重组家蝇细胞色素P450 6A1的大肠杆菌对艾氏剂的生物降解作用

以大肠杆菌为宿主表达家蝇细胞色素P450 6A1(CYP6A1)酶,在CYP6A1基因后面加入人细胞色素P450还原酶CPR基因,验证了CPR酶对CYP6A1酶催化功能的影响,和CYP6A1酶、重组大肠杆菌对艾氏剂的代谢能力.结果表明:CYP6A1蛋白对艾氏剂有环氧化作用,在CYP6A1对艾氏剂催化中起关键作用.将5μmol/L艾氏剂加入重组大肠杆菌菌液8 h可检测到163.36nmol/L艾氏剂环氧化产物狄氏剂,说明CYP6A1-CPR宿主菌对艾氏剂具有代谢能力,可用于艾氏剂污染的土壤的生物降解.     

细胞色素P450 55B1的直接电化学及对一氧化氮的电催化检测

采用戊二醛(GA)交联法将细胞色素P450 55B1(CYP55B1)固定在热解石墨电极(PGE)表面,牛血清白蛋白(BSA)封闭多余活性位点,构建了一种新型一氧化氮(NO)生物传感器.并考察了电化学生物传感器的选择性与稳定性.结果表明:CYP55B1实现了直接电子传递,氧化还原峰电位位于-0.355 V和-0.385 V,CYP55B1对NO具有电催化活性,其催化还原峰位于-0.85 V. NO的检测线性范围为14.4～108μmol·L~(-1),检测限为10.47μmol·L~(-1),且该生物传感器具有良好的稳定性及选择性.     

2-乙酰基苯并咪唑缩牛磺酸Schiff碱铽配合物的合成及性质研究

在甲醇溶液中合成了新型2-乙酰基苯并咪唑缩牛磺酸Schiff 碱配体及其铽(Ⅲ)配合物,通过元素分析、质谱、核磁共振谱、红外光谱、三维荧光激发和发射光谱进行了分子组成确证及性质研究.结果表明,铽(Ⅲ)配合物组成为Tb2L3(NO3)3(L=C11H12N3O3S),该配合物的荧光除受中心离子微扰的配体发光外,还有明显的中心Tb3+离子窄带发射,在220.0～350.0 nm(最佳激发波长为320.0 nm)激发时,发射中心Tb3+离子的特征窄带荧光;在350.0～540.0 nm(最佳激发波长为410.0 nm)激发时,产生550.0 nm的发射谱线;在波长为860.0 nm的锐光激发下,发射490.0 nm的上转换荧光.     

阿魏酸的荧光光谱与荧光量子产率

在酸性条件下,阿魏酸荧光强度随pH值的升高而增大,荧光峰的最大激发和发射波长分别为310 nm和415 nm。在碱性条件下,最大激发波长和发射波长红移到350 nm和460 nm处。随着pH值的升高,其荧光强度逐渐增大,当pH值大于10.0时,其荧光强度达到最大值且趋于稳定。阿魏酸的荧光光谱随pH值的变化是由于其分子中羧基和羟基质子的离解。以硫酸奎宁为参比,测得阿魏酸水溶液的荧光量子产率为0.006 1。     

双波长NO-PLIF法测量运动激波前后温度场的实验研究

利用双波长NO-PLIF法,研究激波管内运动激波前后温度场分布.实验中以NO作为温度测量的示踪剂,分别选取波长为225.072 nm和225.282 nm的染料激光作为激发光,获得了较好的荧光图像.对入射激波流场的1区和2区温度分布进行了理论估算和实验测量,结果表明NO的荧光强度对温度的敏感程度与激发波长有关,当波长为225.072 nm时,荧光强度随温度变化不明显,当波长为225.282 nm时,荧光强度随温度变化而剧烈变化.实验测得的温度分布相对理论估算值的误差约为10％左右,这表明该方法具有较高的精度,具有一定的工程应用价值.     

亚微米传输平均自由程的掺铒多孔铌酸锂中的3波长可见上转换荧光（英文）

制备了多孔掺铒铌酸锂材料,并研究了其3波长可见上转换荧光特性.在980 nm连续光激发下发射峰中心波长分别为660、550和450 nm.通过相干背散射法测得多孔铌酸锂的传输平均自由程在亚微米范围,这使得制备的多孔掺铒铌酸锂适用于可见光多波长上转换随机激光.     

基于二氟荧光素内酰胺的一氧化氮分子荧光探针的合成及应用

合成了基于二氟荧光素内酰胺开环反应的一氧化氮分子荧光探针并对其结构进行了表征。二氟荧光素内酰胺本身无荧光,当与NO反应后开环水解生成二氟荧光素,在λex=484nm光激发下产生荧光且最大发射波长λem=514nm。在PH〉4．8的体系中二氟荧光素内酰胺与NO反应后荧光强度达最大且稳定。在H2O2、·OH、O2-、NO2-、ONOO-存在下,荧光探针对NO表现出很高的选择性。以NOC13为NO释放剂,荧光强度随NOC13浓度的增加而增大,可实现对NO的直接检测。     

散射/荧光比率法测定核酸

在pH 9.62的BR缓冲溶液中,阳离子染料吖啶橙(AO)与鱼精DNA(fsDNA)通过静电作用形成二元复合物,导致AO在激发波长272 nm处产生增强的散射光,而在发射波长534 nm处出现荧光猝火.利用共存的散射和荧光信号,提出了一种散射/荧光比率法.在激发波长为272 nm和发射波长为534 nm的条件下,其散射/荧光比值(I/F)和0.02～1.40 μg,/mL范围内的fsDNA溶液成一定的线性关系,据此测定核酸的含量,其检出限为5.7 ng/mL.此方法成功用于核酸合成样的测定,RSD为1.3%-2.0%.实验结果表明,比率法比单波长的散射法或荧光法灵敏度更高,线性范围更宽.     

苦杏仁酸-EDTA-CTMAB体系荧光法测定铽

研究了铽-苦杏仁酸-EDTA-CTMAB体系的荧光性质,探讨了荧光体系的组成及影响因素,建立了在该体系中测定铽的新方法.在pH值为12.6时,由于表面活性剂CTMAB的加入,使体系的相对荧光强度有较大的增强.在激发波长245 nm和荧光波长547 nm处测定铽,检测限达10 ng/ml.此法应用于合成样品中微量铽的测定,结果令人满意.     

基于荧光纳米传感的DEHP快速检测方法研究

采用一锅法制备了超支化聚乙烯亚胺-铜纳米簇(hPEI-Cu NCs),并利用其构建“turn on”荧光纳米传感器对邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)进行定量快速检测.hPEI-Cu NCs的最佳激发波长为385 nm,在510 nm处有强发射,透射电镜(TEM)分析结果表明:其形态呈现良好的分散性,粒径为(1.3±0.3)nm.在加入Cu²⁺后,hPEI-Cu NCs的荧光被Cu²⁺淬灭; 但当存在DEHP时,Cu²⁺不能淬灭hPEI-Cu NCs的荧光,且使其荧光强度比不加DEHP时有所上升.随着DEHP质量浓度的增加,hPEI-Cu NCs的荧光逐渐增强,从而达到检测DEHP的目的.荧光强度变化率((I-I₀)/I₀)与DEHP的质量分数在1.0～7.0 mg·kg^-1的范围内呈现良好的线性关系,当信噪比为3 时计算出DEHP的最低检出限约为0.4 mg·kg^-1.     

利用柔红霉素—Cu（Ⅱ）荧光光度法测定核酸

研究了在Cu(Ⅱ）的存在下柔红霉素与DNA或RNA的荧光猝灭反应，发现单、双链DNA及RNA均能大幅猝灭柔红霉素-Cu（Ⅱ）二元体系的荧光，最佳PH值范围为5.4-7.1，最大激发和发射波长分别在505和555nm。在最佳条件下，测定双链DNA线性范围为0-0.6μg/mL,检测限为0.008μg/mL,相对标准偏差在3.0%以内。温度的影响和吸收光谱证实了DNA对此二元体系的荧光猝灭机理为静态猝灭机理。     

CdS纳米颗粒对荧光染料光谱特性的影响

4-溴-1，8-萘酰亚胺包裹CdS纳米微粒后，它的紫外-可见光吸收光谱由348．28nm移动到349．79nm，并且吸收强度有明显的增加。在相同激发下（360nm），4-溴-1，8-萘酰亚胺-CdS纳米颗粒复合体的荧光光谱轮廓与4-溴-1，8-萘酰亚胺基本相同，但发光峰有“红移”，而且发光强度略有下降。在400nm激发下，4-溴-1，8-萘酰亚胺的发光峰在570．55nm；在330nm激发下，4-溴-1，8-萘酰亚胺-CdS纳米颗粒复合体的荧光峰在499．66nm。同时，4-溴-1，8-萘酰亚胺-CdS纳米颗粒复合体的荧光强度有所提高。     

增效荧光法测药物中醋酸氢化泼尼松的含量

考察了表面活性剂溴化十六烷基三甲铵对肾上腺皮质激素类药物醋酸氢化泼尼松氧化产物的荧光增敏特性 ,据此建立了一种测量醋酸氢化泼尼松的荧光光度分析方法。提出了荧光增强的作用机理。本方法检出限较其它方法低 (3.6 7× 10 -8mol·L-1) ,灵敏度高。用于测定片剂药物中PA的含量 ,分析结果令人满意     

哈西奈德的荧光分析法研究

研究了哈西奈德与浓硫酸的反应条件及几种表面活性剂对水解产物荧光性质的影响.建立了一种测定哈西奈德的荧光光度分析方法.本法检测限为1.76×106molL1,荧光强度与浓度在2.20×106~1.10×105molL1范围内呈现良好的线性关系,方法的相对标准偏差为1.15%.     

锰-氧氟沙星配合物的光谱研究

对氧氟沙星(OFLX)以及Mn2+与OFLX配合物的紫外-可见光谱及荧光光谱进行研究,发现OFLX在pH为5.1时,其最大激发波长293 nm,最大发射波长497 nm,且随溶液pH的改变,最大激发和发射峰位也发生变化.采用摩尔比法测定Mn2+与OFLX形成1∶2的配合物(pH=9.0),稳定常数为1.37×1011.pH值对Mn2+与OFLX配合物的荧光光谱强度的影响研究表明:配合物的荧光强度在酸性溶液中较强,中性溶液中最强,碱性中最弱;OFLX与Mn2+形成配合物的荧光显著增强且发射峰产生蓝移(约15 nm),随着Mn2+数量的增加,荧光猝灭越来越弱;在OFLX与Mn2+的配合物中,可能是相距较近的羧基和羰基基团与中心离子Mn2+配位,并对配合物的空间结构进行了预测.     

金属离子和变性剂对黄精凝集素Ⅱ构象与功能的影响

黄精凝集素II（Polygonatum cyrtonema Hua.Lectin II,PCLII)具有323nm的荧光发射峰和281．6nm的激发峰,其远紫外圆二色谱（CD谱）显示224nm负峰,分子中含有17．3％的α螺旋和45．8％的β折叠,在10mmol/L的SDS中,PCL II完全丧失兔红细胞凝集能力及促T－淋巴细胞有丝分裂活性,CD谱呈现双负峰的a螺旋构象,去除SDS后,则呈无规卷曲构象,此时,荧光发射峰红移而激发峰蓝移,PCL II仍完全失活,在EDTANa2溶液中,PCL II凝集红细胞能力及促淋巴细胞有丝分裂活性完全丧失,去除EDTA后,红细胞凝集活性完全恢复,但仍失去促淋巴细胞有丝分裂能力,PCL II二级结构变化不大,荧光光谱的变化表明微环境受到影响。     

Expression, purification and characterization of the soluble CuA domain of cytochrome c oxidase ofParacoccus versutus

The key subunit Ⅱ of cytochrome c oxidase (CcO) contains a soluble binuclear copper center (Cu_A) domain. The Cu_A domain of Paracoccus versutus was cloned, expressed, purified and characterized. The gene encoding the Cu_A domain in pET11d vector was expressed in E. coli BL21 (DE3). The results showed that the Cu_A domain was expressed mostly in inclusion bodies and the Cu_A domain protein synthesized in E. coli cells represents approximately 10 percent of the total cellular proteins. Dissolved in urea, dialyzed and recombined with Cu⁺/Cu²⁺ and purified by the Q-sepharose fast flow anion-exchange column and Sephadex G-75 gel filtration column, the soluble purple-colored protein, which shows a single band in electrophoresis, was obtained. The UV-visible absorption spectrum of Cu_A domain showed that there are intense band at 478 nm and a shoulder peak at 530 nm, and two weak bands at 360 and 806 nm respectively, which can be assigned to the charge transfer and the interactions of obitals of Cu—S and Cu——Cu in the mixed-valence binuclear metal center (Cu₂S₂R₂). The far-UV CD spectrum indicated that this domain is predominantly in β-sheet structure. The fluorescence spectra showed that its maximal excitation wavelength and maximal emission wavelength are at 280 and 345 nm, respectively.     

碳纳米管-苯胺电荷转移配合物荧光性质研究

单壁碳纳米管(SWNT)在苯胺中回流，产生碳钠米管-苯胺电荷转移配合物(CNT-AN CTC)．在丙酮稀释液中，用516nm光激发，产生两个荧光发射峰，分别位于564nm和606nm．详细考察了不同胺类化合物对CNT-AN CTC荧光的猝灭作用，结果显示胺所连烷基种类、烷基数目、胺基数目不同对CNT-AN CTC荧光猝灭程度不同，同时探讨了其猝灭机理．     

物理气相沉积法制备TP/TFA纳米薄膜与光致发光特性探究

为了探究有机荧光材料在微纳尺寸上的荧光特性，采用低真空物理气相沉积方法制备了茶碱（TP）和2，3，5，6-四氟对苯二甲酸（TFA）有机纳米薄膜。通过对TP和TFA薄膜的荧光性质进行表征发现：与TP粉末相比薄膜的荧光发射峰由1个增加到4个，发射波长范围拓宽了100 nm，TFA的荧光发射峰之间的相对荧光强度发生了变化，与原料粉末相比在408 nm处的荧光发射峰蓝移了7 nm，362 nm处的荧光发射峰红移了3 nm。另外随着纳米薄膜厚度的逐渐增加，其荧光效率也逐渐增大。通过对TP和TFA纳米薄膜的表面形貌表征发现：随着薄膜厚度的增加，颗粒的聚集形态尺寸逐渐增大，从而验证了荧光效率随膜厚增加而逐渐提升的特性。