表没食子儿茶素没食子酸酯纯化研究

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有抗癌及抑菌等多种生理活性,是潜在航天功能食品功能因子成分。采用液相色谱的方法测定EGCG含量,应用ADS-7、ADS-8、ADS-17、ADS-21、D101、NKA-II、NKA-9型7种大孔吸附树脂对EGCG进行吸附和解吸纯化实验研究。ADS-7和NKA-II型2种大孔吸附树脂对EGCG有良好的吸附性能和解吸性能,解吸液分别为体积分数60%和70%的乙醇溶液,解吸液体积分别为6BV和5BV,解吸量分别为168.15mg和156.45mg,解吸率分别为88%和92%;应用NKA-II树脂得到的富集物中EGCG的质量分数由44.2%提高到67.9%,得率为90%。对于EGCG,不同型号大孔树脂的吸附和解吸性能存在差异,需要进行筛选和工艺优化;大孔树脂可以实现EGCG的分离纯化,在工业生产应用方面具有潜力。     

用商品茶多酚制备高纯度表没食子儿茶素没食子酸酯的工艺研究

选择聚酰胺为柱填料,以商品茶多酚为原料,考察了洗脱剂pH值、温度、溶剂的不同比例、流速和不同上样量对纯化分离EGCG影响．获得的工艺条件是：在玻璃层析柱（规格500mm×20mm）中装填聚酰胺（粒径150～75btm）树脂,上样量为42．9mg TP／g树脂,洗脱剂为甲醇和水混合液（v／v=4／1）,pH值3．5～4．5,温度为室温或25℃,流速为4．0mL／min．在此情况下洗脱得到EGCG的纯度可以达93％以上,回收率达86．83％以上．     

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与人血清白蛋白相互作用的研究

在不同温度下,用荧光猝灭光谱、紫外-可见吸收光谱及分子对接的方法研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.研究结果表明,EGCG可与HSA相互作用并使HSA发生内源性的静态荧光猝灭.利用Stern-Volmer方程处理实验数据,计算得到17和37℃下的静态猝灭常数(Kq)分别为7.153×105和7.886×105L.mol-1,结合常数(KA)分别为9.541×105和9.586×105L.mol-1,结合位点(n)为1.通过计算热力学参数,可知该EGCG与HSA的相互作用是一个吉普斯自由能降低的自发过程,且二者之间的主要作用力类型为疏水作用力.根据非辐射能量转移机制,算出HSA和EGCG间的作用距离和能量转移效率分别为3.02 nm和0.188.利用Autodock3程序进行HSA和EGCG对接计算,对接结果支持了光谱学的结论.     

绿茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯对肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)是绿茶多酚的主要成分,具有抗氧化、抗衰老、抗过敏和潜在的抗癌特性.本文运用MTT试验,DAPI染色和Annexin V-FITC分析了EGCG对肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导.结果表明,EGCG对Hep G2细胞具有明显的增殖抑制作用,存在剂量和时间依赖效应;EGCG能诱导Hep G2细胞凋亡,并具有剂量依赖效应.     

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的磷脂纳米囊泡构建及其抗龋齿研究

为了提高茶多酚中生物活性最强的多酚物质表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的稳定性,增强其抗龋齿作用,设计构建了一种含EGCG防龋齿磷脂纳米囊泡,利用纳米囊泡优良的载体性能和磷脂复合物解决EGCG稳定性问题,延长活性成分在牙齿表面吸附时间,增强EGCG的防龋齿疗效.采用紫外光谱扫描和差式扫描量热表征磷脂复合物中EGCG...     

表没食子儿茶素没食子酸酯对IL-4刺激的小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶-1表达的影响

为探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对白介素-4(IL-4)刺激的巨噬细胞精氨酸酶1(Arg-1)和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达的影响.将6~8周龄Balb/c小鼠经无血清DMEM培养基刺激后,收集腹腔巨噬细胞用于体外培养.体外培养的巨噬细胞经20ng/mL IL-4和不同浓度EGCG处理后,用实时荧光定量PCR(RTqPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测Arg-1和iNOS的mRNA表达水平和含量.结果显示IL-4和EGCG单独处理均可显著刺激Arg-1的表达和抑制iNOS的表达,而EGCG(12.5~50μM)增强IL-4刺激的Arg-1表达和IL-4对iNOS表达的抑制作用,且存在剂量依赖效应.上述结果提示EGCG以剂量依赖方式促进IL-4刺激的Arg-1表达、抑制iNOS的表达.     

表儿茶素没食子酸酯对人鼻咽癌C666-1细胞凋亡的影响

该文观察ECG在人鼻咽癌细胞株C666-1增殖与凋亡中的作用,并初步探讨其机制.人鼻咽癌C666-1细胞给予不同浓度ECG（0~100 mol/L）处理48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖水平,使用TUNEL法和流式细胞仪检测细胞凋亡率,利用Western blotting法检测Bax、Bcl-2、Caspase 3等凋亡相关蛋白的表达变化.结果表明,25 mol/L以上浓度的ECG可抑制C666-1细胞增殖,诱导细胞凋亡;并且ECG可浓度依赖性增加Bax/Bcl-2蛋白比值和剪切的Caspase 3蛋白水平.以上结果表明ECG可抑制人鼻咽癌细胞株C666-1增殖,并诱导细胞凋亡.ECG的作用与其增加Bax/Bcl-2相对蛋白比值进而激活caspase-3有关.     

植物黄酮在抗新冠病大流行中的作用:人们对绿茶黄酮的使用（英文）

2020年笔者报道了植物黃烷-3-醇没食子酸酯(flavan-3-olgallates,F3G)、二聚原花青素和富含这些化合物的绿茶在体外具有抑制新冠病毒(SARS-Co V2-)的主蛋白酶(mainprotease)活性.最近,笔者报道了F3G和其他黄酮化合物能抑制人类冠状病毒229E在细胞中繁殖.此外,许多研究也报道绿茶和植物黄酮对新冠病治疗的益处.自2020年12月以来,在美国和土耳其,笔者采用人口统计学和民族药学方法研究了新冠感染者利用绿茶帮助康复的情况.在美国,笔者统计了居家隔离的23名感染者用茶来康复的数据.其中5位感染者授权笔者分享他们用绿茶帮助康复的经验.在土耳其,笔者统计了100位不同年龄(20个月至96岁)和性别的新冠感染者恢复的详细资料,他们在没得到任何医疗帮助的情况下从新冠病中康复.在隔离期间,除了饮食,只饮用绿茶.根据他们每天的喝茶量和康复所用时间,完成了皮尔逊积矩相关系数的分析.结果表明,每天喝绿茶量和康复时间成负相关,喝绿茶越多,康复时间越短.同时,2020年笔者收集了208个国家人均喝茶量数据:土耳其人均喝茶量最多(3kg);很多拉美国家如墨西哥,人们不...     

表儿茶素没食子酸酯影响5-氟尿嘧啶与人血清白蛋白结合的热力学研究

目的:联合用药有利于增强抗癌药物的疗效,降低毒副作用.茶成分影响5-氟尿嘧啶(FU)与人血清白蛋白(HSA)结合的热力学值得研究.方法:本文利用等温滴定量热结合荧光光谱、动态光散射、圆二色光谱研究了不同温度和pH下FU与HSA的结合情况以及表儿茶素没食子酸酯(ECG)对二者结合情况的影响.结果:拟合数据后得到结合位点数n、结合常数Ka、焓变ΔH~0、熵变ΔS~0和吉布斯自由能变ΔG~0等热力学参数,结果表明FU与HSA之间的作用力为疏水、氢键和范德华力,ECG能够抑制FU与HSA的结合增加FU的游离浓度从而提高疗效.圆二色光谱数据表明HSA的二级结构发生轻微改变.结论:本研究能够为探明茶成分增强FU治疗癌症临床疗效的机制提供帮助,同时也为ECG和FU的联合用药提供指导.     

三维培养体系下EGCG对乳腺癌干细胞迁移性和自我更新的抑制效应

以乳腺癌细胞三维培养体系为基础,探究(-)-表没食子儿茶素-3-没食子酸酯((-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对乳腺癌干细胞(BCSCs)的药理学作用.细胞迁移性实验结果发现,20和80μmol/L EGCG能显著抑制迁移性基因的转录水平,降低通过Transwell穿膜细胞的数量,延缓癌细胞划痕修复时间,抑制癌细胞迁移性.在对BCSCs自我更新研究中,EGCG通过下调干细胞关键基因的转录而抑制癌细胞单克隆形成和克隆形成能力,抑制癌细胞自我更新,并有效降低CD24-亚群BCSCs含量.研究结果表明,在三维培养条件下,EGCG对BCSCs的迁移性和自我更新具备显著的抑制效应.     

活性氧双向生物学效应和机制

指出了活性氧（ROS）是普遍存在于有氧代谢中的产物,其化学性质极为活跃,有关ROS对人体的危害已逐渐得到公认.然而,越来越多的研究提示,一直被认为是人类疾病元凶的ROS对机体和细胞也有有益的一面.综述了ROS的研究进展,揭示了ROS通过调节离子通道、受体、酶以及转录因子的活性和改变细胞氧化还原状态,进而参与细胞的正常生理过程（细胞的增殖、分化和凋亡）,从而讨论了ROS的双向生物学效应和机制.     

ABA和GA刺激的ROS代谢调节水稻幼根伸长分析

本文探索水稻幼根生长过程中ABA和GA对ROS代谢的影响,结果显示:低于0.5μmol/L的ABA促进根伸长,超过此浓度的ABA抑制根伸长;H2O2与ABA相似,低浓度促进而高浓度抑制;在观察浓度范围内,GA促进根伸长.利用3,3'-二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)组织化学染色方法检测根尖部位H2O2代谢情况,结果显示,对照、ABA,GA和ABA+GA处理后,根尖分别呈现浅黄色、深棕色、黄色和深棕色,说明ABA比GA诱导较多H2O2产生.进一步研究发现,ABA和ABA+GA分别上调过氧化物酶(peroxidase,POD)活性13.4%和8.37%,GA下调POD活性19.0%;同时,ABA和ABA+GA处理分别下调过氧化氢酶(catalase,CAT)活性14.8%和16.3%,GA则上调CAT活性5.16%.以上结果表明,ABA可能通过上调POD和抑制CAT活性来提高ROS含量,而GA与之相反,严谨控制ROS浓度,促进水稻生长.     

气体冲击处理对草莓活性氧代谢影响的多变量解析

探讨了气体冲击处理对草莓活性氧代谢的影响。单因素方差分析显示,常温下臭氧显著抑制了草莓果实腐烂指数和呼吸强度的升高,而在低温下显著抑制了腐烂指数、丙二醛的上升,氮气则抑制了常温下果实腐烂指数和丙二醛的上升,加速了过氧化氢含量的下降。主成分分析结果也表明,臭氧处理有利于草莓的保鲜。偏最小二乘回归分析得出,腐烂指数与呼吸强度、花青素、脂氧合酶活性、超氧化物歧化酶活性呈正相关,与过氧化氢酶活性、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力呈负相关;过氧化氢与过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性呈正相关。通径分析显示,呼吸强度、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、抗坏血酸过氧化物酶活性为草莓腐烂指数的直接作用因子,总酚、还原力、多酶氧化酶活性均对其起负间接作用;谷胱甘肽、超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性为过氧化氢的直接作用因子,多酚氧化酶活性、抗坏血酸过氧化物酶活性、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子清除能力均为过氧化氢的间接作用因子。     

一种荧光分光光度法测定铜绿微囊藻胞内氧化物的方法

该论文利用荧光分光光度计的三维波长扫描和定量分析模式,探讨了一种简单、快捷地测定水华爆发的优势藻——铜绿微囊藻胞内氧化物的方法.论文比较了去离子水、超纯水和磷酸盐缓冲溶液作为细胞承载基质时的荧光发光情况,确定了超纯水为最适的藻细胞承载基质;确定了荧光剂的激发发射波长为Ex/Em=498 nm/522 nm;比较得出最适的荧光剂终浓度和黑暗孵育时间为100μmol/L和60 min.该方法无需复杂的前处理,可快速地测定胞内氧化物.     

自由基对人精子功能的调控

人类精液中存在着两种产生活性氧（ Ｒ Ｏ Ｓ）的来源——精子和白细胞．这些 Ｒ Ｏ Ｓ在不同水平对精子结构和功能具有不同效应．结合本室成果,综述了 Ｒ Ｏ Ｓ及其清除剂对人精子存活率、运动性和获能等功能的调控及可能的作用机理．提示 Ｒ Ｏ Ｓ在男性生殖生理及病理过程中可能具有重要的生理病理作用,并为 Ｒ Ｏ Ｓ清除剂用于治疗男性不育症及抗男性生育提供理论和临床依据     

芪参补气药茶清除线粒体活性氧研究

以黄芪和党参为原料,根据中医学原理组方制成芪参补气药茶(ACT),探索ACT清除线粒体活性氧作用及促进健康的机制。分别用AlCl₃比色法和硫酸苯酚法测定ACT的功能因子总黄酮、总糖及总多糖含量。以还原型辅酶Ⅰ/吩嗪硫酸甲酯(NADH/PMS)为超氧阴离子(O₂·^－)生成系统,过氧化氢(H₂O₂)/Fe²⁺体系为羟自由基(·OH)生成系统,分别用氮蓝四唑(NBT)还原法和Fenton反应显色法测定ACT清除O₂·^－及·OH的能力;用Na₂S₂O₃滴定法测定ACT清除H₂O₂的能力。ACT总糖质量分数为(26±1.3) mg·mL^-1,总多糖质量分数为(12.5±0.8) mg·mL^-1,总黄酮质量分数为(121±8.5) μg·mL^-1。ACT可一定程度上清除O₂·^－、·OH和H₂O₂。ACT具有温和的抗氧化作用,从而维持机体氧化与抗氧化平衡,这是ACT促进健康的潜在机制。