缺铁诱导的水稻根转录本组和蛋白质组分析与膜泡运输

为了解水稻受缺铁胁迫后根细胞整体水平mRNA和蛋白质的变化规律,对缺铁和加铁的水稻根分别进行了转录本组的微点阵分析和翻译水平的蛋白质组双向电泳与基质辅助的激光解析时间飞行质谱(MALDI-TOF)分析.在10531个点的水稻cDNA芯片图谱上,比较缺铁与加铁之间的相对表达水平(REL),发现了451个差异cDNA点,其中在2.0～9.175之间的缺铁诱导上调基因为203个,在0.075～0.49之间缺铁诱导的下调基因为248个.在水稻根可溶性蛋白双向电泳(IEF-SDS-PAGE)结果中,得到多达约1500个点的蛋白质图谱.比较缺铁与EDTA螯合二价铁培养的水稻根可溶性蛋白质图谱,发现了23个差异蛋白质,其中缺铁诱导加强的有4个,减弱的有2个,特异的有7个.从缺铁处理的聚丙烯酰胺凝胶上选取差异蛋白质,用胰蛋白酶进行水解.继而进行了MALDI-TOF检测 ,获得9个蛋白质的肽质量指纹谱的检索数据和分析结果.最后对缺铁诱导的膜泡运输和能量代谢相关的基因做了详尽的分析.     

东亚飞蝗消化系统蛋白质组双向电泳的分析

为了优化东亚飞蝗消化系统双向电泳技术,建立东亚飞蝗消化系统蛋白表达图谱,探讨雌、雄东亚飞蝗消化系统蛋白组分的差异,利用pH值为3~10和pH值为4~7的胶条分别对雌、雄东亚飞蝗消化系统进行双向电泳分析,进行蛋白组学分析.研究结果发现:雌性东亚飞蝗消化系统蛋白种类多于雄性,雌性东亚飞蝗消化系统特异蛋白中偏酸性蛋白数量与偏碱性蛋白相当,而雄性东亚飞蝗消化系统特异蛋白中酸性蛋白多于碱性蛋白.在雌、雄东亚飞蝗消化系统相匹配蛋白中,含量差异达3倍以上的蛋白约占总匹配蛋白的50;.可见,雌、雄东亚飞蝗消化系统蛋白组分存在差异.     

水稻剑叶蛋白质的双向电泳分析

以三系杂交稻不育系武金4A,保持系武金4B剑叶为材料,利用双向电泳技术,获得了孕穗期剑叶蛋白质双向电泳图谱。经考马斯亮兰染色,可辨别出蛋白质斑点数450个左右；经银染复染后,可辨别出约800个左右蛋白质点。蛋白质相对分子量约在14.0kDa～94.0kDa范围内,主要分布在14.0kDa～67.0kDa之间；等电点(pIs)约在3.5～9.5范围内,主要分布在5.0～7.0之间。     

盐胁迫下水稻、番茄蛋白质变化的电泳分析

水稻品种 90 1 7经盐胁迫后 ,分子量约为 45 KD蛋白质减少 ,约为 38KD蛋白质增加 ,同时出现了分子量与调渗蛋白相类似的 2 6 KD蛋白质 ,随着盐胁迫浓度的提高及胁迫时间的加长 ,上述蛋白质谱带变化更为明显 .番茄品种白果强丰经盐胁迫后其真叶中分子量约为1 4KD和 1 7KD蛋白质减少 ,同时诱导出一条分子量约为 2 2 KD的新带 .     

低温胁迫下棉花子叶蛋白质差异表达的双向电泳分析

采用TCA-丙酮沉淀法,改良优化了棉化蛋白质组研究中的双向电泳技术.通过对根和子叶全细胞蛋白的提取、蛋白的溶解、胶条的选择及电泳等环节的优化,得到了重复性很高、分辨率很好的蛋白质图谱.进一步对5 d苗龄的棉花进行4℃低温处理12 h后,提取子叶的蛋白质,利用双向电泳技术分离全细胞蛋白.并用PDQuest软件分析比较棉花子叶在低温处理下的蛋白表达谱,得到了49个有显著差异的蛋白点.其中,低温处理上调表达的蛋白点有27个,减弱表达的蛋白点有22个,推测这些差异蛋白点可能与低温胁迫相关.     

盐胁迫下三倍体小黑杨杂种无性系叶片蛋白质差异表达分析

【目的】探究三倍体小黑杨生长迅速原因。通过蛋白质差异表达分析,深入研究三倍体小黑杨生长发育机理,为其优质高产育种提供参考。【方法】以三倍体小黑杨杂种无性系为材料,分别用75 mmol/L NaCl溶液胁迫处理0、4、8、12和16 d,利用蛋白质双向电泳和MALDI-TOF/TOF质谱技术,探讨其不同处理条件下叶片差异表达蛋白。【结果】共检测到4 000多个蛋白点,包含96个差异蛋白点,其中盐胁迫4、8、12、16 d与对照相比,分别鉴定出5、21、36、34个差异蛋白点,对60个蛋白点进行质谱鉴定,这些蛋白按功能可分为8类:其中光合作用占25%、能量代谢占20%、氧化还原作用占12%、抗性蛋白占8%、生物合成和代谢占7%、运输蛋白占3%、信号转导占2%和未知蛋白占23%。【结论】三倍体小黑杨杂种无性系受到盐胁迫后,多种蛋白质共同参与应答,其中主要是光合作用和能量代谢相关蛋白,本研究可以为盐胁迫下林木蛋白质组学研究提供基础。     

转录因子OsNAC2对逆境下水稻产量性状的影响

以水稻OsNAC2过表达、RNAi转基因株系和野生型(日本晴)为材料,分别在苗期和生殖期进行干旱和盐胁迫处理,探索逆境条件下OsNAC2对水稻产量性状的影响。结果表明,不论是在苗期还是生殖期,OsNAC2-RNAi株系的叶相对含水量均比野生型更高,对干旱胁迫具有更强的适应能力;而OsNAC2过表达株系则相反。虽然苗期和生殖期遭遇盐胁迫的OsNAC2-RNAi株系相比野生型具有更高的叶相对含水量,但是OsNAC2的过量表达与RNAi株系的产量性状跟野生型相比并没有明显不同。生殖期干旱和盐胁迫下转基因株系的产量性状分析显示:干旱胁迫下,OsNAC2-RNAi株系的结实率与野生型相比显著提高了20.8%～29.2%,千粒重则无明显差异;而OsNAC2过表达株系每株粒数和千粒重相比野生型株系均显著降低。虽然盐胁迫下OsNAC2-RNAi株系的分蘖数和有效穗数明显比野生型高,但单株粒数和千粒重则无明显差异。上述结果表明,OsNAC2-RNAi株系具有更强的耐旱性,对于干旱胁迫下水稻的产量有显著的提高作用。     

盐胁迫下水稻和黑麦幼苗蛋白质组份的变化

耐盐的779水稻幼苗中,盐胁迫后诱导出66kD/P15\5和26kD/p16.0的特异蛋白组份,并有多种蛋白质组份消失和含量减少现象,而在盐敏感的早花2号水稻中,虽然也有少数蛋白质组份被诱导产生,但没有检测到66kD和26kD两种蛋白质组份,并且双向SDS－PAGE谱型相对稳定,一般耐盐的黑麦幼苗中经盐胁迫后也诱导出26kD蛋白组份,因此,66kD,26kD两种蛋白组份可能与耐盐性有关。     

红莲型水稻二核期花粉蛋白质组学分析

对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系、保持系和杂种F1二核期花粉总蛋白质采用固相pH梯度等电聚焦/SDS-PAGE进行了双向电泳分离,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱．对其中15差异点进行了肽质指纹图分析或者LC-MS/MS分析．对已鉴定的蛋白质点进行亚细胞定位和功能分析,发现不育系相对于可育系有部分参与蛋白质缺失或表达量降低,可能与线粒体提供能量不足而导致的花粉不能正常发育有关．     

耐辐射菌Micrococcus luteus SC1204总蛋白双向电泳体系的建立

以耐辐射藤黄微球菌Micrococcus luteus SC1204为研究对象,建立总蛋白双向电泳体系.结果表明,采用液氮研磨-酚/超高速离心法提取总蛋白,裂解液Ⅱ(8 mol/L尿素、2mol/L硫脲、60mmol/L DTT、4%CHAPS、40mmol/L Tris、1%pH 3~10NL IPG buffer、0.002%BPB)溶解蛋白,使用24cm、pH 4~7的IPG胶条,上样量250μg及等电聚焦7h(56000Vh),可获得满意分辨率的双向电泳图谱,适用于后续的质谱及差异蛋白质组分析.     

Analysis of Male Sterility-Related Proteins of Young Panicle in Rice (Oryza sativa L.) by Two-Dimensional Electrophoresis

0Introduction Malesterilityisacomplicatedphenomenoninhigherplants,whichestablishesthebiologicalbasisofhetero sisutilizationincropsbreeding,especiallyinrice(Oryzasati vaL.).Themolecularandphysiologicalresearchinplantmalesterility,especiallythediscoveryofth…     

光敏核不育水稻中光敏色素Ⅰ的低温荧光分析

光敏核不育水稻中光敏色素Ⅰ的低温荧光分析王伟童哲（厦门大学生物学系厦门３６１００５）（中国科学院植物研究所北京１０００４４）光敏核不育水稻（农垦５８Ｓ）是从晚粳水稻农垦５８中发现的雄性不育自然突变体，是我国特有的水稻种质资源．农垦５８Ｓ的雄性不育由光...     

着丝粒串联重复序列RCS2对亚洲栽培稻和非洲栽培稻的比较分析

为了揭示中高度重复序列在同为AA基因组的亚洲栽培稻和非洲栽培稻基因组中的差异以及重复序列在.栽培稻种的分化过程中可能起到的作用,利用水稻着丝粒串联重复序列RCS2作为探针分别对籼稻广陆矮4号、粳稻日本晴和非洲栽培稻的体细胞染色体进行荧光原位杂交(FISH)实验,并对其核型进行同源性聚类和比较分析,杂交结果显示:RCS2序列位于在3种栽培稻染色体组中,RCS2序列位于每条染色体的着丝粒位置,但有不同的分布特点,表明该3种栽培稻基因组的RCS2序列有不同的进化方向.探讨了RCS2序列结合Cot-1 DNA FISH方法对水稻染色体组进行核型分析的可行性和优势.     

水稻S_5区候选克隆R2I19的筛选及序列信息学分析

以水稻广亲和品种Cpslo17为材料 ,构建了一个覆盖 9倍核基因组的cosmid文库 ,其平均插入片段约4 0kb。以与广亲和位点紧密联锁的单拷贝分子标记BAC2 3D12的R末端为探针 ,从cosmid文库中筛选得到一个阳性克隆R2I19(～ 32kb)。结合S5位点的高密度连锁图和物理图谱 ,初步确定为S5区候选克隆。对该克隆的 2个TAC亚克隆TRW15 10 (～ 15kb)及TRW15 17(～ 15kb)进行了初步的生物信息学分析 ,证实与已知的水稻基因组序列有很高的同源性 ,并显示其中可能含有与水稻育性相关的基因。     

籼粳杂交稻主要农艺性状之间的遗传相关分析

用混合线性模型方法对舢粳亚种间杂交组合农艺性状的相关性进行了遗传研究,结果表明：被测性状之间大都存在一定程度的相关．其中,株高与实粒数、结实率,穗长与总粒数、实粒数,总粒数与实粒数和结实率,以及实粒数与结实率之间具有显著的表型相关,总粒数与实粒数,实粒数与结实率,以及穗长与株高和结实率之间具有显著的遗传相关．进一步的分析表明,性状之间的遗传相关大多归因于显性效应,而粒重与穗长、总粒数和实粒数之间,以及总粒数与实粒数之间还具有极显著的加性相关     

水稻中一个LRR-RLK基因OsInlk2的克隆与表达分析

富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶(LRR-RLKs)在植物的生长发育过程中起到非常重要的作用,如细胞识别,抵抗病原体的入侵以及自交不亲和反应.现已克隆了一个水稻LRR-RLK基因OsInlk2,并对它进行了序列和表达分析,结果表明OsInlk2由三个部分组成,即胞外LRR结构域,跨膜区域和蛋白激酶区域.种内变异分析表明OsInlk2在籼稻中表达,而在粳稻中却不表达.另外组织表达分析表明OsInlk2在茎和幼穗中的表达量很高,而在叶片和根中的表达量较低.对珍汕97B三叶期幼苗进行盐胁迫和冷胁迫,结果表明随着NaCl浓度的提高,OsInlk2的表达呈先减后增的趋势;4℃低温处理8 h,该基因的表达量比对照降低,但随着处理时间的延长,表达量却急剧上升.     

钠盐胁迫对小麦叶片中过氧化氢和核酸含量的影响

分别用５０、１００、１５０和２００ｍｍｏｌ／Ｌ的氯化钠、硫酸钠和碳酸钠的Ｈｏａｇｌａｎｄ溶液培养小麦６ｄ。结果表明：在盐胁迫下过氧化氢含量上升,叶绿素含量下降,ＤＮＡ、ＲＮＡ含量随着胁迫浓度的增加而降低,ＲＮＡ含量降低较快。ＲＮａｓｅ比ＤＮａｓｅ对盐胁迫敏感,ＤＮａｓｅ在弱胁迫下活性略增大,强胁迫下活性减小,而ＲＮａｓｅ活性在胁迫下随盐浓度的增加而减小,且氯化钠对其影响最小,碳酸钠的影响最大,硫酸