外源基因在转基因马铃薯植株中的异常表达

根癌农杆菌感染马铃薯叶盘伤口细胞并进行共培养转化，感染叶盘筛选培养基上可获得卡那霉象抗性的转化愈伤组织，并在转化细胞中检测到ＮＰＴⅡ酶活性，在两种分化培养基上转化愈伤组织的分化率分别为１７％和２０％，ＤＮＡ分子杂交证实以双向载体质粒ＰＰＺＨ１上的ｎｐｔⅡ基因和ｚｅｉｎ－ＨＥＡＡＥ融俣基因均已导入并整合到马铃薯再生植株基因组中，导入的外源基因引起了转基因气生块茎中氨基酸组分的变化，大多数氨基酸含量有     

表达雪花莲外源凝集素基因的油菜转基因植株的获得

利用农杆菌素LBA4404（pCAMBIA3300RG)转化优良甘蓝型油菜恢复系W723的下胚轴节段.pCAM-BIA3300RG含有Rssl启动子引导的雪花莲外源凝集素基因（gna）和CaMV-35S启动子引导的除草剂抗性基因（bar）。经过两轮除草剂（2.5mg/L bialaphos）筛选（两周/轮）,除草剂抗性再生芽被传入生根培养基中生根,对根系旺盛生长的植株中所含gna基因进行PCR分析,PCR分析证实了这些植株确为转基因植株,利用Western印迹法对随机选择的5株含gna基因的转基因植株的分析发现,其中4株表达了gna基因。目前正对这些表达gna基因的转基因植株进行后代遗传分离分析。     

转基因马铃薯植株中外源基因PCR扩增和拷贝数测定

本文报道一种简便、快速、可靠，同时又适合大量转基因植株中外源基因测定的ＰＣＲ检测技术，同时改进了转基因植物中总ＤＮＡ提取方法，并且用窄缝转移杂交测定了转基因植株中外源基因拷贝数。     

外源基因1Dx5在转基因小麦后代中的表达

采用PCR和SDS-PAGE技术,分析研究了转基因小麦后代外源品质基因1Dx5的遗传分离及表达规律,结果显示:转基因小麦后代的遗传分离完全符合孟得尔遗传分离规律,转基因植株都达到了纯合状态,1Dx5基因在转基因植株中已经稳定整合并稳定遗传,并发现了超表达的差异表达现象,在转基因植株中没有发现基因沉默现象.     

应用基因枪将外源基因导入小麦幼胚获可育的…

以小麦晋２１４８，７５０６，７６０６，５９２６四个春性品种的幼胚为材料，用ＪＱ７００型高速基因枪将ＢＰＩ１２１质粒导入小麦，研究并确立了轰击速度、钨粉直径、上方式、ＤＮＡ浓度等基因枪转化参数。在以上研究基础上进一步将导入外源基因的小麦幼胚质片细胞通过胚胎发生途径再生成植株。供试的４个品种中有３个（７５０６，７６０６，５９２６）获得了可育的转基因植株。ＧＵＳ基因的转化频率分别为０．６％，０．６％和１     

BYDVCP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性愈伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病基因的质粒Ｐ＾ｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒Ｐ＾ＢｌＡｅｔＳＮ导入融合细胞中。经抗性筛选获得抗潮霉素的阳性克隆并再生植株。对再生植株作ＰＣＲ检测表明，     

BYDV CP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性意伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病毒基因（ＢＹＤＶＣＹｇｅｎｅ）的质粒Ｐｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒严ＰＢｌＡｃｔＳＮ导入融合细胞中．经抗性筛选获得抗潮霉素（Ｈｍ）的阳性克隆并再生植株．对再生植株作ＰＣＲ检测表明，ＣＰ基因已整合到转化植株的基因组中并稳定表达．     

外源基因在转基因动物乳腺中的特异性表达研究

动物基因工程研究最大的突破就是转基因动物研究的进展,自八十年代初第一批转基因小鼠问世以来,转基因动物的研究已从方法学研究步入了应用性研究阶段,转基因动物除作为研究工具广泛应用于发育生物学、免疫学、遗传学以及医学等生命科学领域外,外源基因在转基因动物的特异性表达,尤其是在乳腺的表达,又可将转基因用作生物反应器进行了生物活性蛋白的生产而于商业生产,在转基因动物乳腺的特异性表达研究中,寻找乳蛋白基因调控     

外源基因在转基因油菜后代中的表达及遗传学分析

以转基因油菜后代（Ｒ１和Ｒ２代）株系为材料，系统地研究了苏云金杆菌杀虫蛋白基因ＣｒｙⅠＡ和选择标记基因ｎｐｔⅡ导入油菜后的遗传规律，表达强度和抗虫效应。结果表明：Ｒ１代卡那霉素抗性为３：１分离方式，在Ｒ２代卡那霉素抗性植株中，有三分之一为ｎｐｔⅡ基因纯合型（Ｔ：Ｔ）另三分二为复合型（Ｔ：Ｏ），其遗传方式符合孟德尔单因子显性遗传；转化植株可耐受１５０ｍｇ／Ｌ那卡霉素的选择压力，约一半的转化植株具有杀     

QTL analysis of flag leaf in barley （Hordeum vulgate L.） for morphological traits and chlorophyll content

To understand genetic patterns of the morphological and physiological traits in flag leaf of barley, a double haploid （DH） population derived from the parents Yerong and Franklin was used to determine quantitative trait loci （QTL） controlling length, width, length/width, and chlorophyll content of flag leaves. A total of 9 QTLs showing significantly additive effect were detected in 8 intervals on 5 chromosomes. The variation of individual QTL ranged from 1.9% to 20.2%. For chlorophyll content expressed as SPAD value, 4 QTLs were identified on chromosomes 2H, 3H and 6H; for leaf length and width, 2 QTLs located on chromosomes 5H and 7H, and 2 QTLs located on chromosome 5H were detected; and for length/width, I QTL was detected on chromosome 7H. The identification of these QTLs associated with the properties of flag leaf is useful for barley improvement in breeding programs.     

Chromosome microdissection by laser microbeam, chromosomal fragment isolation and amplificationin vitro in barley (Hordeum vulgare L.)

A method for microdissection, isolation and amplification of plant chromosomal fragments using laser microbeam and a glass microneedle was established. Firstly, 7H chromosome of barley (Hordeum vulgare L.) was dissected by Nd: YAG laserbeam with suitable parameters and the fragment comprising a satellite was isolated with a glass microneedle which was fixed on a micromanipulator. Then, the chromosomal fragment DNA was amplified by LA_PCR (linker adaptor PCR) for two rounds. The size of the DNA fragments of PCR products varied from 500-3 000 bp and the PCR products originated from the genome of barley were verified by Southern hybridization. Compared with previous reports, there are some advantages in this research. The performance is easier, the dissection is more precise and the cost is low. It also permits efficient amplification with only one single chromosome fragment. Laser microbeam_glass microneedle method may be useful in the microdissection of special chromosome regions, especially in plants with middle or small chromosomes.     

大麦籽粒总黄酮超声辅助提取工艺的优化

为探究提取大麦籽粒总黄酮的最佳工艺条件,以脱脂大麦粉为原料,采用响应面分析法对超声辅助提取大麦籽粒总黄酮工艺中的乙醇浓度、液固比、超声时间、提取温度四个主要因素进行了优化.结果表明,乙醇浓度和超声时间是影响大麦籽粒总黄酮提取率的主要因素,该提取工艺的最佳条件为:乙醇浓度95%,液固比55mL/g,超声时间22min和提取温度50℃,在此条件下大麦籽粒总黄酮提取率的理论值可达0.80mg/g.     

Rapid plant regeneration from cotton (Gossypium hirsutum L.)

A simple and rapid regeneration method of cotton (Gossypium hirsutum L. cv. Xinluzao 4) is described. The proper use of phytohormone KT and IBA validly promoted the survival rate of test-tube plants and shortened the period of culture in combination with the techniques of micro-propagation and graft.     

花生愈伤组织的诱导及植株再生

研究花生愈伤组织的诱导及植株再生的条件．用汕油71花生幼苗上胚轴、下胚轴、子叶、幼叶等不同外植体类型进行比较,发现幼叶较易诱导愈伤;用不同激素质量浓度配比研究对花生幼叶愈伤诱导的影响,发现IAA（吲哚乙酸）对花生的愈伤诱导效果较2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）和NAA（萘乙酸）好;用不同叶龄及叶切段比较,发现以10d苗龄的叶片中部切段愈伤诱导率较高取苗龄10d的花生无菌苗的幼叶中段为外植体,置于ρ（MS＋IAA）3mg／L＋ρ（BA）1mg／L培养基中培养,30d后诱导率达到100％且愈伤呈淡绿色、半透明、疏松状．50d后转至ρ（MS＋IAA）0．5mg/L＋ρ（BA）2mg／L＋ρ（TDZ）0．5mg／L分化培养基中诱导芽（TDZ,噻重氮苯基脲）,截取诱导芽单芽,转接至根诱导培养基中。获得再生植株     

小麦叶基切段愈伤组织的诱导和植株再生

从3～5d龄小麦籽苗幼叶基部切段诱导出大量愈伤组织。诱导可再生的愈伤组织的培养基为MS 1．5mg／L 2，4-D 0．2mg／L，激动素(KT) 500mg／L，水解酪蛋白(CH) 120mg／L，天冬酰胺 100mg／L，肌醇 3％蔗糖 0．7％琼脂粉。当愈伤组织转移到生长调节物质改变为2mg／L KT，1mg／L NAA和0．1mg／L 2，4-D的MS培养基上培养后，出现了苗的分化。当分化苗在无机盐分减半的MS培养基上培养后，产生了根。愈伤组织的形成和植株再生的频率与外植体的位置和籽苗的发育阶段密切相关，3～4d龄苗叶基1cm处的切段效果最好。叶基愈伤组织的分化能力可保持3～4个月。     

玉米自交系幼胚离体培养及植株再生研究

采用4种不同类型的玉米自交系为供试材料，用MS和AG培养基进行诱导培养。获得胚性愈伤组织，结果表明，基因型和外植体的发育时期对愈伤组织的诱导率有很大影响；不同的2，4-D浓度及山梨醇浓度影响愈伤组织的保持和质量改善；6-BA浓度为2mg／L时，有利于再分化培养，在再分化培养中，获得了再生植株。     

甘薯毛状根植株再生研究

用发根农杆菌Ｒ１０００菌株感梁甘薯（渝薯３４品种）,获得转化毛状根,从毛状根中选择出了５个无性系,当毛状根培养在含有２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１ｍｏｌ／Ｌ玉米素的ＭＳ培养基上诱导出了愈伤组织,当愈伤组织培养在含有１ｍｇ／ＬＫＴ＋１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ的培养基上,３周以后获得了再生植株,用随机及增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分子标记检测出了再生植株的多态笥。