用蛋白内源荧光法考察盐溶液中两种外周蛋白构象的变化

作者借助由278nm和295nm光源激发的蛋白质内源荧光分析，考察了在几种盐溶液(甲醇和NaCl，NaCl，脲，三氯乙酸，CaCl2)中23kD，17kD蛋白构象的变化。结果表明，由295nm波长的光激发时，17kD蛋白荧光发射峰位于328nm处和360nm附近，这表明大部分17kD蛋白的Trp^71处于分子内部；23kD蛋白具有326nm荧光发射峰，表明23kD蛋白所含2个色氨酸残基(Trp^34和Trp^168)处于其分子内部的疏水部位。CaCl2、脲、NaCl、三氯乙酸、甲醇和NaCl对17kD和23kD外周蛋白的内源荧光都有影响，其中CaCl2、甲醇和NaCl的影响较大，脲、NaCl的影响相对较小，这反映了两种蛋白在溶液中的构象易发生改变。     

几种盐类对光系统Ⅱ33kD锰稳定蛋白溶液构象的影响

借助内源荧光和圆二色谱分析，考察了几种不同的盐溶液（CaCl2,NaCl,脲，三氯乙酸、二硫苏糖醇）对水溶液中33kD蛋白构象的影响，以295nm波长的乐激发时，33kD蛋白具有330nm的荧光发射峰，表明33kD蛋白所含唯一的^241Trp位于分子内部的疏水部位，CaCl2、脲、三氯乙酸或二硫苏糖醇的存在，均会改变33kD蛋白的内源荧光的强度和位置，而NaCl几科无影响，脲、二硫苏糖醇对33kD蛋白的二级结构的影响较大，因此维系33kD蛋白构象的主要因素包括：二硫键、疏水作用、范得华力和氢键，而离子键的贡献较小。     

Se(Ⅳ)与藻蓝蛋白相互作用的谱学研究

用吸收、荧光、红外等谱学方法研究了藻蓝蛋白（PC）与Se（Ⅳ）的相互作用．结果表明,SeO3^2-加入后,藻蓝蛋白在620nm处的特征光吸收减弱,并随Se（Ⅳ）浓度和时间的增加而降低,而278和347nm处的光吸收增强;荧光发射和荧光激发也逐渐减弱,而599和629nm处的2个激发峰的相对强度与对照相反．PC在475和662nm处分别出现共振散射峰．Se（Ⅳ）与PC的作用后,在595nm处出现强的共振散射峰,被指认为液相纳米硒粒子与PC生成的缀合物的共振散射峰．红外光谱图中,PC的酰胺Ⅰ带为1653．2cm^-1,为α螺旋,而PC—Se（0）生物缀合物的酰胺Ⅰ带为1647．0cm^-1,属无规则卷曲。     

阿魏酸的荧光光谱与荧光量子产率

在酸性条件下,阿魏酸荧光强度随pH值的升高而增大,荧光峰的最大激发和发射波长分别为310 nm和415 nm。在碱性条件下,最大激发波长和发射波长红移到350 nm和460 nm处。随着pH值的升高,其荧光强度逐渐增大,当pH值大于10.0时,其荧光强度达到最大值且趋于稳定。阿魏酸的荧光光谱随pH值的变化是由于其分子中羧基和羟基质子的离解。以硫酸奎宁为参比,测得阿魏酸水溶液的荧光量子产率为0.006 1。     

Se(IV)与藻蓝蛋白相互作用的谱学研究

用吸收、荧光、红外等谱学方法研究了藻蓝蛋白(PC)与Se(IV)的相互作用.结果表明,SeO2-3加入后,藻蓝蛋白在620nm处的特征光吸收减弱,并随Se(IV)浓度和时间的增加而降低,而278和347nm处的光吸收增强;荧光发射和荧光激发也逐渐减弱,而599和629nm处的2个激发峰的相对强度与对照相反.PC在475和662nm处分别出现共振散射峰.Se(IV)与PC的作用后,在595nm处出现强的共振散射峰,被指认为液相纳米硒粒子与PC生成的缀合物的共振散射峰.红外光谱图中,PC的酰胺I带为1653 2cm-1,为α螺旋,而PC-Se(0)生物缀合物的酰胺I带为1647 0cm-1,属无规则卷曲.     

异丙肾上腺素荧光猝灭法测定水中痕量锰

报道了异丙肾上腺素与MnO4^-的反应,结果表明，在pH=9．91的伯瑞坦-罗比森缓冲溶液中，异丙肾上腺素可被高锰酸根氧化，导致其荧光强度显著减弱；最大激发及发射波长为278nm和616nm；MnO4^-质量浓度在0．1～6．4mg／L范围内，与荧光猝灭程度成正比．常见的共存离子不干扰其测定．本方法用于环境水样中痕量锰的测定，回收率为97．2％～104．0％，结果令人满意．     

水杨基荧光酮的荧光光谱与荧光量子产率

研究了水杨基荧光酮(SAF)的荧光光谱和荧光量子产率,发现在pH2.0以下,SAF无荧光,随pH升高,SAF由非荧光体转化为荧光体,荧光强度增强,在pH6.0~7.0,SAF有稳定的强荧光,最大发射波长537,nm,最大激发波长507,nm.在碱性条件下,随pH升高,SAF荧光强度下降,当pH在10.0以上SAF无荧光.在pH=6.5的缓冲溶液中,SAF稀水溶液的荧光强度与浓度之间存在良好的线性关系,线性范围为2.0×10-7~1.2×10-6,mol/L,检出限为5.2×10-9,mol/L.SAF在醇溶液中,激发波长蓝移,发射峰红移,Stokes位移增大.在稀水溶液中,β-环糊精对SAF的荧光强度有很强的增敏作用.以罗丹明6,G为参比,使用Williams梯度法测量了SAF的荧光量子产率,在激发波长500,nm处的荧光量子产率为0.68.     

氯化钕与苯并咪唑二元配合物的荧光光谱

目的研究氯化钕苯并咪唑二元配合物光致发光性质。方法采用日立F-4500荧光仪,氙灯为激发光源,测量了浓度为1×10-3mol/L氯化钕苯并咪唑配合物水溶液的三维荧光激发和发射光谱;分别以532 nm定激光作为激发光和采用OPO激光为激发光源,测量了该固体配合物荧光光谱。并对配合物的升频转换荧光性质及其机制进行了讨论。结果当激发光波长为250 nm时,配合物水溶液产生波长为290 nm和360 nm的荧光谱线;在540 nm激发光激发下产生290 nm和360 nm两个弱的荧光峰,这两处的荧光是钕配合物的升频转换荧光。该配合物水溶液荧光强度均弱于其固体配合物。结论氯化钕苯并咪唑配合物具有优良的光致发光特性并具有优异的升频转换荧光性质。     

锰-氧氟沙星配合物的光谱研究

对氧氟沙星(OFLX)以及Mn2+与OFLX配合物的紫外-可见光谱及荧光光谱进行研究,发现OFLX在pH为5.1时,其最大激发波长293 nm,最大发射波长497 nm,且随溶液pH的改变,最大激发和发射峰位也发生变化.采用摩尔比法测定Mn2+与OFLX形成1∶2的配合物(pH=9.0),稳定常数为1.37×1011.pH值对Mn2+与OFLX配合物的荧光光谱强度的影响研究表明:配合物的荧光强度在酸性溶液中较强,中性溶液中最强,碱性中最弱;OFLX与Mn2+形成配合物的荧光显著增强且发射峰产生蓝移(约15 nm),随着Mn2+数量的增加,荧光猝灭越来越弱;在OFLX与Mn2+的配合物中,可能是相距较近的羧基和羰基基团与中心离子Mn2+配位,并对配合物的空间结构进行了预测.     

金属离子和变性剂对黄精凝集素Ⅱ构象与功能的影响

黄精凝集素II（Polygonatum cyrtonema Hua.Lectin II,PCLII)具有323nm的荧光发射峰和281．6nm的激发峰,其远紫外圆二色谱（CD谱）显示224nm负峰,分子中含有17．3％的α螺旋和45．8％的β折叠,在10mmol/L的SDS中,PCL II完全丧失兔红细胞凝集能力及促T－淋巴细胞有丝分裂活性,CD谱呈现双负峰的a螺旋构象,去除SDS后,则呈无规卷曲构象,此时,荧光发射峰红移而激发峰蓝移,PCL II仍完全失活,在EDTANa2溶液中,PCL II凝集红细胞能力及促淋巴细胞有丝分裂活性完全丧失,去除EDTA后,红细胞凝集活性完全恢复,但仍失去促淋巴细胞有丝分裂能力,PCL II二级结构变化不大,荧光光谱的变化表明微环境受到影响。     

萘醌溶液的吸收和荧光光谱分析

研究了萘醌的吸收光谱特性和紫外光激励下的荧光光谱特性,分析了吸收光谱和荧光光谱随萘醌浓度改变的变化规律及两种光谱技术检测萘醌的工作曲线和检测限。结果显示,萘醌溶液对波长245 nm的紫外光有强烈的吸收,在331 nm处有次吸收峰出现,且吸收峰的强度随溶液浓度的降低(10→2μM)呈线性衰减。萘醌吸收光后有较好的荧光发射性能,在250~600 nm波段有明显的荧光发射,荧光峰位于423 nm处。最佳激励波长为306 nm,荧光峰的强度随溶液浓度的变化(10→2μM)呈线性分布。萘醌浓度梯度的吸收和荧光光谱分析结果显示,两种检测方法对于萘醌的检测限均为2μM。     

一种锌基-类杯[3]芳烃化合物对氨基葡萄糖的识别

设计合成了一种锌基-类杯[3]芳烃化合物Zn-Lg1,实现了对氨基葡萄糖的高灵敏度识别.利用紫外-可见光谱和荧光光谱等研究了Zn-Lg1对氨基葡萄糖的识别过程与机理.紫外-可见光谱表明,向Zn-Lg1中加入氨基葡萄糖后,波长423 nm处的吸收峰下降, 320和281 nm处吸收峰增强,等吸收点为360 nm,说明氨基葡萄糖分子已经进入Zn-Lg1内部,主客体计量比为1∶1,平衡常数为1.6×103L/mol.通过对比研究无磺酰胺基团的类杯[3]芳烃化合物Zn-Lg2对氨基葡萄糖的识别效果,分析了Zn-Lg1中磺酰胺部分的氢键在识别中的作用.荧光光谱表明,向Zn-Lg1中加入氨基葡萄糖后,激发波长为360 nm,发射波长从516 nm略蓝移至513 nm,荧光强度增强,最低检测限达到5.0μmol/L.     

一种苄基多糖类化合物的荧光性能研究

对龙胆科喉毛花属植物长梗喉毛花全草中提取的苄基木糖葡萄糖苷的荧光性能进行了分析.该结构经波谱分析和文献对照确定为苄基木糖葡萄糖苷.通过研究该化合物在不同pH条件下和不同溶剂环境中荧光强度的改变.得到了以下光谱性能结果.此苄基糖苷在乙醇∶水(体积比,2∶8)溶液中的最大激发波长位于210 nm,最大发射波长位于278 nm.在不同的pH条件下,此苄基木糖葡萄糖苷对pH变化的响应并不明显,荧光强度几乎不发生改变,表明化合物在不同的pH范围内荧光强度保持稳定,不同溶剂荧光测试结果表明,化合物在乙醇中的荧光响应最稳定,考虑到对生物细胞成像、食品科学和医学等研究领域的应用,具有潜在的价值.     

高Tc超导体YBa_2Cu_3O_x和YBaCu_2O_x的荧光光谱研究(英文)

本文分别在室温和液氨温度下,测定了高Tc超导体YBa_2 Cu_3 O_x和YBaCu_2O_x的UV激发荧光光谱。所观察到的位于390hm左右的宽发射峰与X-光激发荧光光谱的结果相吻合。激发光谱出现了246nm、275nm和308nm三个峰,它们的相对吸收强度和温度的变化有关,初步认为这一现象可能与超导性质存在者一定的关系。     

两种激发光诱导的硫氧还蛋白还原酶分子荧光光谱研究

分别以波长为253．7nm的紫外光及波长为407nm的紫色发光二极管为激发光源,诱导硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TR)分子产生荧光,用组合式多功能光栅光谱仪记录荧光谱。通过分析比较TR溶液与溶剂的荧光光谱,得到了这2种激发光诱导的TR分子荧光光谱的特性。该文的研究结果为进一步将荧光光谱法用于TR的定性、定量分析乃至结构分析提供了依据。     

血清中盐酸洛美沙星的测定及荧光光谱特性

用荧光分光光度法研究了盐酸洛美沙星在血清中的荧光光谱特性,并对其在血清样品中的含量进行了测定．用乙腈沉淀蛋白对血清进行预处理,在硼酸盐缓冲溶液中,用硫酸调节酸度,并使其pH值为3．0,以β环糊精为荧光增敏剂．通过扫描其激发光谱和发射光谱,可知盐酸洛美沙星在血清中有以下荧光特性盐酸洛美沙星血清提取液和盐酸洛美沙星的标准溶液具有相同特征的激发光谱和发射光谱,其激发波长为288nm,发射波长为450nm,也即药物光谱不受血清成分干扰,但血清样品对盐酸洛美沙星的荧光强度造成强烈的荧光猝灭．测定血清中盐酸洛美沙星的线性范围为0．v5～5．0μg·ml,其回归方程为y＝-0．2370+4．809X(R＝0．9968),血清中盐酸洛美沙星的平均回收率为99．5％,方法的相对标准偏差为0．82％(n＝5)．     

乙醇对鲍鱼碱性磷酸酶活力与构象的影响

以乙醇为效应物研究对鲍鱼碱性磷酸酶(ALP)活力影响的结果表明．酶的剩余活力随着乙醇浓度增大而迅速下降，乙醇浓度40％可使酶活力完全丧失．说明乙醇对鲍鱼ALP有明显的失活作用，JG50为13％．含较低浓度乙醇(30％)的失活过程是可逆的反应．测定乙醇对酶的失活作用机理．结果表明乙醇对鲍鱼ALP的失活作用是非竞争性机制，说明底物存在不影响乙醇对酶的失活作用．应用荧光光谱、紫外吸收光谱研究鲍鱼ALP经乙醇微扰后的分子构象变化，发现乙醇对酶分子构象有显的影响，酶的内源荧光强度随乙醇浓度增大而增强．荧光发射峰逐渐发生红移．紫外吸收光谱在276nm吸收峰随乙醇浓度增大而增强．这些结果表明．酶蛋白分子中的生色基团残基的微环境发生变化．     

氧氟沙星荧光光度法测定痕量铁

研究了在HAc-NaAc缓冲溶液中氧氟沙星与Fe(Ⅲ)的络合反应，结果表明：在pH=4．0的缓冲溶液中，氧氟沙星有稳定而较强的荧光；与Fe(Ⅲ)络合后，荧光强度减弱．最大激发及发射波长为324nm和498．6nm，Fe(Ⅲ)的质量浓度在0．56～3．08mg／L范围内，荧光强度与浓度呈良好的线性关系．检出限为0，076mg／L，常见的共存离子不干扰其测定．本方法用于水中痕量铁的测定，得到了满意的结果。     

蓝隐藻色素蛋白复合物的分离和分析

分别采用等电点聚焦（IEF）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）方法分离蓝隐藻（Chromonas placoidea）类囊体膜色素蛋白复合物．经IEF分离得到5条带，依迁移距离从小到大命名为带Ⅰ（黄绿色，叶绿素蛋白复合物）、带Ⅱ（桔红色，类胡萝卜素-蛋白复合物）、带Ⅲ-Ⅴ（蓝色，隐藻藻蓝蛋白），其等电点分别为pH4．5、4．7、5．2、5．4和5．9．经PAGE分离最多得到4条色素蛋白带，分别为PSI中心复合物CPI和PSI复合物颗粒CPIa以及2个特异的藻蓝蛋白（PC）-Ch 1 a／c-捕光蛋白复合物．值得注意的是，给予580、460和435nm的激发光，捕光复合物都可发射680-682nm Chl a的荧光．这一结果表明，蓝隐藻中藻胆蛋白与捕光叶绿素蛋白的是紧密结合存在的，并且具有能量传递关系．     

脉冲LED激发罗丹明B瞬态荧光光谱特征

采用发光二极管(LED)脉冲光源作为激发光,研究罗丹明B荧光的瞬态光谱特征.激发光源为3个中心发射波长分别为406,464和528 nm的超高亮紫光、蓝光和绿光LED.实验结果表明:不同激发光颜色(波长)、不同脉冲宽度和不同罗丹明B浓度得到的荧光强度有很大差别;在同一浓度下,激发光持续时间(脉冲宽度)小于10 ms,只...