南欧紫荆（Cercis Siliquastrum L）种子中甘露聚糖酶的分离、纯化及其动力学性质

南欧紫荆萌发种子的提取液，经硫酸铵分级沉淀，ＤＥＡＥ－纤维素柱层析，Ｂｉｏ－ＧｅｌＰ－６０和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析，得到了酶活为９８．６μ／ｍｇ的甘露聚糖酶。柱层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳均表明其为均一性物质。南欧紫荆甘露聚糖酶由两个分子量为２万的相同亚基组成，可将以甘露聚糖为主链的多种半纤维素水解为含４～６个单糖残基的寡糖片断。它的最适ｐＨ为５，最适温度为３７℃。Ｚｎ￣２＋对该酶活性有强烈的激活作用，Ｃｕ￣２＋和Ｍｎ￣２＋则为这种甘露聚糖酶的竞争性抑制剂。动力学性质研究表明酶的活性明显地依赖于底物浓度，且只有一个活性中心。南欧紫荆甘露聚糖酶的作用方式为专一性地内切水解以β－（１→４）键连接的甘露聚糖。     

椰果内生枯草芽孢杆菌YZ-21产β-甘露聚糖酶的纯化及酶学性质研究

[目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH_4)_2SO_4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,最优方法为双水相萃取法,在双水相体系为16%(NH_4)_2SO_4、18%PEG2000、2%NaCl条件下,纯化倍数最高可以达到3.06,酶回收率达到99.26%;酶学性质研究表明,β-甘露聚糖酶的最适反应pH为7.0,最适的反应温度是40℃,pH稳定性在3.0～7.0,热稳定范围在35～55℃之间;Ca~(2+),Ba~(2+),Mg~(2+),K~+,Co~(2+)对酶都有激活作用,而Ca~(2+)激活作用最强,Cu~(2+),Na~+,Zn~(2+),Mn~(2+),EDTA对酶有抑制作用.[结论]利用双水相萃取法较好纯化了β-甘露聚糖酶,酶学性质良好,可以广泛应用于饲料添加剂、纸浆漂白和食品加工等领域.     

豆豉中β-甘露聚糖酶高产菌的分离、鉴定及其酶学性质

通过对传统曲霉型豆豉菌群分离纯化,结合刚果红显色及DNS筛选法,共得到高产β-甘露聚糖酶且形态学差异较大的细菌4株、真菌1株,其中真菌的酶活力为2 016 U·mL^-1.经过序列鉴定与比对,细菌鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)不同种,真菌为黑曲霉(Aspergillus niger).酶学性质研究表明:黑曲霉的最适温度和pH值分别为60℃和5.0;4株芽孢杆菌最适作用温度和pH值范围为40～55℃和6.0～7.0,其中1株芽孢杆菌在65℃时保温240 min或在pH值为9.0时保留30 min,残留相对酶活仍可达61.4%或84.3%.     

意大利蜜蜂毒Melittin组分的研究（Ⅰ）：分离纯化及理化…

用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０、Ｃｅｌｌｕｏｓｅ ＣＭ３２三步层析从意大利蜜蜂毒中分离纯化得到对家兔血小板具有强诱导聚集作用的Ｍｅｌｉｔｔｉｎ活性组分，它在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈一均匀蛋白带，分子量为３０００，凡２６个氨基酸残基组成。     

半乳甘露聚糖种子胶的研究进展

从半乳甘露聚糖种子胶的资源及分布、生物学功能，半乳甘露聚糖的合成代谢、积聚与转化，半乳甘露聚糖的精细结构及与性质的关系、胶的开发利用等方面对种子胶的研究进展进行了综述，为半乳甘露聚糖种子胶的进一步研究和开发利用提供了参考．     

内生枯草芽孢杆菌HD-1β-甘露聚糖酶基因的克隆及结构生物学分析

采用PCR技术从一株内生枯草芽孢杆菌HD-1基因组DNA中扩增出β-甘露聚糖酶基因核苷酸编码序列.序列分析表明,该基因全长1 089bp,编码362个氨基酸和一个终止密码子,N端前27个氨基酸为其信号肽.该酶氨基酸序列与相同来源的β-甘露糖苷酶同源性最高达98.34%,具有ManB保守结构域,属于糖苷水解酶家族26的一员.通过对该酶分子三维结构的预测分析,该酶的催化域形成TIM桶状结构,Cys92和Cys112形成二硫键,它们之间的部分构成该酶的氧化还原反应的活性中心,Glu100和Glu292分别为该酶的酸碱催化位点和亲核催化位点.三维结构的分析为提高酶的催化活性的和功能方面的定向改造提供了依据.     

甘草残渣中多糖的分离纯化及性质分析

甘草残渣经水浸提、去色素、除蛋白、透析、DEAE-Cellulose(DE-32)和SephadexG-75凝胶柱层析得到纯的水溶性物质(GPS),DNS法检测和IR分析证实,GPS为多糖类物质,比旋度[α]15D 125°(c0.1,H2O),经纸层析(PC)、元素分析、IR测定、13CNMR分析,确定其基本结构为α-(1,4)键连接的单一葡聚糖.     

蛋白质在分离纯化中保持稳定的方法及应用

从正常生物基质中提取各种蛋白质需要有特定的条件 ,如果不能满足这些条件 ,蛋白质将很快的失去其生物学活性。本论文从两个方面讨论了在分离纯化中保持蛋白质的稳定的方法 :即通过添加稳定剂 (例如 :共溶剂 ,金属离子 ,蛋白酶抑制剂等 )及操作条件的优化 (例如 :低温、适宜 p H等 )。经实验证明均可获得满意的结果。     

短裙竹荪（Dictyophora duplicata）多糖的研究（Ⅰ）──Dd多糖的分离、纯化及其部分理化性质

竹荪子实体经热水提取，乙醇沉淀，蛋白酶法和Ｓｅｖａｇ法相结合去蛋白，再通过ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析纯化，得到竹荪多糖（简称Ｄｄ）纯品。经凝胶过滤法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定表明，Ｄｄ多糖为均一的物质。Ｄｄ经紫外扫描，无核酸和蛋白质的特征吸收峰，ＩＲ－４００扫描表明有典型多糖吸收峰，Ｄｄ的相对分子质量约为１９６０００。     

海带中脱落酸的分离纯化及高效液相色谱分析

探索了海带（Laminaria japonica）脱落酸的分离纯化条件,获得最适分离纯化方法为：常温组织匀浆,80%甲醇溶液浸提,乙酸乙酯萃取,硅胶脱色和纯化.在此基础上,利用反向高效液相色谱的方法对样品进行定性定量分析,结果表明样品中含有脱落酸,含量为30.5-60.5μg/kg.这为海藻脱落酸的分离纯化及其活性研究奠定了基础.     

珍稀食药用真菌猴头菇寡聚糖的分离纯化及抗氧化活性的研究

从猴头菇（Hericium erinaceus）子实体中,经过除杂、粉碎、热水浸提、醇沉处理后,得到了猴头菇杂聚糖粗提物,并运用 DEAEcellulose column 进行柱层析分离纯化,得到猴头菇寡聚糖（HEO-A）. 通过水解,单糖分析,扫描电镜技术（SEM）,高效凝胶渗透色谱（HPGPC）,红外光谱技术（IR）和核磁共振技术（NMR）对猴头菇寡聚糖进行了初步的结构分析. 结果显示,猴头菇寡聚糖由木糖和葡萄糖两种单糖构成,均重分子量为1877 D. 在体外化学模拟条件下,研究了不同浓度的猴头     

坛紫莱多糖的分离纯化和结构分析（Ⅱ）

对广东产坛紫菜沸水提取多糖采用Sevag法脱蛋白,冻干后得粗多糖,得率为8%。在粗多糖溶中加入CTAB以沉淀除去酸性多糖PP1,超滤以纯化中性多糖PP2,PP2经DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶G200进一步纯化。经纸层析、凝胶过滤及紫外光谱分析鉴定为纯品。通过红外光谱、气相色谱对PP2进行组成分析,再用化学方法测定其总糖,3,6-内醚-L-半乳糖及硫酸基的含量,分别为86.33%、5.425%和12.2%。最后通过高碘酸氧化,Smith降解等方法测定PP2的化学结构,结果表明,PP2由半乳糖、3,6-内醚-L-半乳糖、甘露糖、葡萄糖、木糖和阿拉伯糖组成,具有α,β型糖苷键,连接方式有（1→3）、（1→4）、（1→2）3种。PP1分子量通过凝胶过滤法初步测得为16.2万左右。     

霉变干枣中菌种的分离纯化及初步鉴定

红枣在干制和储藏过程中易于霉变,为了研究引起霉变的原因及为长期储藏和安全食用提供依据,本试验用4种不同培养基,采用涂布平板法,对霉变干枣提取悬液中的微生物进行了分离培养.在霉变干枣悬液中未发现放线菌和酵母,而有明显的细菌和霉菌菌落.对分离的细菌和霉菌进一步纯化培养,得到2株细菌和3株霉菌,通过形态特征及镜检分析,初步鉴定细菌为葡萄球菌属(Staphylococcus)和微球菌属(Micrococcus Cohn),霉菌为青霉菌(Penicill ium)、白曲霉(Asp.candidus Link)和米曲霉(Asp.oryzae),并发现青霉菌和白曲霉最适生长温度为28℃～32℃,而米曲霉为28℃～37℃.     

桃耳七中鬼臼毒素的分离与纯化

来自太白山的小檗科植物桃耳七(Sinopodophyllum emodi Wall.)中含有一种抗肿瘤的木脂素--鬼臼毒素.为了通过简便的方法从桃耳七中制得纯度较高的鬼臼毒素,对分离纯化鬼臼毒素的方法进行了研究.发现鬼臼毒素在苯中析出时能生成一种苯加合物,根据这一特性,在不使用柱层析法的情况下,只通过普通的化学分离法制得了质量分数大于95%的鬼臼毒素,总产率为1.7%.     

活性污泥中细菌的分离、纯化与培养

建立精品实验项目＂细菌纯种分离和培养＂,以污水处理厂的活性污泥为实验样品,利用浇注平板法、平板划线法对活性污泥中的细菌进行分离、纯化并得到纯菌菌种。通过精品实验项目的研究与探索,丰富了实验教学内容,激发了学生的学习兴趣,巩固了学生的基本实验技能,加深了学生对微生物基础理论知识的理解,促进了学生创新能力的培养和提高。     

凝集素的分离纯化、基因克隆及功能研究进展

凝集素(lectin)研究近年来发展迅速，尤其在植物基因工程中，植物外源凝集素基因越来越受到重视。本文从凝集素的分离纯化、基因克隆、理化性质和功能等方面进行了综述。此外还讨论了凝集素基因在植物基因工程中的应用。     

蛹虫草多糖分离纯化及性质的研究

以蛹虫草菌丝体粗多糖为材料进行分离纯化及性质的研究.提取液浓缩用3倍体积乙醇沉淀,等电点Sevag法除蛋白,10%H2O2脱色,得到的粗多糖经DEAE-DE52纤维素柱层析,用0～0.2mol/L的NaCl洗脱,可以得到未完全分离的多糖.将此多糖经Sephadex-G200柱层析,用蒸馏水洗脱.将多糖用Sepharose CL-6B柱层析进行纯度鉴定,经验证是单一多糖.对多糖进行纸层析,证明组分是D-葡萄糖和D-半乳糖.用高效液相色谱法测定多糖分子质量为3.76×104ku.以昆明种小鼠对多糖进行生物活性研究,多糖对小鼠S180肉瘤抑制率达到71.92%.     

新生牛肝脏中肝细胞生长因子（cHGF）的分离纯化及性质研究

从新生牛肝脏分离纯化到一种具有刺激肝源性ＳＭＭＣ—７７２１人肝癌细胞和原代培养的人胎肝细胞ＤＮＡ合成的单一组分，命名为小牛肝细胞生长因子（ｃａｌｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｃＨＧＦ），测得分子量为３９．８ｋｄ，蒽酮法测得糖含量极少，部分纯化的ｃＨＧＦ在与胰岛素和表皮生长因子混合使用时活性有一定增加，对ＣＣｌ４处理的肝坏死大鼠有明显的促肝再生功能。