约为106·mL-1的对数生长期细胞,于50 mmol·L-1EDTA和25 mmol·L-1 DTT缓冲液,30℃下恒温处理1h,再于质量分数2.0%蜗牛酶和质量分数1.0%纤维素酶,温...     

北冬虫夏草原生质体的制备及诱变育种

通过对北冬虫夏草(Cordyceps militaris Link)菌种液体发酵培养,离心分离获得菌丝体菌液,分别从渗透压稳定剂、裂解酶、裂解时间及菌龄4个方面优化原生质体制备的条件.结果表明:原生质体制备的最优渗透压稳定剂为0.6 mol/L MgSO_4,最优酶解液为1%纤维素酶,最佳菌龄为5 d,最优裂解时间为2 h.L_(20)(5~4)的正交试验表明,优化条件下制备原生质体为1.46×10~7个/m L.紫外诱变实验结果表明:北冬虫夏草半致死率时的照射剂量约为40 s,诱变距离与致死率成反比,在诱变总时间相同的情况下,诱变受诱变次数影响较小,分次处理和一次处理效果基本相同.以多糖含量为指标,筛选诱变菌株,诱变株多糖含量高于普通菌株,其中17~#菌株多糖含量达6.01%,筛选菌株的稳定性实验表明:继代培养3次,筛选的菌株产多糖能力下降较少,表明筛选菌株具有较好的稳定性.     

烟草原生质体的制备和分析

植物原生质体作为一个良好的实验系统,广泛应用于植物分子及细胞学研究中.本研究以烟草NC89叶片为材料,采用酶解法制备烟草原生质体,经台盼蓝染色鉴定活性,结果显示,分离纯化后的原生质体产量为(12.7±1.6)×106 g-1,表明该方法能成功地制备高产率、高活力的原生质体,建立了一种烟草原生质体的简易制备方法.     

他克莫司产生菌原生质体制备、再生与诱变

对筑波链霉菌的原生质体制备、再生条件进行了研究,建立了筑波链霉菌的原生质体诱变筛选体系.在此基础上,通过原生质体的紫外诱变处理,筛选得到1株高产菌株,与出发菌株相比,该菌株的平均发酶单位提高51.4%.通过原生质体的紫外诱变来筛选他克莫司高产菌株是一种行之有效的方法.     

玉米麸皮中阿魏酰低聚糖的制备

以玉米麸皮为原料,利用纤维素酶辅助木聚糖酶制备阿魏酰低聚糖,通过正交试验对制备条件进行了优化,得到最佳制备条件:反应温度60℃,pH值5.0,反应时间36 h,纤维素酶质量浓度8 g/L,木聚糖酶质量浓度6 g/L,底物质量浓度165 g/L,在此条件下,产物中阿魏酰低聚糖的浓度达到2.127 mmol/L.     

正交设计法探讨茯苓原生质体的最佳制备条件

应用正交设计法研究了不同因素对茯苓原生质体制备的影响.实验结果表明，渗稳剂的种类和酶解时间对茯苓原生质体产量的影响最显著；培养5 d的菌丝体在30 mg/L溶壁酶＋20 mg/L蜗牛酶的酶液中，以0.6 mol/L的蔗糖作为渗稳剂，30℃酶解1 h，茯苓原生质体的产量最高.     

洁霉素产生菌原生质体的形成、再生和融合

洁霉素产生菌不论生长在含有甘氨酸的S培养基或不含甘氨酸的S培养基的菌丝中,其细胞壁均可被溶菌酶溶解而释放出原生质体。甘氨酸浓度为1.0%破壁效果最好,溶菌酶的作用浓度以2.5mg/ml为最佳。原生质体在Hb培养基上能够很好地再生。用P培养基配制的40%(w/v)PEG1000溶液,能有效地诱导洁霉素产生菌原生质体融合。融合重组频率达6.7%。     

深粒高产、优质、多抗、紧凑型玉米杂交种正红6号的选育研究

以美国玉米带杂交种3163为基础材料,利用南北穿梭同步定向育种新方法,用自交系698 3作测验种在S1和S3早期分离世代连续进行早代测定和定向选育,5年内同步育成玉米新自交系K169及其杂交种正红6号(K169×698 3).该杂交种是四川省"十五"期间育成的第一个比对照种增产15%以上的玉米突破性杂交种,并具有籽粒深,综合品质优,抗病、抗倒、耐旱力强,株型紧凑和适应性广等优点,为紧凑型玉米提供了理想的接班品种.