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相似文献
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1.
人胚肝细胞分离培养研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨体外优化培养人胚肝细胞的方法:方法采用胰蛋白酶和聚乙烯吡咯烷酮(pvp),胶原酶,胶原酶和pvp消化法分离人胚肝细胞,并比较3种方法对分离人胚肝细胞的效果。结果运用这三种方法均能成功地培养出原代肝细胞,并能够传代;但胶原酶和pvp消化法分离细胞效果最好,细胞贴壁生长能力强。三种消化方法其细胞存活率从高到低依次为胶原酶和pvp消化法、胶原酶消化法、胰蛋白酶和pvp消化法。结论人胚肝细胞的分离首选胶原酶和pvp消化法,使用该法在体外培养的人胚肝细胞生长良好,可用于肝细胞移植和生物人工肝等方面的研究。  相似文献   

2.
应用0.25%与0.125%的胰酶分离绵羊毛囊细胞,获得2种不同形态的毛囊细胞;其次,对比分析了热消化法与冷消化法对分离毛囊细胞的影响,结果表明:热消化法优于冷消化法;同时,观察到新疆细毛羊与阿勒泰羊的毛囊细胞形态基本一致。  相似文献   

3.
本文用恒河猴胚肾传代细胞(MEK)、人胚肺成纤维二倍体细胞(KMB17和2BS)对HAV-H  相似文献   

4.
目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术.方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检.结果:VASP、IL1R2特异性表达在囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞中.结论:小鼠早期胚胎全胚原位杂交技术适用于早期胚胎基因时空表达型的检测.  相似文献   

5.
中型肝炎减毒活疫苗毒种(H2减毒株)的选育包括:用新生猴肾细胞(NMK)直接分离人粪便中的肝病毒(HAV);HAV在NMK细胞上的连续传代;低温传代;低温适应于人胚肺二倍体细胞(KMB17);减毒株特征研究;发现猕猴对HAV易感并建立用猕猴筛选减毒株;在KMB17细胞上制备合格的人用疫苗;疫苗安全性的考核、疫苗效果的考核等。  相似文献   

6.
本文以猪白细胞—鸭新城疫病毒Ⅱ系(NDVⅡ)为诱生系统探讨了猪白细胞干扰素(PLeIFN)诱生条件,并比较了四种方法纯化PLeIFN的效果。实验表明:(1)每毫升猪白细胞悬液加入40~80HA的NDVⅡ,产生PLeIFN效价>1500 u/ml;(2)猪白细胞经低浓度PLeIFN预处理可增强其产生PLeIFN能力,(3)PLeIFN预处理时间以3小时为宜;(4)猪白细胞干扰素在猪肾细胞上的抗病毒活性高于在鸡胚细胞上的活性;(5)四种方法中以硫氰酸钾—冷乙醇法纯化效果为好,该法去除杂蛋白能力高于其它方法;(6)用未酸化处理的PLeIFN粗制品可提高硫氰酸钾—冷乙醇法的纯化效果。  相似文献   

7.
运用石蜡切片法,透射电镜技术及组织化学方法,对栉孔扇贝的消化盲 囊进行了研究,结果表明,消化盲囊的腺上皮由消化(吸收)细胞和分泌细胞组成,消化(吸收)细胞顶端有微绒毛,细胞内有酸性磷酸酶,碱笥磷酸酶,脂酶和酯酶活性,还含有糖原和脂肪,是进行食物的细胞内消化和营养物质吸收的主要场所,并有储存能量的功能,分泌细胞内含粗面内质网,高尔基体和分泌颗粒,具有酸性磷酸酶和碱民生磷酸酶活性,并含有丰富的RNA和蛋白质,有分泌化酶的功能,消化盲囊导管上皮细顶端有纤毛和微绒毛,细胸内有酸性磷酸酶,碱性磷酸酶及脂酶活性,也能分泌消化酶,消化(吸收)细胞浅细胞质及及其释放到盲囊腔中的质团中含铁,各部位不含钙。  相似文献   

8.
酵母微量元素测定中样品消化方法的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
本文比较研究了酵母和奶粉样品的四种消化方法,在HNO3-H2SO4,HNO3-HClO4和HNO3-H2O2三种凯氏瓶法中,HNO3-H2O2法较好,而在HNO3-H2O2的凯氏瓶和微波炉PTFE高压密封罐消化法中,微波炉消化法的速度快、简便、准确度好。  相似文献   

9.
采用小型间歇消化装置,用正交试验法研究消化参数对石灰干式消化速度及消石灰结构性能的影响.实验结果表明,消化参数对消化结果的影响从大到小排序为:消化时间>水灰比>搅拌速度>消化水初始温度.优化后的工艺参数:消化时间为5~10 min;水灰比(摩尔比)为1.3~1.6;搅拌速度为250~300 r/min;消化水初始温度为25~45℃.优化工艺参数下制备的消石灰比表面和孔隙率最大可达25.69m2·g-1和75.09%.  相似文献   

10.
生物炭是提高厌氧消化性能的有效添加剂,由于生物炭性质的多样性和厌氧体系的复杂性,生物炭对厌氧消化的促进机理尚未得到全面认识。以生物质纯组分——纤维素、半纤维素和木质素为原料,分别采用水热法和热解法制备了生物炭,考察了生物炭对葡萄糖厌氧消化的影响,并从微生物分析、官能团组成和电导率等方面探究了其作用机理。结果表明:与对照组相比,生物炭的添加能加快葡萄糖厌氧消化速率,提高消化效率;相较于纤维素和半纤维素,以木质素为原料制备的生物炭的效果更好;以木质素为原料制备的水热炭和热解炭均能在一定程度上富集互养型发酵细菌,这可能有助于促进直接种间电子转移(DIET)机制的建立,从而提高产甲烷速率;生物炭丰富的表面含氧官能团和较大的电导率可能是其强化厌氧消化效果的关键特性;通过变异性分析发现,相较于制备方法,累积产甲烷量对生物炭原料的依赖性更大。  相似文献   

11.
由于干细胞具有自我更新和多向分化潜能的功能,使得人们用干细胞治疗多种疾病成为可能.就干细胞的研究概况、研究技术、干细胞技术的市场前景以及干细胞研究面临的问题等作一概述.  相似文献   

12.
间质干细胞来源、鉴定、可塑性和应用前景(综述)   总被引:1,自引:0,他引:1  
间质干细胞(MSCs)存在于骨髓、肌肉、骨、软骨等部位,可分化为中胚层的细胞,如成骨细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞等,亦可分化为内胚层、外胚层的细胞,如神经细胞、肝脏细胞、肾脏细胞等,同时由于来源广、易于分离扩增和基因转染,在临床、科研上有很大的潜在应用价值。  相似文献   

13.
通过重组幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)在不同温度下的批培养和脉冲培养,研究了温度对重组BHK细胞生长、代谢以及血管性血友病因子(vWF)蛋白表达的影响。相对于37℃,升高和降低温度的培养都降低了细胞的生长速率和密度,降温的作用更明显,主要表现为延长了细胞生长的迟滞期。在不同温度的脉冲培养中,细胞的比生长速率变化不大,表明进入对数生长期后,细胞生长对一定范围的温度变化不敏感。培养温度对细胞群体中处于S期的细胞比例影响不大,但在33℃和39℃下培养,细胞群体中处于G0/G1期的细胞比例有明显升高,处于G2/M期的细胞比例下降。当培养温度降低到33℃时,细胞群体中发生凋亡的细胞数随着温度升高而增加。温度的降低能显著提高单个细胞的vWF蛋白表达能力,在33℃下培养,vWF平均比生产速率提高了45%。  相似文献   

14.
简介了细胞工程的概念及基本操作,论述了其在若干重要领域研究取得的重大进展,并展望了其发展前景。  相似文献   

15.
本文通过MTT法和流式细胞术研究橙皮苷对人食管癌Eca9706细胞增殖的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响,结果显示:不同浓度橙皮苷能有效抑制Eca9706细胞增殖,且呈剂量依赖性(P<0.01),IC50为84μg/mL;22、43、84μg/mL的橙皮苷作用于Eca9706细胞48h,细胞周期在S期的比例分别为25.16%、30.13%、31.05%,比对照组明显升高(P<0.002);细胞凋亡率分别为6.23%、8.19%、10.62%,与对照组相比细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).以上结果说明,橙皮苷通过干预细胞周期和凋亡抑制食管癌Eca9706细胞增殖.  相似文献   

16.
为了研究泛素连接酶Nedd4对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,利用小RNA干扰技术,通过慢病毒包装,侵染前列腺癌细胞DU145,达到下调Nedd4表达的目的.MTT检测表明,下调Nedd4表达可以抑制DU145细胞的增殖;DAPI染色发现,下调Nedd4表达的DU145细胞对星形孢菌素诱导的细胞凋亡更加敏感.这些结果都说明,下调Nedd4的表达不仅可以抑制DU145肿瘤细胞增殖,而且可以促进细胞凋亡.  相似文献   

17.
胚肝基质细胞是研究胚肝造血调控的重要工具,本实验对小鼠胚肝基质细胞在体外培养过程中的生长、细胞类型组成及其组成比例的演变过程进行了观察.实验显示小鼠原代培养初期基质细胞是由平滑肌样上皮细胞、巨噬细胞以及成纤维样细胞、树突状细胞、内皮细胞构成的,经过多次传代后,巨噬细胞等类型的细胞逐渐丢失,平滑肌样上皮细胞和成纤维样细胞成为主体,表明体外培养的小鼠胚肝基质细胞在4代以内都能较真实的反映体内造血微环境的构成,适用于胚肝造血研究.此为进一步研究胚肝基质细胞在胚胎期造血过程中的作用奠定了工作基础.  相似文献   

18.
To investigate the potential of cardiomyogenic differentiation of rat hone marrow stromal cells (MSCs), they were exposed to 5-azacytidine treatments (single/repeat) at varying concentrations (3, 5, 10μmol/L) and the fates of the cells were analyzed by immunocytochemistry, Western blot and the reporter gene of enhanced cyan fluorescent protein (ECFP) under the control of ventricular myosin light chain 2 (MLC2v) promoter. MSCs were also cocultured with cardiomyocytes for periods up to 16 days, and the expression of cardiac myosin heavy chain(MHC) and troponin Ⅰ (Tn I) proteins was analyzed. After the induction with 5-azacytidine, neither spontaneously beating ceils nor myotubes were found; MHC and Tn I proteins were also undetectable and no ECFP-positive MSCs were detected. But when cocultured with cardiomyocytes, spontaneously contracting MSCs were observed and cardiac specific proteins could be detected. The results proved that the novel effects of 5-azacytldine on the cardiomyogenic differentiation of MSCs should be questioned and a direct intercellular communication with cardiomyocytes is necessary for MSCs to differentiate into cardiomyocytes.  相似文献   

19.
脉冲电磁场对小白鼠血细胞的影响   总被引:7,自引:2,他引:5  
研究了脉冲电场和脉冲磁场对小白鼠血细胞计数及血细胞带电的影响,实验发现:在一定的脉冲电磁场作用下,小白鼠的细胞会明显减少,红细胞电泳率也会下降,通过建立电磁场作用的介电等效模型,对其作用机理进行了探讨。  相似文献   

20.
目的建立缺氧损伤模型,观察缺氧损伤对神经干细胞分化的影响。方法用MTT,LDH等方法比较95%N2,5%CO2比率的缺氧气体分别培养1,2,4,6,8 h神经干细胞的变化。结果三天内的大鼠海马存在大量神经干细胞,可分化为神经元、胶质细胞等神经细胞类型,95%N2,5%CO2比率的缺氧气体培养6 h后神经干细胞OD值由缺氧前0.369±0.352降至0.270±0.229,LDH 漏出量由缺氧前10.374±0.390 unit/ml.min增加到14.710±1.337 unit/ml.min,差异显著。结论证实了新生大鼠海马内提取的细胞为神经干细胞,神经干细胞缺氧培养6 h可以建立神经干细胞缺氧损伤模型,但短时间缺氧培养对细胞分化类型无明显改变。  相似文献   

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