用TRIzol试剂一步法提取甜菜花蕾中的总RNA

在花期分别对无融合生殖甜菜M14品系和进行正常有性生殖的二倍体甜菜A2Y品系的花蕾进行取样,采用TRIzol试剂一步法,分别提取了它们的总RNA,并测定了总RNA的浓度及纯度。讨论去除RNA酶的方法、具体操作的注意事项和TRIzol试剂一步法与其它方法相比的优越性。该方法为进一步进行mRNA差异显示分析和抑制消减杂交研究提供了总RNA的来源,也为今后能在甜菜中寻找和克隆与无融合生殖相关的基因提供了可靠的保证。     

大豆胚芽中RNA提取方法的比较评价

从细胞中分离完整性好、纯度高的RNA是进行基因克隆和基因表达研究的基础，不同植物、不同组织的RNA提取难点各异，适宜方法也不尽相同，大豆胚芽富含蛋白质、脂质、多糖、酚类化合物及未知次级代谢产物，其组成成分的复杂性增加了从大豆胚芽中提取高质量的RNA的难度，本文采用了尿素-LiCi法、异硫氰酸胍法及改进的异硫氰酸胍法等三种方法从大豆胚芽中提取了RNA，从RNA的完整性、产率和纯度等方面对这三种方法进行了比较和评价，结果发现改进的异硫氰酸胍法是从大豆胚芽中提取RNA的适宜方法。     

果蝇血液标记基因srp原核表达质粒构建及多克隆抗体制备

果蝇基因srp是血液发育的早期标记基因,为了研究果蝇这一模式动物中血液发育的详尽过程,通过提取野生型成体果蝇的总RNA,反转录获得其cDNA文库,设计引物克隆出srp基因,将所得片段插入原核表达载体pET28a中,经酶切和序列鉴定,成功构建重组质粒,并通过IPTG诱导表达出His-srp融合蛋白,经Ni-IDA凝胶柱纯...     

枸杞多糖分离纯化及性质研究

对东北枸杞中提取的多糖,通过DEAE-cellulose(OH-)色谱柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱进行了分离纯化,通过凝胶色谱和液相色谱对其纯度进行了鉴定,并通过红外光谱初步分析了其基团构成.     

猪胰铁蛋白的分离纯化方法比较研究

比较两种铁蛋白提取方法：传统的硫酸铵沉淀法和超滤法,发现超滤法的提取效率和提取的纯度上都要大于传统的硫酸铵沉淀法.有利于批量生产铁蛋白,以满足研究需求和产品商品化.     

海南血桐叶子化学成分研究

采用硅胶柱色谱和制备薄层色谱等分离纯化技术,对海南血桐叶子石油醚和乙酸乙酯提取浸膏进行了分离纯化,利用现代波谱法结合理化分析对提纯的化合物进行结构鉴定.首次从海南血桐叶子中分离得到β-谷甾醇,木栓酮,邻苯二甲酸二丁酯,邻苯二甲酸二异丁酯和2一萘酚这5种化合物.     

旱生植物梭梭幼苗信使核糖核酸(mRNA)的分离与纯化

研究结果表明，渗透胁迫下旱生植物梭梭幼苗内脯氨酸（Pro-)含量增加，其细胞膜相对透性下降，由此我们提取了梭梭幼苗的总RNA，通过测量260nm和280nm时RNA样品的紫外吸收值的比率，就可知其纯度，然后用oligo(dT)-纤维柱层析法分离、纯化了梭梭幼苗的mRNA。     

植物病毒抗血清的制备及IgG纯化与酶标技术研究

以烟草花叶病毒（ＴＭＶ）为例研究了制备植物病毒抗血清的一般方法。以家兔和小白鼠为免疫动物，运用饱和硫酸铵沉淀法制备出高效价的兔和鼠抗ＴＭＶ血清，并运用先进的ＥＬＩＳＡ方法测定了抗血清中抗体ＩｇＧ的效价；用醋酸纤维凝胶电泳技术分析了抗血清中抗体的ＩｇＧ纯度，应用免疫双扩散法检测了提纯的ＩｇＧ的生物活性。同时还运用戊二醛一步法制出高结合率的ＩｇＧ与过氧化氢酶（ＨＲＰ）的生物活性。同时还运用戊二醛一步法     

第三代测序细菌基因组DNA提取方法的比较

为筛选有效提取细菌菌株总DNA的方法,分别采用SDS法、CTAB-SDS法、试剂盒法和改良试剂盒法对苏云金芽胞杆菌、粘细菌和放线菌进行总DNA的提取、电泳检测、NanoDrop 2000测定、PCR扩增.对放线菌和苏云金芽胞杆菌,用改良试剂盒法所提取的总DNA纯度较高,电泳条带清晰,DNA主带位于23 kb,单位体积菌液所提取到的总DNA较SDS法和CTAB-SDS法高,能满足下游的PCR扩增等分子操作.对待测样品所做的质检报告也证实样品合格,可用于后续建库、测序.而粘细菌提取到的总DNA由于它们的OD260/230在2.0以下,没有达到第三代测序样品的要求.改良试剂盒法所提取到的总DNA大多数可以满足第三代测序技术样品制备的要求.     

小鼠Shh蛋白N端基因的克隆与原核表达

从小鼠(C57BL/6)10.5d胚胎中提取总RNA经RT-PCR扩增出编码小鼠Shh基因N端cDNA序列,克隆到大肠杆菌表达载体pQEN3构建重组表达质粒pQEN3-Shh-N.重组质粒转化大肠杆菌BL21,经1.0mmol/L IPTG诱导,在SDS-PAGE上检测到20kDa目的蛋白带,与Shh N端蛋白预期大小一致,其蛋白表达量达到了全菌总蛋白的约30%.重组蛋白经Western blot鉴定结果显示,在20kDa处出现单一的显色条带,说明表达的重组蛋白为Shh N端蛋白,为研究Shh蛋白N端与毛发生长的功能奠定了基础.     

尼泊金甲酯钠合成工艺研究

尼泊金甲酯钠是对羟基苯甲酸甲酯的衍生物,是一种新型的广谱、高效食品及化妆品添加剂．本文通过对羟基苯甲酸甲酯与氢氧化钠反应制备尼泊金甲酯钠．确定影响产品质量的主要因素为研究配料比、温度、加料方式,获得尼泊金甲酯钠的合成最优化条件．该产品含量99．5％,符合药典标准．     

山苍子枝和叶中总黄酮含量的测定

以芦丁标准品为对照,采用NaNO2-A（l NO3）3-NaOH显色系统,紫外分光光度法测定山苍子枝和叶中黄酮类物质的含量.试验结果表明,山苍子枝和叶中总黄酮含量分别为1.09%,2.14%.加标回收率分别为100.70%和104.30%,RSD分别为3.14%和1.94%.本法简单易操作,结果准确,可靠.     

超声波提取水葫芦总黄酮的工艺研究

为充分利用水葫芦植物资源,避免资源的浪费,采用超声波乙醇浸提法从水葫芦中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定其含量．测得样品中总黄酮的含量C=0．4634mg／mL,回收率为98．8％,其纯度和产率均较高．该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取水葫芦黄酮类物质的有效途径．     

三种黑龙江特产鱼原肌球蛋白分子量的测定和比较

原肌球蛋白是调节动物肌肉收缩的蛋白质,与其它蛋白质相比,在各种不利的理化因素下具有突出的稳定性。所以人们推测,不同动物的原肌球蛋白在结构上应该是很一致的。我们对三种黑龙江特产鱼:大马哈鱼、鲟鱼,鳇鱼的原肌球蛋白进行了提取、纯化和结晶,并用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了分子量。其结果表明,三种鱼的原肌球蛋白均由两个亚基组成,大亚基的分子量为38000,小亚基的分子量为36500。     

氨氮测定中水样预处理方法的改进

应用纳氏试剂比色法测定水样中的氨氮时,在水样预处理方面进行了改进.经实验证明,改进后的两种预处理方法能够降低全程序空白实验值,精密度较好,值得推广.     

慢性萎缩性胃炎动物模型的复制

本实验采用两种方法复制慢性萎缩性胃炎动物模型：一是水杨酸钠小剂量,长时间灌胃加饥饱失常,劳倦伤脾法;二是注射佐剂抗原引起自身免疫法,经病理检察,两种方法均复制出典型的慢性萎缩性胃炎动物西模型,可见,动物模型的复制方法不是唯一的,采用不同的方法可以复制出相同的动物模型。