CD4~＋CD45~＋T细胞在反复上呼吸道感染患儿的表达及其与球蛋白的关系

目的：探讨反复上呼吸道感染（FURI）的患儿的CD4＋CD45＋T细胞两个亚群与球蛋白的特点。方法：收集现症及恢复期FURI患儿各26例,选取健康体检者18例作为对照;检测外周血CD4＋CD45RA＋及CD4＋CD45RO＋T细胞亚群的含量,并测定免疫球蛋白IgG、IgA及IgM的含量;且进行相关性分析。结果：健康组的CD4＋CD45RA＋T细胞显著高于恢复组,且恢复组高于现症组（P〈0.05）,但CD4＋CD45RO＋T细胞恰好相反,亦即现症组〉恢复组〉健康组（P〈0.05）;IgG及IgA的变化趋势为：现症组〈恢复组〈健康组,IgM的变化趋势与IgG及IgA相反;Pearson相关性分析显示CD4＋CD45RA＋及CD4＋CD45RO＋T细胞亚群呈显著负相关性（r=-0.791,P〈0.05）,CD4＋CD45RO＋T细胞与IgM呈正相关性,CD4＋CD45RA＋T细胞与IgG及IgA均呈显著正相关性（均为P〈0.01）。结论：反复上呼吸道感染患儿的CD4＋CD45RA＋/CD4＋CD45RO＋T细胞平衡向后者倾斜,且伴随体液免疫免疫失调,是该病的一个重要特征。     

奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎小鼠模型的建立

目的利用从临床乳腺炎奶牛乳样中分离纯化的金黄色葡萄球菌（S.aureus）感染小鼠乳腺,建立奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎小鼠模型。方法将产后8～10 d的ICR远交系母鼠随机分为3组,包括无菌生理盐水对照组,低剂量攻菌组（含金黄色葡萄球菌2×102CFU）和高剂量攻菌组（含金黄色葡萄球菌5×106CFU）。以小鼠第4对乳腺为攻菌部位,用非损伤方法经乳头管注入生理盐水或金黄色葡萄球菌。攻菌24h后采集乳汁进行白细胞计数;从眼球采血,进行血常规检测和流式细胞计数;之后处死母鼠,取乳腺组织进行匀浆细菌计数,并做乳腺组织切片。结果高剂量攻菌组不论是体温、组织学观察,还是乳汁白细胞计数、乳腺匀浆细菌计数、血常规指标和流式细胞计数,都和对照组有显著或极显著差异（P〈0.05）;而低剂量攻菌组与对照组相比,除血液CD4＋/CD8＋比值差异显著外（P〈0.05）,其余指标差异均不显著。结论金黄色葡萄球菌浓度为5×106CFU、攻菌时间24 h时,成功建立了远交系小鼠金黄色葡萄球菌乳腺炎模型,而2×102CFU细菌浓度则不适于远交系小鼠乳腺炎模型的建立。     

28例哮喘性支气管炎患儿的免疫功能测定及其意义

目的：通过对28例喘支患儿外周血T细胞亚群和血清免疫球蛋白及补体C3的测定，分析喘支患儿细胞免疫和体液免疫功能的变化。方法：（1）T细胞亚群（CD3＋，CD4＋，CD8＋）的测定，采用APAAP法。（2）血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM及补体C3用免疫比浊法检测，结果：（1）喘支患儿CD8＋细胞比例明显低于正常对照组（P＜0．01），CD4＋，CD8＋细胞比值明显高于正常对照（P＜0．05），（2）喘支患儿血清中IgA明显降低（P＜0．05），结论：T细胞免疫调节功能紊乱，在喘支的发生中起着一定的作用，为临床上喘支的防治及免疫调节剂的应用提供了理论依据。     

细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3和Eg10免疫差异的初步研究

表达纯化细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3(rEg14-3-3)和Eg10(rEg10),分别免疫小鼠,8w后进行细粒棘球蚴原头蚴攻击感染.计算免疫保护力,检测脾组织中CD4+T、CD8+T细胞亚群以及T细胞增殖情况.实验结果表明,rEg14-3-3免疫组小鼠具有85.3%抵抗细粒棘球绦虫感染的能力,而rEg10免疫组小鼠与对照组小鼠相比无免疫保护力;与PBS对照组相比,只有rEg 14-3-3免疫组的CD4+T细胞亚群的分布有明显差异,且rEg 14-3-3抗原能诱导淋巴细胞显著增殖.因此rEgl4-3-3蛋白能抑制细粒棘球蚴的生长,诱导小鼠产生高水平的免疫保护力,可作为疫苗候选分子.     

抗迟缓爱德华氏菌单克隆抗体制备及初步鉴定

用灭活迟缓爱德华氏菌菌株AL60306NA1免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗迟缓爱德华氏菌的McAb,获得3株可持续分泌抗迟缓爱德华氏菌McAb的杂交瘤细胞株3A7、4F11和4C9;腹水效价分别达到1.0×10-6、1.0×10-6和1.0×10-5;细胞亚型分别为IgG1、IgG2b、IgM.交叉反应结果...     

虫草多糖的免疫调节作用及其抗肿瘤活性的研究

从吞噬细胞的吞噬活性、T与B淋巴细胞增殖、免疫球蛋白产生等方面对虫草多糖(CSP)的免疫调节活性进行了研究,发现CSP可以明显促进由LPS诱导的小鼠脾脏B淋巴细胞和由抗CD3诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖,能明显提高LPS诱导的IgM的产生,但是对LPS诱导的IgA的产生却没有影响.CSP对IgG亚型表现出不同的作用,它能明显抑制IgG2a的产生,而对IgG1的影响与剂量有关,剂量为25 mg/L时能促进IgG1的产生(P<0.001),但是,剂量在50 mg/L以上时则表现明显的抑制效应.本文还对CSP的抗肿瘤作用进行了研究,发现它可以降低S180细胞的增殖活性,明显抑制S180实体瘤的生长.     

熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及免疫调节作用

目的 探讨熊果酸（UA）对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响.方法 皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型,腹腔注射不同剂量UA,检测抑瘤率和免疫器官指数,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测CD4＋、CD8＋T细胞亚群含量及比例,ELISA法检测血清细胞因子IL-2、IL-4和TNF-α的表达量.结果 UA对小鼠皮下移植性肿瘤H22有显著的抑制作用,可降低免疫器官中异常增大的脾指数,增强脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力,提高淋巴细胞亚群CD4＋T细胞表达及CD4＋/CD8＋T细胞亚群比例,促进血清IL-2、TNF-α表达,降低IL-4表达.结论 UA可抑制小鼠肝癌H22肿瘤生长,体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力,其抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关.     

276例临床分离金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 分析住院患者金黄色葡萄球菌的耐药特点,为临床合理用药提供依据.方法 细菌鉴定应用VITEK32全自动微生物分析鉴定系统,采用K-B法对临床分离的金黄色葡萄球菌菌株进行药物敏感性试验;头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA.结果 276株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 165株占59.8％;金黄色葡萄球菌(MSSA) 111株,占40.2％.MRSA对青霉素G、氨苄西林100％耐药;对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁100％敏感;对氯霉素、呋喃妥因、利福平耐药率分别为9.1％、15.2％、17％;其他耐药率都在60％以上.MRSA的耐药率明显高于MSSA,且呈逐年上升趋势.结论 金黄色葡萄球菌对多种抗菌药均具有较高的耐药性,临床应根据药敏结果确定患者的治疗方案.糖肽类抗生素(万古霉素、替考拉宁)可作为MRSA重症感染患者的首选药物.     

头孢曲松钠他唑巴坦钠的体内抗菌作用研究

利用改良寇氏法检测头孢曲松钠他唑巴坦钠 (3∶1和 5∶1)的抗菌活性 .结果表明 :头孢曲松钠他唑巴坦钠对产酶的金黄色葡萄球菌和埃希氏大肠杆菌感染的小鼠体内抗菌活性(ED50 )分别为 4 .0mg·kg- 1、4 .3mg·kg- 1和 0 .0 0 5 6mg·kg- 1、0 .0 0 6 8mg·kg- 1,头孢曲松钠舒巴坦钠 (2∶1)的ED50 值分别为 6 .6mg·kg- 1和 0 .0 1147mg·kg- 1,单组分头孢曲松钠的ED50 为 10 .3mg·kg- 1和 0 .0 6 4 9mg·kg- 1;头孢曲松钠他唑巴坦钠对绿脓杆菌感染的ED50 为 8.2mg·kg- 1和11.2mg·kg- 1,头孢曲松钠舒巴坦钠的ED50 为 16 .1mg·kg- 1,单组分头孢曲松钠的ED50 为 35 .4mg·kg- 1.提示 :头孢曲松钠他唑巴坦钠对产酶的金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌和绿脓杆菌感染的小鼠有明显抗菌作用 ,且明显优于头孢曲松钠单组分和头孢曲松钠舒巴坦钠     

齐墩果酸衍生物的合成与表征及其抑菌活性的研究

齐墩果酸属于五环三萜类化合物,在自然界中分布广泛,并显示出多种生物活性,如:保肝、抗炎、抗病毒、抗癌等多种药理作用,并具有良好的抑菌活性.因此本文以齐墩果酸为先导化合物,对其结构进行了修饰,合成4个中间体和6个新的目标产物,并经过IR、1 H NMR波谱测试技术对其结构进行了表征.并以其对培养于MHB(高铁血红蛋白)的S.a(金黄色葡萄球菌)4220、S.a(金黄色葡萄球菌)209、MRSA(抗甲氧西林金黄色葡萄球菌)3167、MRSA(抗甲氧西林金黄色葡萄球菌)3506、QRSA(抗喹诺酮金黄色葡萄球菌)3505、QRSA(抗喹诺酮金黄色葡萄球菌)3519和培养于BHI中的E.coli(大肠杆菌)1682、E.coli(大肠杆菌)1356等8种菌种进行抑菌活性测试,结果表明,部分化合物的抑菌活性较标准抗菌药物有明显提高.     

基于经验似然修正的艾滋病药物疗效对比分析研究

ACTG 175数据是比较研究艾滋病药物疗效的重要临床试验数据.为了更稳健有效的对不同治疗方案进行比较，该文通过观察第20周时的CD4＋ T细胞数目的中位数差异，提出基于经验似然修正的中位数回归方法来分析研究不同药物治疗方案对艾滋病的疗效，并利用Bootstrap抽样方法分析各组方案的疗效差异.分析结果表明zidovudine和didanosine联合用药效果优于zidovudine单独用药的效果，zidovudine和didanosine联合用药的抗艾滋效果显著最优，zidovudine单独用药的抗艾滋效果要显著劣于zido-vudine、zalcitabine联合用药和didanosine单独用药，zidovudine和zalcitabine联合用药和didanosine单独用药的抗艾滋效果没有显著差别.     

Cloning of complementary DNA encoding T-cell replacing factor and identity with B-cell growth factor II

Proliferation and maturation of antigen-stimulated B cells are regulated by several soluble factors derived from macrophages and T cells. These soluble factors are functionally divided into two groups: B-cell growth factor (BCGF), thought to be involved in B-cell proliferation; and B-cell differentiation factor (BCDF), responsible for maturation of activated B cells into immunoglobulin-secreting cells. This classification needs to be re-examined in the light of the recent cloning of complementary DNA encoding IgG1 induction factor (interleukin-4, IL-4) from the 2.19 mouse T-cell line. Recombinant IL-4 has BCGF and BCDF activities and affects B cells, T cells and mast cells (refs 7, 8; our unpublished data). Another well-characterized B-cell factor is T-cell replacing factor (TRF), which, when secreted by the murine T-cell hybridoma B151K12, is defined by two activities: induction of IgM secretion by BCL1 leukaemic B-cell line; and induction of secondary anti-dinitrophenol (DNP) immunoglobulin G (IgG) synthesis in vitro by DNP-prime B cells. Although TRF from B151K12 was classified as BCDF, purified TRF has BCGF-II activity. To elucidate the molecular properties of TRF we isolated cDNA encoding TRF from the 2.19 T-cell line and report here the structure and multiple activities of this lymphokine.     

Regulation of antibody isotype secretion by subsets of antigen-specific helper T cells

The regulation of the subclass of immunoglobulin secreted by B cells has been studied in vitro in polyclonal systems using mitogens, such as lipopolysaccharide (LPS), to bypass the requirement for cognate interaction between antigen-specific T and B cells. In these systems, interleukin-(IL)-4 induces the secretion of IgG1 (ref. 1) and IgE (ref. 2); IL-5 enhances the secretion of IgA, and interferon-gamma (IFN-gamma) enhances the secretion of IgG2a (ref. 5). Clones of murine TH cells can be divided into two subsets, TH1 and TH2 (ref. 6). Both subsets synthesize IL-3 and granulocyte-monocyte colony-stimulating factor (GM-CSF), but only TH1 clones produce IL-2, IFN-gamma, and lymphotoxin (LT) and TH2 clones produce IL-4 and IL-5 (ref. 7). We have examined the role of clones of antigen-specific TH1 and TH2 cells in the regulation of the subclasses of IgG antibody secreted by antigen-specific B cells. Our results show that both types of TH cells induce the secretion of IgM and IgG3, whereas clones of TH1 and TH2 cells specifically induce antigen-specific B cells to secrete IgG2a and IgG1, respectively. We also demonstrate that regulation of commitment to the secretion of a particular IgG isotype occurs in two distinct stages: cognate interaction between T and B cells and interaction between T-cell-derived lymphokines and B cells.     

胃癌小鼠模型中T淋巴细胞检测及初步分析

为建立胃癌小鼠模型,检测T淋巴细胞在免疫系统的水平变化,探讨其在胃癌免疫系统中的作用。采用在615近交系小鼠皮下注射MFC胃癌细胞建立胃癌小鼠模型。流式细胞仪检测胃癌小鼠(n=20)及正常小鼠(n=20)脾脏CD4+CD25+Treg及T细胞亚群水平。结果显示,胃癌实验组小鼠脾CD3+T(42.87±4.33)%和CD8+T(36.55±3.15)%细胞较正常组升高(P0.01);CD4+T(55.02±2.64)%细胞及CD4+T/CD8+T(1.48±0.13)细胞比值较正常组降低(P0.01);胃癌实验组小鼠脾CD4+CD25+Treg(2.14±0.91)%细胞较正常组升高(P0.01)。由此可知,胃癌小鼠脾Treg细胞水平升高,CD4+T降低,CD3+T、CD8+T升高,CD4+T/CD8+T比值降低,可能在胃癌细胞免疫逃逸过程中发挥一定作用。     

恶性实体瘤患者自体CIK细胞的体外大量扩增后的免疫表型变化

目的:回顾性分析我院2009年1月至2010年5月行细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗的59例实体瘤患者的自体CIK细胞体外扩增后免疫表型的变化,为恶性实体瘤患者开展CIK细胞治疗提供实验依据。方法:采集59例恶性实体瘤患者外周血单个核细胞,培养体系加入IFN-γ、CD3McAb及IL-2三种细胞因子体外诱导,培养10～14 d;用流式细胞仪分别检测CIK细胞培养前后的免疫表型,进行配对t检验。结果:CIK细胞培养后单个核细胞,CD3+细胞,CD3+CD4+细胞,CD3-CD56+细胞,CD3+CD56+细胞均较培养前增加,差异有统计学意义(P<0.05)。CD3+CD8+细胞,虽然较前增加,但差异无统计学意义(P>0.05),CIK细胞中CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD3-CD56+表型的细胞比率与培养前相比均有所下降,差异有统计学意义(P<0.05),但CD3+CD8+细胞比率与培养前差异无统计学意义(P>0.05)。而CIK细胞的纯度从培养前(9.90±8.96)%增至(46.55±19.25%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:恶性实体瘤患者自体CIK细胞体外扩增后,CIK细胞纯度显著增加。     

体外激活CD8~+T细胞表达CD69及γ-干扰素的研究

目的 :研究正常人外周血CD8+T细胞体外活化表达早期活化标志CD69分子及γ -干扰素 (IFN -γ)的规律 方法 :以佛波醇酯 (PDB) +离子霉素 (Ion)或植物血凝素 (PHA)体外活化人外周血单个核细胞 (PBMC) ,利用流式细胞术分析CD8+T细胞表达CD69及IFN -γ的情况 结果 :PDB +Ion和PHA活化CD8+T细胞CD69的表达率 ( % )分别为 78.4± 5.3和 2 7.4± 4 .4 ( x±s) ,明显高于对照组 ( 1.5± 0 .6) (P <0 .0 5) 当monensin存在时以PDB +Ion及PHA刺激 4h后IFN -γ阳性CD8+T细胞的百分比分别为 2 9.7± 6.5及 5.9± 1.8,均明显高于对照组 ( 0 .7± 0 .2 ) (P <0 .0 5) ,其中前者表达率高于后者 (P <0 .0 5) 结论 :PDB +Ion和PHA均可刺激CD8+T细胞表达CD69以及IFN -γ ,前者的刺激作用明显强于后者     

灵芝菌丝体碱提多糖对小鼠细胞免疫的作用

体外灵芝菌丝体碱提多糖对脾细胞增殖反应和巨噬细胞的吞噬能力均有促进作用,但显示出低剂量增强、高剂量抑制的双向调节能力.体内实验表明灵芝菌丝体碱提多糖高、低剂量组灌胃给药在第10天时,能够最大增强淋巴细胞增殖反应.同时,显著升高CD 4T细胞的百分率,而对CD 8T细胞的百分率无影响,从而改善CD 4T/CD 8T细胞的比值,促进荷瘤小鼠恢复正常的免疫平衡状态.因此,灵芝菌丝体碱提多糖对小鼠体内外细胞免疫有直接作用,但有剂量和时间依赖性.     

Germinal centre B cells: antigen specificity and changes in heavy chain class expression

Germinal centres are histologically defined aggregates of blast cells that occur in B-cell areas of lymphoid tissues after antigenic stimulation. They are believed to be associated with the development of B-cell memory and plasma cell (especially secondary, IgG and IgA) responses. Recent studies of murine lymphoid tissues have defined cell-surface markers that distinguish germinal centre B cells from other mature B cells, permitting their identification and characterization in cell suspensions. Here we have used these markers to define and study germinal centre cells in lympho nodes, and have found that they constitute a unique population of B cells which (1) arises in response to antigenic stimulation, (2) contains nearly all of the demonstrably antigen-specific B cells in the stimulated organ, (3) bears surface IgM after primary stimulation and (4) as a population, demonstrates isotype switching to a predominant population, demonstrates isotype switching to a predominant surface IgG phenotype after secondary stimulation with specific surface IgG phenotype after secondary stimulation with specific antigen. These findings demonstrate that germinal centres are a major site of proliferation and differentiation of antigen-specific B cells in vivo, and suggest that the germinal centre microenvironment may have an important role in heavy chain class switching during B-cell responses.     

沙参麦冬汤对运动性免疫抑制干预作用的研究

目的观察沙参麦冬汤对游泳小鼠免疫指标和运动能力的影响,为改善运动性免疫抑制寻找有效的干预措施。方法建立运动性免疫抑制的模型,观察沙参麦冬汤对小鼠免疫器官、外周血T淋巴细胞亚群及运动能力的影响。结果与运动组比较,运动＋沙参麦冬汤组小鼠的脾指数、胸腺指数、CD4^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋／CD8^＋比值均显著提高（P〈0．05）,并明显延长了小鼠力竭性游泳时间（P〈0．05）。结论沙参麦冬汤能改善大强度运动训练引起的小鼠免疫功能低下,提高小鼠的运动能力。