人类精液一步冷冻法的研究

自Sherman（1963）成功创立液氮冷冻保存人类精液以来,人类精液的冷冻普遍应用程控冷冻仪或人工操作的多步控制降温方法,对将精液从室温直接置-196℃液氮冷冻保存的“一步冷冻法”,迄今报道和评价尚少。本文选用聚丙烯1mL注射器作精液冻贮容器,实验建立一种简便有效的人类精液一步冷冻方法。冷冻保护剂以BWW精子培养液为基液,添加入10％体积比甘油、甘氨酸、蔗糖和人血清白蛋白等制备而成。精液冻贮容器为聚丙烯一次性使用的IInL注射器。精液与冷冻保护剂等体积混匀后,直接投入一196T液氮“一步冷冻”和保存。解冻为37℃水浴5ban…     

无卵黄型人类精液冷冻保护剂试验与临床初步应用

不含卵黄的“改良 Tyrode’s液—甘油”型冷冻保护剂(简称 T—G 保护剂)与含卵黄的“甘油—卵黄—柠檬酸钠”型冷冻保护剂的试验比较表明,两者的精子复苏率、膜低渗肿胀率、Kremer’s 精子宫颈粘液穿透试验、去透明带地鼠卵穿透试验没有显著性差异(P>0.05);T-G 保护剂的甘油浓度分别为15%、10%,6%时,精子复苏率没有显著性差异(P>0.05);应用 T-G 保护剂冷冻保护的精液,人工授精已使1名丈夫无精子症的妇女受孕,并足月分娩1男婴,生长发育正常,提示 T-G 保护剂能有效地保护精子的受精能力。此外,对“TES-Tris-甘油-卵黄”型冷冻保护剂去除卵黄后的效果观察,精子的复苏率显著低于对照组(P<0.01)。     

白山羊冷冻精液人工授精技术研究

家畜人工授精技术的推广应用对促进畜牧业生产的发展，提高家畜良种化程度，发挥着巨大的推动作用。牛，羊、猪人工授精的推广已普遍应用于畜牧生产。羊的常温人工授精目前还处于探讨阶段，尚为雏形，在国内很少报导。针对养羊业繁育配种季节性明显，良种公羊利用率低的现状，研究山羊冷冻精液人工授精，是急待解决的一大难题。为此，自我县在养殖示范村建设和推广山羊杂交改良工作中．对山羊冷冻精液人工授精技术进行了试验研究，并在部分地区进行了示范应用，现将研究应用简要总结如下．仅供业内人士参考。     

矮脚黄羽肉鸡的精液冷冻研究

对矮脚黄羽肉鸡,运用采集精液进行研究,其方法为人工徒手按摩其背、以尾部可以采得精液．对其品质进行测试表明:采精量平均0．512±0．316 mL(变动范围0．3-0．8 mL);精液似浓稠的牛乳状,每毫升精液中精子数17-19亿个,活力9级以上,pH值6．5,微腥．采出的鲜精,用2号 (3％柠檬酸三钠-卵黄稀释液)、3号(11％蔗糖-卵黄稀释液)、5号(11％蔗糖-0．1％柠檬酸三钠-卵黄稀释液)稀释液稀释,精子活力都8-9级,以5号液最好．即11％蔗糖-0．1％柠檬酸三钠溶液 100 mL中,加6 mL甘油,加16 mL鲜卵黄．与原精液做1:1稀释后用水浴套或毛巾包裹,直接放入5℃冰箱中平衡1 h后装入0．25 mL塑料细管,吊入液氮(-196℃)中冻存．在50℃温水中解冻后,精子活力在9级以上．其冻精稀释液以5号最佳．精子活力达6-7级．8号液(5％葡萄糖溶液 77 mL中加入甘油6 mL,鲜卵黄17 mL),3号液(11％柠檬酸三钠溶液100 mL中加6 mL甘油,16 mL鲜卵黄)也较好,冻精复苏后,活力达5-6级．     

波尔山羊冷冻精液稀释液配方研究

实验采集三头波尔山羊种公羊精液,比较三种精液(A.葡萄糖-柠檬酸钠-卵黄;B.葡萄糖-柠檬酸钠-乙二胺四乙酸-卵黄;C.乳糖-卵黄)冷冻保存稀释液配方对颗粒冻精解冻效果,以及测定解冻后精子活力,结果表明:C稀释液解冻后精子的存活率平均为35.4%,优于A和B液呈现显著差异或极显著差异(P＜0.05,P＜0.01),而且C液的解冻后的存活时间为58.75h,高于A和B液,差异极显著(P＜0.01).结论:C的稀释液配方是最优的颗粒解冻配方.     

牛精液冷冻技术的研究进展

简要介绍精液冷冻技术发展历史,分析影响牛冷冻精液受胎率的主要技术因素。认为近年来冻精生产和应用的各个技术环节均没有重大突破,今后应该继续对这些环节进行优化组合,尤其是在水牛冻精生产技术的标准化、细管冻精生产成本的降低及分离精子的冷冻保存等方面应加大研究投入和力度。     

人类精子的冷冻生物学特性

人类精子的冷冻保存，精子要经历与冷冻保护剂孵育、降温冷冻、超低温贮存和解冻复温等过程，这过程的化学和物理效应直接作用于精子，精子功能不可避免地受到影响。本研究应用多种方法探讨人类精子的冷冻生物学特性。精子活动率和活力采用Malker精子计算器测定（n=150），精子膜完整性应用低渗膜肿胀试验（n＝60），精子体外存活用培养法观察（n＝8），精子ATP含量用LKB荧光测定仪检测（n＝55），精子穿透宫颈粘液能力采用Kremer试验评估（n＝42），精子受精能力借助去透明带地鼠卵穿透试验检测（n＝30）。精子冷冻采用程序控制生物冷…     

人类低品质精液的一步冷冻保存

男性不育症有部分病因是由于低品质精液因素所致,对这类精液进行冷冻保存有助于临床结合生殖工程技术实施治疗。近年人类精液冷冻保存方法学有了很大进展,但低品质精液体外处理结合一步冷冻的效果尚无报道。低品质精液按照其低精子参数分成3组：1组（低精子计数组,n二6）,11组（低精子活动率组,n＝11）,皿组（低正常精子形态率组,n＝8）。1组用BWW生理液洗涤、离心制备成精子悬液。3组的精子悬液与冷冻保护剂等量混匀后吸人IInL聚丙烯注射器,直接置一196T一步冷冻和保存。经体外处理精子后的3组标本,解冻后的精子复苏率分别为（…     

不同冷冻方法和解冻液对猪精液冷冻效率的影响

采用三种不同的冷冻方法冷冻猪的新鲜精液,再分别用不同的解冻液在相同条件下同时解冻,对比解冻后精子的活力和顶体完整率,以优化猪精液冷冻方法.实验一:随机选取三头健康的有稳定受精能力的优良种公猪,采集新鲜精液,分别用干冰颗粒、液氮颗粒和液氮细管三种方法冷冻,用同样的方法解冻,对比解冻后精子的活力和顶体完整率;实验二:用不同的解冻液解冻经干冰颗粒法冷冻的精液,对比不同解冻液对精子活力的影响;实验三:以孤雌激活和鲜精受精为对照,验证经实验一和实验二选择出来的最优冷冻方法和解冻液处理后的精子的体外受精能力.实验一显示,干冰颗粒冷冻法冷冻的猪精液解冻后精子活力(0.23)略高于液氮颗粒法的精子活力(0.20),而二者均显著高于细管冻精法的精子活力(0.08)(P<0.05),液氮颗粒法的顶体完整率(54.7%)和细管法的顶体完整率(54.2%)无显著差异,但二者均显著低于干冰颗粒法的顶体完整率(58.0%)(P<0.05).实验二显示,Glucose-EDTA解冻液解冻后,精子活力(0.22)显著高于DPBS-BSA解冻液解冻后的精子活力(0.13)(P<0.05).实验三:经干冰颗粒法冷冻、Glucose-EDTA解冻液解冻的精液,体外受精后的囊胚发育率(17.6%)与鲜精体外受精囊胚率(17.9%)无显著差异,但二者均显著低于孤雌激活对照组的囊胚率(36.6%)(P<0.05).由此可知:干冰颗粒法冷冻结合Glucose-EDTA解冻液解冻是较为理想猪精液冷冻保存方法,经该方法冷冻、解冻的猪精液,体外受精后的胚胎发育率与鲜精没有显著差异.     

三种精液检测工具的比较与评价

目的：比较自制Ｍａｃｒｏ精子计数板、Ｍａｋｌｅｒ精子计数板及血细胞计数板三种精液检测工具的精密度和一致性。方法：３０例精液标本分别用上一种计数板计数精子密度；分析精子活动率及运动速度，并对所测结果进行配对ｔ检验和一致性分析。结果：（１）三种计数板计烽精子密度结果无显性差异，并具有很好的一致性；（２）Ｍａｃｒｏ反和Ｍａｋｌｅｒ板检测精子活动率和运动速度结果无统计学差异。结论：自制Ｍａｃｒｏ精子计数     

牦牛用普通牛冷冻精液配种的受胎效果

四川省甘孜藏族自治州有牦牛205万头,是我州畜牧业的支柱。但牦牛是一个原始品种,晚熟,生产性能低,其产品满足不了人们生活水平日益提高的需要。从1976年起开始运用普通牛冻精配种改良牦牛,以期提高其生产性能。牦牛同普通牛杂交属种间杂交,据文献报道,由于受种间隔离机制及精卵细胞捂抗作用的影响而受胎率低,妊娠后期易患羊水过多症而流产率高。1976和1977年我州用黑白花奶牛冻精配种牦牛的结果也证明了这一论点。为探索提高牦牛用普通牛冻精配种的受胎效果,1978—1982年在石渠县国营牧场进行了不同组合受胎效果的比较试验。     

北极狐精液冷冻和解冻对精子活力的影响

对9－10月龄的后备北极公狐的精液进行了冷冻观测,结果表明：I号稀释液经冷冻保存（－196℃）3年,其解冻活率达45％．5％葡萄糖作为解冻液明显好于葡－柠解冻液,2．9％柠檬酸钠液不适于北极狐冷冻精 液,干解冻优于湿解冻。     

关于公牛冷冻精液冻后存活精子数的探讨

当今世界各国对奶牛的冷冻精液人工授精已普遍采用,随着冷冻精液人工授精的推广和普及,对公牛生产性能和外貌的选择愈来愈周全和精确,其目的是充分利用良种公牛,大量繁殖质量好的后代。但在实际工作中,我们常常发现生产性能和外貌优秀的公牛,由于精液品质低劣、精子的抗冻性差等原因,被淘汰。为此对公     

角膜两种冷冻方法的比较研究

以免角膜为材料，比较了程序控制冷冻法和简易悬吊冷冻法的冷冻效果。结果表明，应用“二甲基亚砜—人血清白蛋白冷冻保护剂，两种方法都可获得较高的角膜内皮细胞存活率（＞９５％）。程序控制冷冻法能准确地控制实验条件，结果重复性好，易于分析冷冻效果。从冷冻角膜应用于临床考虑，应建立和发展程序控制冷冻法。     

冷冻法卤水脱硝技术改进的研究

采用间歇冷冻法考察了不同降温速率下芒硝晶体粒度及分布情况,研究了芒硝结晶成长速率数学模型.结果表明,在卤水冷冻脱硝过程中通过控制降温速率为0.24℃/min,将过饱和度控制在介稳区内,利于结晶过程的操作,并且可以得到平均粒径为300μm芒硝晶体,以满足芒硝与卤水的沉降分离要求.     

人类视觉与计算机视觉的比较

从视错觉等视觉生理现象以及知觉的特性出发,对人类视觉与计算机视觉进行比较,并根据目前对人类知觉活动(特别是视知觉活动)的认识程度讨论计算机视觉目前的状况.     

程控交换机故障诊断与维护研究

随着程控交换机技术不断发展,程控交换机的功能越来越强大,系统越来越复杂,系统的故障类型也越来越多。为了提高交换机系统的利用率,必须加强系统的维护与管理。本文对程控交换机故障诊断与维护进行了分析和研究。     

冷冻法硝酸磷肥厂产品综合开发研究

为了综合利用冷冻法生产硝酸磷肥的副产品硝酸钙,开发出多种产品,研究开发了以副产品硝酸钙为原料生产工业硝酸钙、工业硝酸钾和碳酸钙系列产品的新技术。产品不仅质量合格,且成本远低于常规生产方法生产的同种产品。     

17β—雌二醇对冷冻精液授精绵羊繁殖率的影响

用冻精给绵羊授精,引起受胎率下降的一个重要原因,认为是精子运行中活力的下降。由于雌二醇能促进精子运行的启示,给孕酮诱导发情的成年母羊,注射17β—雌二醇,测定其用冷冻精液授精后的效果。据授精后18天所作的孕酮测定:注射17β—雌二醇,50毫克的母羊受胎率为43％;用冷冻精液人工授精而不注射雌二醇的母羊受胎率为52％;和新鲜精液人工授精的母羊为86％。产羔率分别为6,35和69％。对雌二醇处理的母羊来说,受胎率和产羔率之间有明显的差别,提示雌二醇事实上造成早期胚胎死亡的增加与使用冷冻精液有关。