拟南芥VHA-c基因的矿质营养调节

对Ca2+和MS营养处理转VHA-c-GUS烟草叶片的GUS表达活性进行分析。研究结果表明:VHA-c2和VHA-c3可被Ca2+促进表达,而VHA-c5的表达则被Ca2+抑制。同时,MS营养成分可显著促进VHA-c2、VHA-c3和VHA-c5基因的表达。这说明VHA-c基因可被Ca2+和MS等营养成分调控表达。     

盐胁迫对甜高粱幼苗抗氧化酶活性的影响

研究了不同浓度NaCl溶液(含量0、50、100、150 mmol/L)处理对4种甜高粱幼苗超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及脂质过氧化产物丙二醛含量的影响。结果表明,与对照相比(即NaCl浓度为0),50 mmol/L NaCl处理显著增加了SOD、POD和CAT活性,而100和150 mmol/L NaCl处理则抑制了3种抗氧化酶活性。NaCl胁迫导致了脂质过氧化发生,具体表现为随着NaCl处理的浓度增加,丙二醛也增加。4种供试甜高粱对NaCl胁迫的应答有差异,其中辽甜1号在所有供试浓度的NaCl胁迫下,3种抗氧化酶活性均高于其他3个品种,而丙二醛含量最低,表明辽甜1号对NaCl的耐受性是最强的。     

温度和光照对拟南芥VHA-c基因启动子活性的调节

转VHA-c2-GUS,VHA-c3-GUS和VHA-c5-GUS基因烟草在4℃和40℃温度胁迫以及25℃光/暗处理条件下叶片GUS表达水平表明,VHA-c具有光调控性,并可被逆境温度所调节.VHA-c2,VHA-c3和VHA-c5均可被4℃低温和光照促进表达.40℃高温可显著促进VHA-c3的表达,对VHA-c5有轻微的促进,而对VHA-c2则表现出轻微的抑制作用.     

Na2CO3和 NaCl 胁迫对珙桐叶片光合特性影响的比较

以珙桐为材料,采用Li-6400型便携式光合测定系统研究了不同浓度(0,5,10,15,20mmol/L)Na2CO3和相应浓度的NaCl胁迫处理对珙桐叶片光合特性的影响.采用Li-6400型便携式光合测定系统对光合特性相关指标进行了测量.试验结果表明:低浓度(5,10mmol/L)Na2CO3的胁迫对珙桐叶片的净光合速率有一定的促进作用,但NaCl对珙桐净光合速率的作用却呈现低浓度(5,10mmol/L)抑制而高浓度(15,20mmol/L)促进的趋势;对于胞间CO2浓度而言,两种物质虽然都有一定程度的促进作用,但随着溶液浓度的增加,其影响效果呈现出了不同趋势,其中当Na2CO3浓度为10mmol/L时对其有明显得到抑制效果;随着溶液浓度的增加,Na2CO3与NaCl对珙桐叶片气孔导度和蒸腾速率抑制效果也呈规律性增加.由此可见,随着环境条件中Na2CO3和NaCl浓度的增大,由Na2CO3等碱性盐所造成的碱胁迫对植物的破坏作用明显大于由NaCl等中性盐所造成影响.     

CaCl_2对NaCl胁迫下酸枣幼苗内源激素含量的影响

本文以酸枣幼苗为试验材料,研究了NaCl胁迫下外源CaCl_2对酸枣幼苗4种内源激素(ABA、GA_3、IAA、ZT)含量的影响。结果表明:在NaCl胁迫下,5、10、20 mmol/L CaCl_2处理降低酸枣幼苗叶中ABA含量,增加GA_3、IAA、ZT的含量和IAA/ABA、GA_3/ABA、ZT/ABA的比值; 5、10、20 mmol/L CaCl_2处理可以降低酸枣幼苗根中ABA含量,增加GA_3、IAA的含量和IAA/ABA、GA_3/ABA的比值,5、10、20 mmol/L CaCl_2处理下根中ZT含量在12 h以后小于对照,20 mmol/L CaCl_2处理下根中ZT/ABA的比值在48 h以后小于对照;适当浓度(5～10mmol/L) CaCl_2能减缓NaCl胁迫对幼苗造成的伤害,提高酸枣幼苗对NaCl胁迫的适应能力。     

核桃V-ATPase c亚基基因(JrVHAc4)的克隆和抗旱功能分析

【目的】V-ATPase是植物逆境响应的重要酶,有必要了解V-ATPase相关亚基参与核桃响应逆境胁迫的功能机制。【方法】从‘香玲’核桃转录组中克隆获得1条V-ATPase c 亚基基因(命名为JrVHAc4),通过分析启动子预测其逆境响应功能。对JrVHAc4基因进行干旱胁迫下的表达分析,同时构建JrVHAc4酵母表达载体转入酵母表达系统研究其抗旱功能。【结果】JrVHAc4基因开放读码框(ORF)全长495 bp,拟推导的蛋白分子量为16 527.61 u,包含164个氨基酸,理论等电点为8.62; 其上游1 047 bp启动子包含MYC、DOF、MYB等与干旱响应相关的顺式作用元件。干旱胁迫下,JrVHAc4基因在核桃叶和根中均被显著诱导,并存在差异。对JrVHAc4转基因酵母进行不同浓度甘露醇胁迫,与对照酵母相比,发现JrVHAc4基因的表达能显著提高转基因酵母的生长活性。【结论】JrVHAc4基因能响应干旱胁迫,并能提高酵母的抗旱能力,JrVHAc4可作为核桃抗逆重要候选基因。     

不同浓度NaCl处理对盐地碱蓬萌发及生长的影响

用不同浓度NaCl盐溶液(0mmol/L、25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、150 mmol/L、200 mmol/L、250 mmol/L、300 mmol/L)处理盐地碱蓬种子,观察种子的萌发情况及可耐受盐胁迫的程度.再用0mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、300 mmol/L、400 mmol/L的NaCl盐溶液处理幼苗,观察碱蓬幼苗在不同浓度NaCl胁迫下生长情况及地上、地下部分的K+、Na+离子分布情况.实验结果表明:浓度在25 mmol/L~50 mmol/L区间内的NaCl盐溶液对碱蓬种子萌发有促进作用,在盐浓度为300 mmol/L碱蓬种子仍有30%的发芽率.经不同浓度NaCl溶液处理的碱蓬发现100mmol/L的NaCl盐溶液胁迫下,能明显提高碱蓬幼苗的株高、鲜重和干重;200 mmol/L的NaCl盐溶液对幼苗的物质累积可能起促进作用;且地上、地下部分的K+含量随处理浓度的增加而降低,而Na+含量却是逐渐积累,两者均不是线性关系.     

盐胁迫对罗布麻种子萌发的影响

采用不同浓度的NaCl、Na2SO4、Na2CO3及三者的混合盐的胁迫,对罗布麻种子的发芽率、发芽速度、发芽指数的影响及解除盐胁迫后的发芽率进行测定分析.结果表明,随Na2CO3和混合盐溶液浓度的增加,罗布麻种子的发芽率、发芽速度、发芽指数均呈下降趋势,而低浓度的NaCl(≤50 mmol/L),Na2SO4(≤10 mmol/L)促进种子萌发,高浓度的NaCl(≥200 mmol/L)、Na2SO4(≥150 mmol/L)抑制种子萌发;Na2CO3和混合盐溶液对罗布麻种子萌发具有明显的抑制作用;盐胁迫解除后,罗布麻种子的发芽率随原盐浓度增加呈降低的趋势.     

样品前处理对牛精子全蛋白质组鉴定的影响

本文主要分析样品前处理对牛精子全蛋白质组鉴定的影响,文中对5种不同的蛋白质提取液和3种不同的酶解方法进行了系统地分析比较.5种蛋白质提取液:溶液BS(4%SDS,0.1mol/L Tris-HCl,0.1mol/L DTT);溶液BU(8mol/L Urea,0.1mol/L Tris-HCl);溶液BT(7mol/L Urea,2mol/L Thiourea,0.1mol/L Tris-HCl,0.4%Chaps);溶液BR(购自Thermo,货号89901);溶液BD(2%SDC,50mmol/L NH4HCO3,25mmol/L NaCl).3种酶解方法:溶液内酶解、胶内酶解以及膜上酶解(FASP).实验结果显示:牛精子蛋白质提取能力BS最强,BU最弱;BT、BR以及BD相当.BS-FASP不适用于牛精子蛋白质组学研究.胶内酶解鉴定到的蛋白质均多于FASP法,但是胶内酶解操作过程复杂繁琐,耗时长.基于BD的溶液内酶解法鉴定到的蛋白质数量最多,膜蛋白提取鉴定能力较强,且操作时间最短,是较为理想的方法.     

不同电解质对海藻酸钠水溶液流变性能的影响

利用旋转流变仪研究氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl)和碳酸钠(Na2CO3)3种电解质对海藻酸钠溶液流变行为的影响。研究结果表明:溶液中电解质浓度为0～0.5mol/L时的粘弹性能变化不大。随着电解质浓度的增加3种电解质对海藻酸钠溶液的流变性能影响不同:NaCl和KCl对溶液的流变性能影响比Na2CO3要明显,NaCl对海藻酸钠溶液流变性能影响的响应最快,当溶液中NaCl摩尔浓度在0.9mol/L以下时,随着NaCl浓度的增加溶液的粘度和模量增大,当NaCl浓度为1.1mol/L时溶液的粘度迅速减小。在实验的浓度范围内随着KCl浓度的增加溶液的粘度和模量不断增加且最终形成的凝胶强度最大。Na2CO3对体系流变性能影响较弱,不能形成凝胶。     

盐碱胁迫对碱地肤、地肤种子萌发以及幼苗生长的影响

分别用不同浓度的中性盐(NaCl,Na2SO4),碱性盐(NaHCO3,Na2CO3)处理碱地肤、地肤种子,分析各种盐分对两种植物种子萌发的影响.结果表明:超过一定浓度以后,盐分延缓了碱地肤、地肤种子萌发;碱地肤、地肤种子的发芽率、发芽指数、活力指数也随盐分的增加而降低;幼苗各部位的生长受到影响,其中盐分对胚根的抑制作用最明显.作为典型的盐生植物,碱地肤生长的最适浓度范围是:NaCl:40~80 mmol/L,Na2SO4:20~40 mmol/L,NaHCO3:10 mmol/L,Na2CO3:5 mmol/L;地肤生长的最适浓度为:NaCl:20~60 mmol/L,Na2SO4:20 mmol/L,而在碱性盐NaHCO3,Na2CO3存在的条件下,地肤的长势随着盐浓度的增加而明显降低.综上所述:尽管碱地肤、地肤是属于同一科的两种植物,但是它们对于不同的盐碱反应有很大的差异.     

NaCl胁迫下红砂种子萌动期差异表达基因的转录组分析

【目的】筛选NaCl胁迫下红砂萌发期的差异表达基因,为耐盐碱树种选育提供基因资源。【方法】以前期拟合的萌发阈值浓度(273 mmol/L,记为M)、最适萌发浓度(43 mmol/L,记为L)、蒸馏水(记为C)处理红砂种子,每个处理3次重复,待胚根突破种皮,不超过2 mm时取出,进行转录组测序。【结果】分别在L与C对比组(记为LvsC)、M与C对比组(记为MvsC)、M与L对比组(记为MvsL)中筛选出210、2 273、2 888个差异表达基因,其中LvsC中116个上调表达,94个下调表达; MvsC中1 781个上调表达,492个下调表达; MvsL中2 165个上调表达,723个下调表达; 上调表达基因在KEGG富集中主要集中在核糖体、碳代谢、细胞色素P450代谢、谷胱甘肽代谢等途径,下调表达基因主要富集在蔗糖淀粉代谢、内质网蛋白质加工等过程。【结论】盐胁迫条件下,差异基因诱导相关反应协同发挥作用,最终使胚轴细胞伸长,突破种皮完成萌发。     

NaCl胁迫对黄瓜幼苗生长及光合作用特征的影响

以碧春黄瓜为材料,研究了不同浓度NaCl处理对黄瓜幼苗生长、叶片光合作用特性、以及脯氨酸和丙二醛含量的影响。结果表明:10 mmol/L NaCl处理促进了黄瓜幼苗生长,但高浓度NaCl(≥25 mmol/L)处理下,黄瓜幼苗的生物量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci)、光系统II电子传递量子效率(ΦPSⅡ)和叶绿素含量均随着浓度增加下降,气孔限制值(LS)、MDA和脯氨酸含量则随着浓度增加而上升;但NaCl处理对光化学效率(Fv/Fm)影响不大。由此说明,低浓度NaCl处理促进了黄瓜幼苗的生长,且NaCl浓度低于100 mmol/L时也未引起黄瓜幼苗叶片光抑制的发生,其光合作用下降的主要原因是叶绿素含量下降以及气孔限制,并且脯氨酸含量的增加也起到增强其抗性的作用。     

青枯雷尔氏菌龙胆酸1,2-双加氧酶基因的克隆、表达和酶性质的研究

本研究克隆、表达了青枯雷尔氏菌GMI1000菌株中编码龙胆酸1,2-双加氧酶的基因, 并通过亲和层析对该酶进行了纯化, SDS-PAGE结果表明该酶亚基约为38kDa.该酶的最适反应温度和最适pH分别为30℃和7.5.该酶的Km为56μmol/L,pI为4.6～4.8.纯化后的龙胆酸1,2-双加氧高度不稳定:4℃下放置72h即失去85%的酶活. 甘油和β-巯基乙醇可稳定该酶酶活,在添加10%(体积比)甘油至酶液(50mmol/L, pH 7.3的磷酸盐缓冲液保存)后,-20℃保藏2周后均能检出明显的酶活.0.1～1mmol/L Fe2 可以激活或者稳定该酶的酶活.Na ,K ,Mg2 和Ca2 (分别为1～2mmol/L)对该酶的酶活无明显的影响.Mn2 ,Zn2 和Fe3 的添加量超过2mmol/L时,酶活急剧下降.1mmol/L的Cu2 即使该酶失去酶活.     

NaCl、KCl和葡萄糖对大鳞鲃精子活力的影响

为了探究无机盐类和葡萄糖对大鳞鲃精子活力的影响,配制不同质量浓度的NaCl、KCl和葡萄糖溶液(0～10 g/L),观察4龄大鳞鲃的精子在不同溶液中的活力,测量精子的激烈运动时间、快速运动时间和寿命.结果表明:(1)低质量浓度的溶液中,大鳞鲃精子的活力随着溶液质量浓度的增加而增强,NaCl、KCl和葡萄糖溶液的质量浓度分别为5、6和5 g/L时,精子的激烈运动时间、快速运动时间和寿命最长;(2)高质量浓度的溶液中,精子在该种溶液中活力逐渐降低,NaCl和KCl的质量浓度均为9 g/L时,精子活力被抑制,但不会死亡,即这2种溶液可用于保存大鳞鲃精子,NaCl和KCl的质量浓度为10 g/L时,精子很快死亡;(3)大鳞鲃精子在KCl溶液中的快速运动时间和寿命均长于同样质量浓度的NaCl和葡萄糖溶液中的数值,其次是NaCl溶液,葡萄糖溶液中的精子活力最低,表明KCl溶液对大鳞鲃精子的激活能力最强;(4)不同质量浓度的葡萄糖溶液中,大鳞鲃精子活力的变动幅度小于NaCl和KCl溶液中的数值,表明葡萄糖对精子活力的影响弱于无机盐.     

盐胁迫对柠条生长生理效应的影响

以一年生柠条为试验材料,采用生化测定、数理统计分析相结合的方法研究了0g/L(CK)、1g/L(处理1)、2g/L(处理2)、3g/L(处理3)、4g/L(处理4)、5g/L(处理5)浓度的NaCl对柠条过氧化物酶(POD)、脯氨酸、根系活力等各项生理生化指标的变化规律。结果表明:在NaCl浓度不断增加的过程中,各处理的POD活性都表现出低浓度的盐处理对柠条生长有促进作用,可提高柠条的抗性;盐胁迫对柠条脯氨酸含量随生育期变化而变化,实验表明处理3是对柠条生长产生不利影响的临界值;不同处理下柠条根系活力的总体趋势相一致,整个生育期低浓度能提高根系活力,而高浓度对根系活力产生抑制作用。     

不同盐胁迫下胀果甘草(Glycyrrhiza inflates Bat.)Na~+吸收的共质体途径初步研究

本实验通过不同离子通道抑制剂对胀果甘草钠离子吸收的影响分析,探讨了其钠离子吸收的共质体途径,为其耐盐分子机制的研究提供基础。结果表明:在低盐浓度(50 mmol/L NaCl)和高盐浓度(150 mmol/L NaCl)下,Ca~(2+)(低亲和阳离子载体和无选择阳离子通道的抑制剂)均无显著的影响胀果甘草对Na~+的吸收;然而当加入钾离子通道抑制剂时,Ba~(2+)显著地降低了低盐胁迫(50 mmol/L NaCl)下胀果甘草对钠离子的吸收;TEA~+、Cs~+显著的降低了在高盐胁迫(150mmol/L NaCl)下胀果甘草对钠离子的吸收。由此得出,无选择阳离子通道NSCCs和低亲和阳离子载体LCT1不是钠离子流入的主要途径,钠离子通过2条低亲和性的Na~+吸收途径流入:途径1对Ba~(2+)敏感,对TEA~+、Cs~+不敏感,介导低盐浓度(50 mmol/L NaCl)下的Na~+吸收;途径2对TEA~+、Cs~+敏感,对Ba~(2+)不敏感,介导高盐浓度(150 mmol/L NaCl)下的Na~+吸收。     

非生物胁迫对油菜脯氨酸积累与BnGG2基因表达的影响

测定了非生物胁迫处理后甘蓝型油菜矮化突变体NDF-1及其野生型“3529”游离脯氨酸含量和G蛋白γ亚基基因BnGG2的表达变化.结果表明,从表型上看,突变体比野生型更耐胁迫.NDF-1和“3529”中脯氨酸含量随高温、高盐和干旱胁迫时间递增,但NDF-1中脯氨酸含量低于“3529”.NDF-1和“3529”中BnGG2基因均可被高盐(200 mmol/L NaCl)和干旱(20% PEG 6000)诱导,而被高温(40 ℃)抑制,NDF-1比“3529”反应更迅速明显.低温(4 ℃)胁迫后脯氨酸和BnGG     

扎龙保护区不同生境羊草的抗盐碱性研究

以不同浓度的NaCl(0～600 mmol/L)和Na2CO3(0～200 mmol/L)对羊草进行胁迫处理,结果表明:NaCl、Na2CO3处理影响羊草的营养生长以及物质代谢,具体表现为相对生长率随着盐碱浓度的升高而降低;可溶性糖含量呈先降低后升高的趋势;脯氨酸含量随着盐碱度的升高而升高;叶绿素a、b均呈先升高后降低的趋势.不同生境羊草的抗盐碱性为碱土>沙土>草甸土.     

ABA和H2 O2在NaCl诱导的气孔关闭中的作用

以拟南芥野生型（wt）和ABA合成缺失突变体（aba3）为材料，采用表皮生物分析法研究了NaCl胁迫条件下，ABA和H2O2在气孔关闭中的作用。结果表明：100mmol/L的NaCl可有效诱导wt气孔关闭，而对aba3的气孔运动无明显影响；10^-2mmol/L的H2O2处理或100mmol/L的NaCl与10^-2mmol/L ABA共处理可有效诱导wt与aba3的气孔关闭，且幅度类似；H2O2的性清除剂CAT可部分逆转NaCl处理及NaCl与ABA共处理引起的气孔关闭，因此推测，NaCl胁迫条件下，植物保卫细胞内ABA浓度升高，诱导H2O2的产生，进而诱导了气孔关闭。