玉米茎尖培养研究(Ⅱ)--体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以玉米茎尖分生组织为外植体，在离体培养条件下诱导体细胞胚胎(胚状体)发生。组织细胞学观察表明，玉米茎尖分生组织在离体培养条件下可直接产生胚性愈伤组织，后者在继代培养中发生胚状体。多数胚状体起源于愈伤组织的表层细胞和表层之下的几层细胞，少数产生于愈伤组织的较深层。胚状体发生于单细胞，发育过程与合子胚大致相似。多数胚状体发育正常，具有一个芽端和一个胚根端。少数胚状体形成具多个芽端而共用一个胚根端的次生连体胚。胚状体发生不同步。胚状体只有在分化培养基上才能发育成熟。     

葡萄离体培养中胚状体发生的研究：Ⅰ.胚状体发生的组…

以葡萄的花药和花丝为实验材料，观察了葡萄离体培养中胚状体的发生发育过程。结果表明：１．葡萄的花药和花丝经诱导都可形成胚性和非胚性两类不同的愈伤组织，与外植体来源无关，胚状体经胚性愈伤组织产生。２．胚状体多起源于胚性愈伤组织表层或表层以下的单个细胞。这些细胞核大，细胞质浓，染色深，在表层者易于脱落而处于单个离散状态，它们的第一次分裂有均等分裂，也有不等分裂，经２细胞，３细胞，多细胞原胚等阶段发育为成     

葡萄离体培养中胚状体发生的研究Ⅰ.胚状体发生的组织细胞学观察

以葡萄（ＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａＬ．）的花药和花丝为实验材料，观察了葡萄离体培养中胚状体的发生发育过程．结果表明：（１）葡萄的花药和花丝经诱导都可形成胚性和非胚性两类不同的愈伤组织，与外植体来源无关，胚状体经胚性愈伤组织产生．（２）胚状体多起源于胚性愈伤组织表层或表层以下的单个细胞，这些细胞核大，细胞质浓，染色深，在表层者易于脱落而处于单个离散状态，它们的第一次分裂有均等分裂，也有不等分裂，经２细胞、３细胞、多细胞原胚等阶段发育为成熟的胚状体．（３）葡萄胚状体具有与双子叶植物合子胚相似的发育过程     

玉米胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

采用生产上推广的14个基因型的玉米为材料,由幼胚诱导出胚性愈伤组织并再生植株。其中原齐722×5003等单交种在适宜条件下,胚性愈伤组织的诱导率可达90%,愈伤组织分化苗频率高于80%。在加有1ppm 6BA 和0.1%活性碳的改良 N_b 培养基上,分化出的幼苗长成健壮的小植株。接种幼胚的大小和基因型、基本培养基成份及蔗糖浓度、激素种类和浓度等对胚性愈伤组织的诱导、继代和分化幼苗均有明显的影响。另外,将培养7-8天的幼胚抉碎,可显著提高胚性愈伤组织的诱导率,并能使较大的幼胚产生胚性愈伤组织。随着胚性愈伤组织继代次数的增多,再生植株中畸形苗频率也升高     

石刁柏花药培养中根、茎及胚状体的形态发生研究

利用扫描电镜及组织学方法观察了石刁柏(Asparagus of ficinalis)的花药愈伤组织及由该愈伤组织产生的根、茎和胚状体。愈伤组织可分为三种,其表面形态及将来的发育方向都有差异。胚状体有内、外两种起源方式,胚状体的发生是不同步的,其发育顺序及结构与合子胚大体相似,有少数胚状体形成了植株。茎端最早是在愈伤组织表层产生,茎端具典型的原套原体结构,原套细胞仅一层。培养产生的根、茎与自然生长的根、茎在形态结构上有显著的差异。     

簇毛麦（Haynaldia Villosa）的原生质体培养

簇毛麦的幼胚在含有９μｍｏｌ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＢ固体培养基上诱导产生愈伤组织，在相同的培养基上继代培养两个月后出现淡黄色的致密瘤状愈伤组织．在继代培养过程中，愈伤组织的分化能力丧失较快．继代培养一年左右，改变培养条件，可得到颗粒状及粉粒状愈伤组织．分别用这两种类型的愈伤组织建立悬浮培养细胞系．愈伤组织的形态结构与悬浮系的建立及原生质体培养密切相关．来源于颗粒悬浮系的细胞团块产生的原生质体分裂后可产生体细胞胚，而用粉粒悬浮系分离的原生质体不能持续分裂．     

虎耳草幼花轴培养中胚状体的诱导及其细胞组织学观察

本文报道从虎耳草幼花轴培养中诱导出胚状体并再生为完整植株所需的条件。对影响胚性愈伤组织生长和胚状体形成的几种因素作了初步探讨。并描述了胚状体发生过程中的细胞组织学观察结果,发现了一些与合子胚发育类似或不同之处.     

玉米茎尖培养研究(I) --胚状体和丛生芽发生的扫描电镜观察

扫描电镜观察结果显示,所用六个基因型的玉米茎尖分生组织在添加500mg/L水解溶蛋白和9.0～13.5μmol/L6～BA的改良MS培养基上培养四周,茎尖可产生由腋芽和不定芽组成的密集的丛生芽.在含有4.5μmol/L 6～BA和1.0～2.0μmoL/L 2.4-D的培养基上,茎尖分生组织产生"层状"伸展的愈伤组织.将愈伤组织转移到发育培养基上,愈伤组织表面可观察到大量的胚状体出现,胚状体继续发育成丛生芽.激素浓度和种类不同明显影响茎尖产生胚状体和丛生芽的数量,基因型不同的茎尖,其产生胚状体或丛生芽的能力也呈现出明显的差异.     

玉米幼胚的组织培养及其植株再生的研究

以成单１４,１５,１８三种基因型玉米为材料,对幼胚愈伤组织的诱导和继代培养,植株再生,再生苗的培养和移栽等方面进行了系统的研究,三种基因型玉米幼胚经诱导均可产生愈伤组织,但只有成单１５,１８两种基因型玉米幼胚产生的愈伤组织可继代培养下去。     

蛇床胚状体发生的扫描电镜观察

本文应用扫描电子显微镜对蛇床幼茎愈伤组织进行了观察、发现非胚性愈伤组织由多种形状的细胞无序堆积而成;在胚性愈伤组织中,出现了由近球形的厚壁细胞组成的细胞团,细胞的表面具腺毛结构,腺毛由球形的头部和短的柄部组成。     

小麦体细胞胚胎发生过程的研究

以小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）幼胚愈伤组织为材料，研究了小麦的体细胞胚胎发生过程．切片观察表明：小麦的胚状体发生有两种方式，表面发生和内部发生．胚状体来源于愈伤组织中的单个原始胚性细胞．胚状体的发育经历了单个胚性细胞、胚性细胞团、球形胚、心形胚、成熟胚阶段．木实验支持胚状体单细胞起源的学说．     

器官分化与PAL活性及花色素苷累积的关系

通过适当的激素调控,胡萝卜、蒲公英愈伤组织可分化出芽、根和胚状体,其芽的分化与花色素苷累积存在密切关系、胡萝卜愈伤组织在器官分化过程中,PAL分别在第3、20天有一峰值,第二峰值与器官分化有一定关系。     

石防风胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的发生

石防风幼苗的根在含0.1-50mg/L 2,4-D的 MS 培养基中能诱导产生愈伤组织,最适浓度为0.5mg/L.愈伤组织来源于中柱内部的细胞。在0.5mg/L2,4-D 存在下,细胞分裂生长并发育至胚性细胞团或原胚,转移至无激素培养基后,愈伤组织表面及内部分化出发育阶段不同的体细胞胚,最后发育成为完整植株。在初生幼苗的胚轴上(有时在根或叶)常有次级胚的发生,它们能继续长成次级苗,并在苗上再次长胚,如此不断,直至多次。由此可见石防风体细胞胚发生的能力,是十分强大的。     

番木瓜胚珠高频率体胚发生和植株再生

将番木瓜(Carica papaya L.)受精胚珠接种于MS IAA1mg/L BA2mg/L GA_3 2mg/L S(蔗糖)3％和1/2MS 谷胺酰胺400Mg/L CW(椰子汁)20％ S6％的培养基中,诱导愈伤组织,愈伤组织继代培养于MS CW 2％ S6％ 2.4-D 2mg/L的培养基上。进行了几种激素配比和基本培养基(MS和改良MS)对诱导胚性愈伤组织、体胚发生和植物再生培养基的比较实验。结果表明:在改良MS 硫酸腺嘌呤160mg/L NAA 1mg/L BA 0.5mg/L GA_3 1mg/L S4％培养基中获得理想胚性愈伤组织和体胚,在改良MS 硫酸腺嘌呤160mg/L NAA 1mg/L KT 0.5mg/L GA_3 1mg/L S4％产生正常具三裂片和根系的小植株。进行番木瓜体胚包埋、制成人工种子,实验获得小苗,并移栽成功。     

外源多胺对宁夏枸杞离体形态发生过程中可溶性蛋白组分和过氧化物酶同工酶酶谱的影响

利用已建立的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)器官发生和体细胞胚发生体系,对多胺在高等植物离体形态发生中的作用以及部分生化特征进行了研究。将不同多胺预处理过的愈伤组织诱导器官发生的实验中,Spd能显著提高不定芽的再生频率,而CHA的预处理对不定芽形成产生的阻碍最为严重。在体细胞胚发生体系中,Spd,Put的处理能促进体细胞胚成苗,而MGBG,CHA的处理明显降低了成苗率。不同的多胺及其生物合成抑制剂均能影响两种再生体系的可溶性蛋白组分和过氧化物酶(POD)同工酶谱的表达;但对器官发生和体细胞胚发生途径特异多肋(46．3,36．2kD)的合成没有明显影响;而对存在于器官发生全过程、仅出现于体细胞胚发生后期阶段的44kD多肽,MGBG在两种途径中都能阻碍它的表达,Put仅在体细胞胚发生中有抑制作用。这些结果显示多胺可能在高等植物离体形态发生中起“第二信使”作用。     

前胡组织培养和细胞悬浮培养中胚状体发生及植株再生

前胡的种子幼苗切段在含有1mg/l2,4-D的(1/2)MS 固体培养基(大量元素减半)上,诱导产生愈伤组织。诱导两个半月的愈伤组织,在含有1mg/l6-BA+0.5mg/lIBA 或无激素的(1/2)MS 固体培养基上,分化出胚状体,再生成完整植株。愈伤组织在液体培养基中振荡分散及过滤制备成悬浮培养物,在含1mg/l2,4-D的液体培养基中,胚性细胞不断增殖。转移至含有0.05mg/l 2,4-D+0.05mg/l 6-BA 的(1/2)MS 液体培养基中,分化出胚状体,发育成完整植株。     

裸燕麦不同发育时期的茎尖外植体中内源激素与体细胞胚胎发生的关系

裸燕麦的茎尖开始拉长,小穗原基开始分化和小穗形成三个不同的分化阶段的外植体在诱导体细胞胚胎发生时,随小穗原基的分化和形成过程,要求外源2.4-D浓度越来越高内源生长素(1AA)和细胞分裂素(CTK)分析结果表明三个不同分化阶段的1AA/CTK比值分别为1.36:1,l:1.02和1:2.08,而脱分化的愈伤组织和胚性愈伤组织中二者比值分别为1.81:1和5.10:1。我们推测,体细胞胚胎发生过程中内源生长素的高比值是要求大量提高外源2.4-D浓度的原因。