草鱼基因组随机扩增多态性引物及多态性位点的筛选

为了建立草鱼基因组DNA多态性分析的指标体系,应用RAPD技术,从180条10碱基随机引物中筛选出了31条能扩增出多态性DNA片段的引物。用这31条多态性引物共扩增出了327条重复性好、带型清晰、分辨率高的谱带。扩增产物的片段大小范围在400—2000bp之间。单一引物扩增条带为5—14条。用这些多态性引物在草鱼基因组DNA中检测到了93个多态性位点,并对这些多态性位点上的等位基因频率进行了统计分析。这31条多态性引物和所检测到的93个多态性位点初步为草鱼基因组的多态性分析提供了可靠的分析指标体系。     

5种白蚁基因组DNA随机扩增多态性研究

采用RAPD（Random amplified polymorphic DNA)技术对尖唇异白蚁（Heterotermes aculabialis)、黄肢散白蚁（Reticulitermes flaviceps)、扩头散白蚁（R.ampliceps)、细颚木鼻白蚁（Stylotermes angustignathus)和陇南树白蚁（Glyptotermes longnanensis)等5种白蚁的基因组DNA多态性进行了初步分析。在所用的20个随机引物中有4个引物能扩增出稳定的带型,5种白蚁6个群体共扩增出43条带,均为多态性片段;同一种类不同群体和同一群体不同品级间存在一定程度的多态性,但种间扩增片段差异显著大于种内差异。以UPGMA方法将扩增片段分布和共享度数据矩阵进行聚类分析,所得结果支持我国异白蚁属与散白蚁属合并的观点。     

经大豆DNA溶液处理后选育的变异水稻基因组RAPD分析

利用花粉管通道法和浸种及苗期浇灌法,将供体大豆DNA直接导入受体水稻,获得两种水稻变异株系。采用RAPD技术对供体大豆、受体水稻和两种水稻变异株系的基因组进行了多态性分析。所用31种10碱基随机引物中有24种扩增出清晰的DNA条带。分析比较了4个样品DNA扩增条带的相似率。根据试验结果分析,外源大豆DNA导入受体水稻能引起后代基因DNA序列变化,扩大水稻的遗传组成;作者还分析了由外源大豆DNA导入引起受体水稻产生变异现象的原因。     

丁(鱼岁)遗传多样性的随机扩增多态性DNA分析

利用RAPD分子标记技术对15个丁鱼岁养殖个体的遗传多样性进行分析.选用20个随机引物对其基因组DNA进行PCR扩增,有16个引物可以扩增出稳定且清晰的条带,其中S103、S104和S105为多态引物.16个引物共扩增出65个DNA位点,片段大小在200~3 000 bp之间,其中多态性位点6个,多态位点比例为9.23%.个体间遗传距离在0~0.067 4之间,平均遗传距离为0.028 6.结果显示,丁鱼岁养殖群体的遗传多样性水平较低.     

慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质基因组DNA表观遗传学变化的MSAP分析

以灌胃腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭Wistar大鼠为实验材料,用高效液相色谱法(HPLC)检测了大鼠血清Hcy浓度的变化;应用甲基化敏感扩增多态性(methylation-sensitive amplification polymorphism,MSAP)技术,检测了慢性肾衰大鼠肾皮质基因组DNA甲基化程度的变化,并对M...     

日本棘隙吸虫生活史及流行学的研究

本文对日本棘隙吸虫Echinochasmus japonicus生活史各期进行了详细的描述补充了未被报告的蚴虫期,使生活史得以完整;调查并感染实验证实在我国纹沼螺是该吸虫第一中间宿主,18种螺、鱼和蝌蚪充当第二中间宿主(其中6种为新的中间宿主);首次报告本省纹绍螺及家禽自然感染情况;同时找出该吸虫病传播的新途径,为防治本病提供了科学依据.     

黄牛与水牛的毛状肉孢子虫同工酶研究

采用聚丙蚌酰胺垂直平板梯度凝胶电泳的方法,对寄生于黄牛和水牛的毛状肉孢子虫进行同工酶比较研究,探讨肉孢子虫的宿主特异性。结果表明黄牛与水牛的毛状肉孢子虫同工酶与工酶谱非常相似,只在活性上略有差异,酶谱存在不同程度的种间盖异可作为黄牛与水牛的毛状肉孢子虫同工酶的遗传鉴定标记。从分子水平证明黄牛和水牛都是毛状肉孢子虫自然中间宿主。     

黄牛与水牛的毛状肉孢子虫同工酶研究

采用聚丙烯酰胺垂直平板梯度凝胶电泳的方法,对寄生于黄牛和水牛的毛状肉孢子虫进行同工酶比较研究,探讨肉孢子虫的宿主特异性.结果表明黄牛与水牛的毛状肉孢子虫同工酶与工酶谱非常相似,只在活性上略有差异,酶谱存在不同程度的种间差异可作为黄牛与水牛的毛状肉孢子虫同工酶的遗传鉴定标记.从分子水平证明黄牛和水牛都是毛状肉孢子虫自然中间宿主.     

葫芦科作物属种间RAPD多态性分析

选用了１４ 个随机引物,对葫芦科３ 个属的１２ 种材料作 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 多态性分析,并对各材料的指纹图谱进行了聚类和相似性分析。结果表明,１２ 种材料基因组的分析结果与传统分类学的结果基本相符,同时３ 属内各种间都具有其特殊的扩增带,这些带可作为分子标记应用于植物的分类和鉴定。     

毛白杨雌雄株过氧化物酶同工酶的等电聚胶电泳分析

用聚丙烯酰胺等电聚胶电泳分离毛白杨过氧化物酶同工酶,可以克服聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳的分辨率低、酶易扩散、电泳时间长等缺点。雌株可分离到10～12条电泳区带,雄株仅得到4～5条。电泳时间由原来的7h缩短至4h。另外,雌雄株间的可溶性蛋白质含量、过氧化物酶活性及色谱扫描曲线都有明显的差异。     

胡卢巴基因组DNA提取及RAPD引物筛选

以胡卢巴叶片为材料,利用改良CTAB法提取基因组DNA并进行质量检测和含量测定,在优化RAPD反应体系的基础上,对100条RAPD随机引物进行了筛选.结果表明,采用改良CTAB法能从胡卢巴叶片中提取到高质量的DNA,可以用于RAPD分析;从100条随机引物中筛选出了16条显示胡卢巴遗传差异的多态性引物,为胡卢巴遗传多样性研究提供分子依据.     

等电聚焦电泳分析苹果酸脱氢酶Ⅱ同工酶及基因型实验教学设计

改革目前生物化学实验中＂同工酶＂的实验方法,设计了等电聚焦电泳分析西方蜜蜂苹果酸脱氢酶Ⅱ同工酶及基因型的实验。等电聚焦电泳完全分离苹果酸脱氢酶Ⅱ同工酶的不同酶谱条带,电泳图谱清晰,并能同时分析同工酶型和基因型。该实验综合性强,实验结果清晰、直观。     

几种“奇异动物”毛发的血型物质及角蛋白等电聚焦谱分析

本文用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(PAGIEF)和解离试验法对“奇异动物”毛发的血型物质和角蛋白组分进行了分析结果表明,二份分别收集于贵州黎平县和四川巫溪县的“奇异动物”毛发具有与某些灵长类动物毛发类似的A和AB型血型物质.二者毛发角蛋白组分的PAGIEF谱型非常相近,但与黑猩猩,长臂猿,阿拉伯狒狒,狗熊,山羊和豚鼠的毛发有差异,与人头发也不一样.作者认为,二份“奇异动物”毛发属于同一种属的动物.它们可能属于与灵长类动物有一定亲缘关系,但又有差异的一类未知灵长类动物.有关这种“奇异动物”种属关系的确切认定,尚有待进一步研究.     

3种蛏基因组DNA的多态性研究

采用RAPD技术对缢蛏(Sinonovacula constricta)、尖刀蛏(Cultelles scalprum)和直线竹蛏(Solen linearis)基因组DNA的多态性进行初步研究.经28个随机引物扩增,共得到255条扩增片断,片断长度为150～2 000 bp.通过POP-GENEI.32种群遗传分析软件计算种群间的遗传相似系数和遗传距离,并采用UPGMA聚类分析方法进行处理得到系统树.在UPGMA聚类中,尖刀蛏先与缢蛏聚在一起,有较近的亲缘关系,其次是直线竹蛏.缢蛏、尖刀蛏和直线竹蛏两两之间的遗传距离分别为0.357 8、0.493 0、0.382 4,其遗传距离已达到科的水平,研究表明3种蛏不宜同归为竹蛏科,支持徐凤山(1997)将3种蛏分别归为灯塔蛤科、刀蛏科和竹蛏科的分类观点.     

大黄鱼基因组DNA的不同提取方法及RAPD扩增比较

采用三种方法提取大黄鱼肌肉基因组DNA,并以所提取的DNA为模板进行RAPD分析比较。结果表明,与传统方法、高盐抽提法相比,星普法具有快速简便、所需样品量少,所提取的DNA质量高等特点。三种方法所得的DNA分子量大小都在20kb以上,且RAPD扩增条带基本一致。