芽殖酵母Sik1蛋白在纺锤体定位中的功能

为了探究芽殖酵母蛋白Sik1在有丝分裂纺锤体定位中的功能,利用同源重组技术将SIK1的内源启动子替换成GAL1启动子,得到基因组位点过表达SIK1的菌株,同时使菌株表达GFP-Tub1,以便观察纺锤体;接着在12℃低温条件下培养细胞以促进双核细胞的产生,细胞经乙醇固定、DAPI染色后在荧光显微镜下观察细胞核分裂及纺锤体...     

细胞不对称分裂机制--芽殖酵母接合型不对称转换

芽列酵母的母细胞与子细胞呈不对称接合型转换，其原因是只有母细胞可表达编码核酸内切酶的基因HO，使相反接合型的缄默基因转位到活动位点取代了原来的接合型基因。HO的不对称表达是因在细胞分裂的末期至G1早期，子细胞核中存在有Ashlp转录抑制因子。Ashlp的不对称分布是由其mRNA的定向转运而实现的：ASH1 mRNA在有丝分裂期被转录出之后，通过接头蛋白She2p和She3p与肌球蛋白Myo4p结合成核糖核蛋白颗粒，经肌动蛋白纤维转运到子细胞远端皮层而锚定并翻译。     

非常用酵母的遗传学，生物化学及生物技术实验指南

科学家们根据对酵母菌研究的深入程度不同，把芽殖酵母和裂殖酵母称作常用酵母，而把与之相对的那些研究较少的酵母称作非常用酵母。为便于开展对非常用酵母的深入研究，K．乌尔夫等人编著了本书。     

芽殖酵母S 期检验点通路定量生物学研究

构建由羟基脲(HU)诱导的芽殖酵母S期检验点激活和调控DNA复制的理论模型.模拟结果表明,对于不同浓度HU的刺激,检验点激活和调控系统的反应存在霍普夫分岔,其中的分岔点对应于检验点激活的HU阈值浓度;而且发现该通路的激活过程在较大参数范围内会出现振荡现象.同时,利用构建了Rnr3-GFP荧光蛋白的酵母菌株,在不同的HU浓度刺激下,测量酵母菌Rnr3蛋白多时间点的表达水平,得到酵母菌对HU浓度的实验反应阈值,与理论结果相符合.这一工作构建了酵母S期检验点定量研究的基本框架,可为进一步的理论和实验研究提供线索.     

UV胁迫酵母细胞凋亡过程的拉曼光谱研究

【目的】了解UV诱导酵母细胞发生凋亡过程中生物大分子的变化及细胞凋亡的分子机制。【方法】应用单细胞激光光镊拉曼光谱技术(LTRS),实时研究酵母细胞凋亡过程中拉曼光谱强度的动态变化,分析单个细胞凋亡过程的生理生化变化。【结果】致死剂量UV照射酵母细胞后,细胞发生凋亡。对于群体细胞,归属于核酸的1085cm-1,1300cm-1,蛋白质的850cm-1,1440cm-1,1604cm-1,1650cm-1和脂类的1085cm-1,1300cm-1,1440cm-1拉曼峰强度都随凋亡时间的延长而降低,反映酵母细胞在凋亡过程中,细胞内核酸、蛋白质、脂质等大分子物质的含量随时间变化逐步减少;1604cm-1下降幅度最大,到凋亡后期下降60%,反映细胞凋亡过程中能量代谢受阻,呼吸产能活力下降,推测与麦角固醇结构与功能改变有关。单个细胞凋亡过程动态的光谱变化显示,归属于蛋白质等生物大分子的光谱强度也呈下降趋势,但是在90~120min和125~167min时间段里,850cm-1,1085cm-1,1300cm-1,1440cm-1和1665cm-1拉曼峰强度出现恢复性的上升和下降过程,说明群体细胞平均后的光谱数据信息,掩盖了个体细胞凋亡过程中一些信息的变化,群体细胞的结果不能完全反映个体细胞真实的生理状态。【结论】LTRS基于单个细胞水平上的研究,能更直接、真实地反映UV胁迫下细胞内生物大分子变化的动态信息。     

补料分批培养海洋红酵母的研究

在摇瓶培养条件研究的基础上，进行了反应器补料分批培养海洋红酵母的实验，在10L气升式环流式发酵罐中，间歇和连续补料分批培养时干细胞浓度分别为23．08g／L和25．25g／L。     

蛋白体外结合实验联合质谱分析鉴定 Num1 的互作蛋白

目的: 为了解析芽殖酵母 Num1 蛋白在纺锤体定位和线粒体中的调节机制．方法: 利用大肠杆菌原核表达 并纯化了在 Num1 功能中起核心作用的补丁组装(PA) 结构域的重组蛋白, 通过蛋白体外结合实验(Pull-down) 分 离了酵母细胞中与 PA 结构域相结合的蛋白复合物,并对其进行了质谱分析．结果: 鉴定了一系列新的 Num1 互作蛋 白,包括核糖体蛋白,参与蛋白折叠、分配及转运的内质网和高尔基复合体蛋白, 参与基因转录和翻译的核酸酶和 蛋白酶,及其他功能的蛋白．结论: Num1 的互作蛋白的鉴定为进一步研究 Num1 的作用机制奠定了基础.     

带不同观测阵系统的自校正观测融合Wiener滤波器

对于带有不同观测阵、相关观测噪声和未知噪声统计的多传感器线性离散定常随机系统,利用相关方法,得到了噪声统计信息的在线辨识器.基于ARMA新息模型,提出了自校正加权观测融合Wiener滤波器,避免了求解Lyapunov和Riccati方程,减少了计算负担,适于实时应用.利用动态误差系统分析(DESA)方法,严格证明了提出的自校正融合Wiener滤波器以概率1或按实现收敛于相应的最优观测融合Wiener滤波器,即具有渐近全局最优性.一个3传感器跟踪系统的仿真例子说明其有效性.     

利用大豆乳清废水生产单细胞蛋白的酵母筛选

大豆乳清废水是大豆分离蛋白（ISP）生产过程中排放的高质量浓度有机废水,其COD质量浓度高达10 000 mg/L以上,C、N、P含量丰富,且无有毒物质,用于培养工业酵母,不仅可以使废水COD质量浓度得到大幅削减,降低后续废水处理的难度和费用,同时还可以回收具有较高营养价值的单细胞蛋白（SCP）.以白地霉（Geotrichum candidum link）、产朊假丝酵母（Candida utilis）、热带假丝酵母（Candida tropicalis）、解脂假丝酵母解脂变种（Candida lipolytica var.lipolytica）和扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsis fibuligera）5种常见的工业酵母菌,通过摇瓶发酵,进行了大豆乳清废水的SCP生产实验研究.结果表明,被试五种酵母菌均能在该废水中快速增殖,适宜的接种量介于0.3-0.4 g/L之间.其中,C.lipolytica var.lipolytica在废水COD质量浓度11 150 mg/L、初始pH值为6.17、25℃、180r/min等条件下,发酵12 h的细胞产量最大,达2.35 g/L,对废水COD的去除率达48.3%;在对数期的细胞增殖速率、收获SCP的蛋白质含量和蛋白质产量分别为0.3589 g/（L.h）、39.7%和0.88 g/L,均居于被试五种酵母之首.从生产SCP和去除废水COD角度考虑,C.lipolytica var.lipolytica和S.fibuligera是利用大豆乳清废水生产SCP的最适生产菌种.     

强降水天气过程的观测要点

台风＂梅花＂的到来,使我省迎来两次强降水天气过程,其中7月30日至31日辽源市气象站过程降水量达到75.5mm,达到暴雨等级,本文根据辽源市自动气象站的工作实际和笔者的工作经验,针对在强降水过程发生时,气象观测员可能遇见的突发状况和应急处理方式提出总结,针对各个实际问题分别给出不同的处理方法,有助于观测员提高工作技能,同时给各观测员提供交流经验的平台,为争取提高地面观测质量,提升气象观测数据准确性做些努力。     

α因子调控酿酒酵母细胞同步化

利用α因子可以使MATa酵母细胞的生长停滞在细胞周期的G1期,获得同步化的YKN-10酵母菌细胞,主要研究在25~200μg·mL-1浓度下的α因子对酿酒酵母YKN-10对数早期细胞作用0~5h的同步化影响,每隔0.5h在荧光倒置显微镜下观察酵母细胞的出芽形态,记录细胞的出芽率,然后用SPSS 17.0对酵母细胞的出芽率进行统计分析,α因子的浓度、α因子作用时间及二者的交互效应均对酵母细胞的平均出芽率有显著影响;α因子浓度在175~200μg·mL-1下培养酵母细胞约3.5~4h时,酵母细胞基本上达到了同步化状态,运用α因子停滞细胞生长法获得了同步化的YKN-10酵母菌群体,为非Δbar1突变菌株的同步化研究提供了参考.     

酵母菌营养体与子囊孢子的区分法

本文提出了酵母菌营养体与子囊孢子的简易、快速区分方法。     

酵母诱导子对肉苁蓉细胞悬浮培养影响的研究

目的:以酵母诱导子对肉苁蓉细胞悬浮培养及其抗氧化活性成分苯乙醇苷的合成动力学的影响进行研究.方法:从肉苁蓉种子诱导出愈伤组织,在MS培养基上进行细胞悬浮培养.首先考察肉苁蓉细胞生长和苯乙醇苷合成的动力学,在此基础上就酵母诱导子对细胞生长和苯乙醇苷合成的影响进行研究.结果:肉苁蓉悬浮细胞培养经过三天的延滞期后进入对数生长期,21天后细胞生长进入稳定期,最大生物量和苯乙醇苷产量分别达到8.03g DW/L和97 mg/L.在对数生长期后期,即培养的第18天加入0.8 mL/瓶浓度的酵母诱导子,诱导三天的效果最好,苯乙醇苷的最高产量为237.7 mg/L,为对照的239%.结论:合适浓度的酵母诱导子不但能够有效提高肉苁蓉细胞悬浮培养液中的苯乙醇苷含量,同时对细胞生长也具有促进作用.     

细胞周期调控的分子机制与关卡调控

通过对真核生物细胞增殖过程中细胞周期调控的分析, 归纳综合了以cyclin-CDK复合物为核心的细胞周期调控分子机制和以CKI、ATM、p53、Rb等为作用因子的关卡调控.此外, 外源性信号也对真核生物细胞周期起间接调控作用.     

啤酒酵母胞壁多糖提取工艺的研究

提出了一个从啤酒厂主要副产物－废酵母泥中制备胞壁多糖的新工艺。该工艺主要包括自，机械破碎，碱溶，中和，沉淀等工序，碱溶工序的最佳工艺条件为：按５：１（碱液体积ＭＬ：酵终胞壁湿重ｇ）比例加入２％的ＫＯＨ溶液，煮沸浸提１．５ｈ。在实验室规模下，在各工艺参数优化时，胞壁多糖得率为１０％，相对纯度达８３％，层析表明，组成胞壁多糖基本单位为甘露糖和葡萄糖。     

奥曲肽对鼻咽癌细胞株CNE2生长和细胞周期的影响

观察了一定剂量的奥曲肽对鼻咽癌细胞株CNE2的细胞生长与细胞周期的影响,探讨药物对的抗肿瘤作用,从而为临床治疗鼻咽癌提供一种新的思路,并在理论上奠定一定基础。用MTT法检测细胞生长抑制作用,流式细胞仪（FCM）检测细胞周期,t检验进行统计学分析。结果表明：1．0nmoL／L-1．0μmol／L的奥曲肽均能抑制鼻咽癌细胞株CNE2的生长,且在此范围内明显呈药物量——效关系,1．0μmol／L的奥曲肽可以使鼻咽癌细胞株CNE2阻滞在G0／G1期。一定剂量的奥曲肽能够抑制鼻咽癌细胞株CNE2的生长,奥曲肽有望在药物治疗鼻咽癌方面发挥一定的作用,值得进一步研究。     

多CPU控制系统时间片轮转调度的一种算法

设计了一个以ＳＴＤ总线为公用总线的９ＣＰＵ多机控制系统,给出了时间片转轮调的原理、硬件电路及软件设计。     

亚历山大藻细胞周期中毒素含量及组成的变化

用细胞同步化培养的方法,研究了塔玛亚历山大藻A.tamarenseCI01株不同细胞周期细胞中毒素含量与组成的变化.结果表明,A.tamarenseCI01细胞分裂主要发生在早上6时至8时,细胞密度在6 h内增加近一倍.细胞内毒素合成主要在细胞周期的G1期,由光诱导合成,毒素含量（fmol/cell,Qt）在光周期前8 h内从17 fmol/cell增加到分裂前的24 fmol/cell,而在其它细胞周期细胞内毒素含量稳定,基本不合成毒素.比较分析单细胞C1,2毒素和GTX2,3毒素合成时间及速率,推测在A.tamarenseCI01中细胞首先合成GTX2,3,在其它修饰酶的作用下再转化为C1,2.     

啤酒酵母的通透性对ATP生产活性的影响

利用甲苯、超声波和气流干燥等方法,对用于ＡＴＰ生产的啤酒酵母进行处理,考察了酵母细胞的通透性对其ＡＴＰ生产活性的影响,结果表明,腺苷（Ａｄｏ）转化率低于２０％好气培养细胞（Ａ－细胞）经处理后,转化率提高到３０％－１００％;Ａｄｏ转化率高的氧限制培养细胞（Ｍ－细胞）通透处理后,ＡＴＰ合成反应的时间缩短１－２ｈ。经通透化处理的酵母细胞能更有效地释放胞内物质和表面出较高的乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）、己糖激酶（     

埃克替尼对人涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞周期的影响

分别应用0、10、20、40μmol/L盐酸埃克替尼(icotinib hydrochloride)处理体外培养的人涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞,采用流式细胞仪分析药物作用24、48、72h后ACC-M细胞周期变化;同时应用间接免疫荧光联合流式细胞技术与免疫细胞化学方法,检测其对ACC-M细胞CyclinD1、P21蛋白表达的影响.结果显示,G0/G1期细胞比例随着盐酸埃克替尼浓度与作用时间的增加而增加,经统计学分析,G0/G1期阻滞作用与盐酸埃克替尼浓度、作用时间成正相关;盐酸埃克替尼作用于ACC-M细胞后,CyclinD1蛋白表达降低,P21蛋白表达增加.实验结果表明,盐酸埃克替尼可能通过下调CyclinD1蛋白的表达,上调P21蛋白的表达,改变ACC-M细胞周期分布,诱导ACC-M细胞周期阻滞于G0/G1期.