大熊猫肌红蛋白的纯化及一级结构的研究

本文从大熊猫骨骼肌分离纯化了肌红蛋白,鉴定了纯度,测定了分子量及氨基酸组成。确定了该蛋白的N端及C端氨基酸。采用CNBr裂解的方法,用HPLC分离得到4个肽段,分别测定了大熊猫肌红蛋白1—52位,56—77位及132—153位氨基酸的排列顺序。大熊猫肌红蛋白共含153个氨基酸,本文已完成了96个氨基酸的序列测定。用此结果与食肉目有关动物已知肌红蛋白的氨基酸顺序进行比较,获得了有意义的结论。     

利用不同手性固定相对DL—氨基酸衍生物对映体手性分离

利用三种手性固定相对６种Ｎ－乙酰化ＤＬ－氨基酸酯进行了手性分离研究，结果表明，Ｎ－乙酰化ＤＬ－氨基酸酯的手性分离系数α随氨基酸手性中心基团Ｒ１和衍生化基团Ｒ２的增大而增大，同时ＣＳＰ具有手性识别的手性中心基团空间位阻的增大也有利于改善手性分离效果，对映体的馏出顺序取决于ＣＳＰ具有手性识别的手性中心的构型，本文还为已提出的Ｎ－乙酰化ＤＬ－氨基酸酯在该类手性固定相上的手性分离机理进行了补充。     

天蚕素A- 蜂毒素杂合肽基因的克隆*

杂合肽天蚕素（１－７）蜂毒素（５－１２）是一个只有１５个氨基酸残基的短肽，是具有疏水性Ｃ－端和亲水性Ｎ－端的双性分子．它的分子大小只相当于天蚕素Ａ的４０％，而抗菌活性相当于完整天蚕素，或更高．本文根据其氨基酸顺序设计一个４５ｂｐ的杂合肽基因，通过接头克隆到载体ｐＶＴ１０２－Ｕ上，在酵母中表达，用比浊法初步测定表明表达产物具有抗Ｅ．ｃｏｌｉＤ３１活性．     

利用不同手性固定相对DL-氨基酸衍生物对映体手性分离

利用三种手性固定相对６种Ｎ－乙酰化ＤＬ－氨基酸酯进行了手性分离研究,结果表明：Ｎ－乙酰化ＤＬ－氨基酸酯的手性分离系数α随氨基酸手性中心基团Ｒ１和衍生化基团Ｒ２的增大而增大,同时ＣＳＰ具有手性识别的手性中心基团空间位阻的增大也有利于改善手性分离效果,对映体的馏出顺序取决于ＣＳＰ具有手性识别的手性中心的构型,本文还为已提出的Ｎ－乙酰化ＤＬ－氨基酸酯在该类手性固定相上的手性分离机理进行了补充．     

牦牛肌红蛋白的cDNA序列测定及其氧化特性的研究

通过对牦牛肌红蛋白的含量和cDNA序列的测定及心肌肌红蛋白氧化和脂类氧化相关性的研究，初步探讨了牦牛适应高原低氧环境的机理. 牦牛与黄牛的肌红蛋白cDNA序列比较，二者只有2个碱基的差异（89位氨基酸由cac变为cat，91位氨基酸由gcc变为gct），但由于氨基酸密码子简并性，两者的氨基酸序列没有差异.牦牛的骨骼肌的肌红蛋白含量为488.3 nmol/g，与黄牛相比没有显著差异，但牦牛心肌的肌红蛋白含量为823.4 nmol/g，比黄牛高61.2％（P＜0.05）.在4 ℃贮存下，牦牛心肌中肌红蛋白的氧     

抑癌基因FHIT的克隆和序列分析

用ＰＣＲ方法，从人脑ｃＤＮＡ库中克隆ＦＨＩＴ基因，扩增得到５５３ｂｐ片段克隆于ｐＧＥＭ－Ｔ载体，测定了其ＤＮＡ序列。该序列包括ＦＨＩＴ ｃＤＮＡ编码区全部４４４ｂｐ，以及５‘端５２ｂｐ和３’端５７ｂｐ非编码区序列。编程区有二处位点发生突变，第９２位密码子中的Ｃ突变成Ｇ，是同义突变，不导致氨基酸改变；     

伪狂犬病毒糖蛋白H基因片段的克隆,序列测定和分析

对伪狂犬病毒湖北地方株（ＰＲＶ ＨＢ株）糖蛋白Ｈ基因片段进行了扩增、克隆、序列测定和分析，比较了该序列与ＰＲＶ Ｋａ株及ＮＩＡ－３株三之间的同源性。结果显示，克隆片段长１３９６ｂｐ，Ｇ＋Ｃ含量７５．６％包括糖蛋白Ｈ（ｇＨ）Ｎ端２８３个氨基酸编码区及上游调控序列和胸苷激酶端１３     

用DABS—CL试剂柱前衍生技术和反相HPLC法分离人血清中游离 …

本文报导了用ＤＡＢＳ－ＣＬ柱前衍生ＨＰＬＣ法，在室温条件下，直接分离人血清中十八种游离基酸。对可能影响血清中游离氨基酸分离的一些因素作了探讨。结果表明该衍生技术较为迅速，简单，衍生物具有较高的稳定性和灵敏度，整个衍生过程所需一小时内完成在２５℃左右，血清氨基酸可得到较为满意的分离。     

新型胆甾型液晶的合成及其侧链取代基对介晶性的影响

本文设计、合成了一种新型胆甾型液晶，３－溴－４－辛氧基苯甲酸胆甾醇酯，通过示差扫描量热法（ＤＣＳ）和偏光显微镜研究，该化合物在１３９－１５３℃呈近晶相，１５３－１８４℃呈胆甾相，并对取代基溴原子对介晶性的影响进行了讨论。     

人血小板生成因子（TPO）的cDNA克隆在小板生成效应

用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人胎肝总ＲＮＡ中扩增得到约１．１ｋｂ人ＴＰＯ ｃＤＮＡ编码顺序，并进行分子克隆，将其中一个克隆（ｐＴＰＯ４７）亚克隆到Ｍ１３载体，测定全部ＤＮＡ顺序。它的碱基顺序与已报道的顺序完全相同，有一个１０５９ｂｐ的开放阅读框架可编码３５３个氨基酸。ｐＴＰＯ４７亚克隆到哺乳动物表达载体ｐＣＥＰ４，在哺乳动物２９３细胞系瞬时表达后，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，结果显示有约１．４ｋｂ的转录产     

环（L—苯丙—L—脯）的合成

从Ｌ－苯丙氨酸和Ｌ－脯氨酸出发，分别保护两种氨基酸的Ｎ端和Ｃ端，将Ｎ端保护的Ｌ－苯丙氨酸与Ｃ保护的Ｌ－脯氨酸 经ＤＣＣ缩合，得直链二肽，再经Ｐｄ／Ｃ催化氢化，甲醉中回流，得环（Ｌ－本丙－Ｌ－脯），结构经ＨＲＥＩＭＳ、ＤＥＰＴ ＮＭＲ等汉谱证实。     

中华眼镜蛇毒神经生长因子的研究

采用ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ和ＳｅｐｈｏｓｉｌＣ８以及ＨＰＬＣ层析方法，自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子（ＮＧＦ），此ＮＧＦ经８ｄ鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经ＨＰＬＣ及聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组成，经ＳＤＳＰＡＧＥ及ＨＰＬＣ测定分子量分别为２４．１ＫＤ和２４．９ＫＤ，等电聚焦电泳测得ｐＩ为８．２，氨基酸组分分析表明ＮＧＦ含酸性氨基酸较少，通过１２５｜标记ＮＧＦ测定出ＮＧＦ在生物体内主要分布于肾、肺、及周围神经     

蚕豆萎蔫病毒中国分离物RNA2全序列及多聚蛋白切割位点

对蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2)分离物B935 RNA2全序列进行了测定,全长由3 601个核苷酸组成(不包括3'端Poly(A)).RNA2包含一个长的开读框,该开读框起始于231位,终止于3 428位,编码一个分子量为119 ku的多聚蛋白.对外壳蛋白亚基N端氨基酸序列测定表明外壳蛋白大亚基(LCP)和小亚基(SCP)是由119 ku多聚蛋白中谷酰胺与甘氨酸及谷酰胺与丙氨酸之间的切割产生的,LCP含有402个氨基酸,SCP含有197个氨基酸.与蚕豆病毒属(Fabavirus)病毒基因组核苷酸及编码的蛋白质氨基酸序列比较表明,B935与BBWV2分离物及广藿香轻花叶病毒具有很高的同源性,而与BBWV1分离物的同源性较低.B935与豇豆花叶病毒属(Comovirus)和线虫传多面体病毒属(Nepovirus)的基因组结构相似,但序列同源性很低.B935与豇豆病毒属病毒的LCP和SCP氨基酸具有共同的保守序列.用4株单克隆抗体进行TAS-ELISA测定表明B935与BBWV1分离物(NRS和PH3)抗原上有差异.     

竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒五种磷脂酶A2的分离纯化和氨基酸序列分析

用超细Sephadex G-75凝胶色谱和C4反相高效液相色谱从竹叶青（Trimeresurus stejnegeri）蛇毒中分离纯化5种磷脂酶A2，并分别命名为PLA2－I（SWISS－PROT，P82892）、Ⅱ（SWISS-PROT，P82893）、Ⅲ（SWISS－PROT，P82894）、Ⅳ（SWISS－PROT，P82895）、V（SWISS－PROT，P82896）。SDS－PAGE测定它们的分子量分别为14．0、15．8、15．0、14．0和14．0kDa。等电聚焦电泳测得PLA2－I、Ⅱ、Ⅲ呈碱性，等电点大于8．8；PLA2－Ⅳ和V呈酸性，等电点分别为5．2和4．7。PLA2－Ⅳ和V有水解卵磷脂活性。用自动Edman降解法测定了PLA2－V的全部氨基酸序列和PLA2－I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的N－端部分氨基酸序列。PLA2－V由122个氨基酸残基组成，有14个Cys，并与其它来源的PLA2的氨基酸序列进行了比较。     

意大利蜜蜂毒Melittin组分的研究（Ⅰ）：分离纯化及理化…

用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０、Ｃｅｌｌｕｏｓｅ ＣＭ３２三步层析从意大利蜜蜂毒中分离纯化得到对家兔血小板具有强诱导聚集作用的Ｍｅｌｉｔｔｉｎ活性组分，它在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈一均匀蛋白带，分子量为３０００，凡２６个氨基酸残基组成。     

氨基乙酸、DL－氨基丙酸在1mol·kg~（－1）Na_2CO_3水溶液中的粘

本文采用高精度光电计时粘度计及单茎毛细管密度瓶分别测定了在２８８．１５～３２８．１５Ｋ温度区间内，氨基乙酸和ＤＬ－氨基丙酸在１ｍｏｌ·ｋｇ￣（－１）Ｎａ＿２ＣＯ＿３水溶液中的粘度及密度数据；计算了两种氨基酸在该溶液中的粘度Ｂ系数及极限偏摩尔体积；拟合出了粘度Ｂ系数与温度的关系方程；讨论了氨基酸的引入对Ｎａ＿２ＣＯ＿３水溶液结构的影响规律；用流动过渡状态理论得到了两种氨基酸在１ｍｏｌ·ｋｇ￣（－１）Ｎａ＿２ＣＯ＿３，溶液中的流动活化参数．     

庆大霉素发酵液中C组分含量测定

本文用荧光薄层扫描法测定庆大霉素发酵液中Ｃ组分含量。用氯仿：甲醇：氨水＝４：５：５下相 为展开剂，在硅胶Ｇ－ＣＭＣ板上分离庆大霉素Ｃ１，Ｃ２及Ｃ１ａ，喷甘油作增荧光试剂，然后用薄层 扫描仪测定其荧光强度。本法具有快速、简便、灵敏度高（Ｃ１，Ｃ２及Ｃ１ａ的检出限量分别为 ０．３、 ０．７及０．２μｇ），线性范围宽及重现性好等优点。也可用于成品及半成品测定。     

谷氨酸乙酯-NCA与谷氨酸苄酯-NCA共聚反应和竞聚率的测定

以二氧六环为溶剂，三乙胺（ＴＥＡ）为催化剂，谷氨酸乙酯－Ｎ－羧基－２－氨基酸酐（ＥＬＧ－ＮＣＡ）与谷氨酸苄酯－Ｎ－羧基－２－氨基酸酐（ＢＬＧ－ＮＣＡ）基聚反应。用１ＨＮＭＲ谱测定了共聚物中两种单体单元的组成。利用Ｋｅｌｅｎ－Ｔüｄｓ作图法和最小二乘法计算了两种单体竞聚率。结果表明ＥＬＧ－ＮＣＡ的竞聚率ｒ１＝０．９２６，ＢＬＧ－ＮＣＡ竞聚率ｒ２＝１．１５７。     

重组人粒细胞集落刺激因子在Escherichia coli中的表达研究

根据人天然粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）基因序列设计出引物,通过ＲＴ－ＰＣＲ从人外周血单个核细胞ｍＲＮＡ获得Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ片段,将该片段与原核表达载体ｐＴ７构建成重组体,导入大肠杆菌后发现天然Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ表达量并不理想,这可能是由于天然ｈＧ－ＣＳＦ５’端Ｇ＋Ｃ的比例过高,使转录后的ｍＲＡ很容易形成二级结构而影响翻译起始,因此在大肠杆菌中很难获得高效表达,根据密码子简并性原则,在不改变编码氨基酸顺序的前提下,通过重新设计ＰＣＲ引物,将ｈＧ－ＣＳＦ的前３个氨基酸密码子中的几个ＧＣ碱基作了改动,获得了新的ｃＤＮＡ突变体,将其与ＰＴ７的重组导入大肠杆菌,获得了高效表达。     

环氧端基酚酞聚芳醚腈的合成及结构性能表征

由酚酞和２，６－二氯苯甲腈经亲核缩反应制得了含－ＯＫ端基的聚醚腈低聚物，在碱金属碳酸盐Ｋ２ＣＯ３／Ｈ２Ｏ催化下，将其与环氧氯丙烷反应得到了含环氧端基醚醚腈（Ｅ－ＰＣＥ）用ＦＴ－ＩＲ，＾１ＨＮＭＲ和ＤＳＣ等方法地Ｅ－ＰＣＥ树脂的结构性能进行了表征，测定了Ｅ－ＰＣＥ树脂的环氧值，溶解性，分子量及分子量分布，讨论了单体的摩尔比，反应温度，催化剂含量及水含量对产物的影响。